摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第9-21页 |
1.1 HIV-1 概述 | 第9页 |
1.2 抗 HIV-1 治疗的进展 | 第9-11页 |
1.3 BST-2 的结构与功能 | 第11-13页 |
1.4 Vpu 的结构与功能 | 第13-17页 |
1.5 蛋白质相互作用网络以及 Cytoscape 软件介绍 | 第17-18页 |
1.6 课题研究内容 | 第18-21页 |
第2章 人内源性抗 HIV-1 因子与 HIV-1 组分相互作用网络的构建以及潜在复合体的推测 | 第21-35页 |
2.1 研究材料 | 第21页 |
2.1.1 研究所用软件与插件 | 第21页 |
2.1.2 蛋白质-蛋白质相互作用网络外部资源 | 第21页 |
2.2 研究方法 | 第21-22页 |
2.2.1 可视化网络的构建 | 第21-22页 |
2.2.2 PPIs 网络的分析与潜在复合体的推测 | 第22页 |
2.3 研究结果 | 第22-34页 |
2.3.1 蛋白质相互作用可视化网络的构建 | 第22-26页 |
2.3.2 网络参数分析 | 第26-30页 |
2.3.3 潜在蛋白质复合体的预测 | 第30-34页 |
2.4 本章讨论与小结 | 第34-35页 |
第3章 野生型人 BST-2 在 293 FT 细胞中的表达 | 第35-49页 |
3.1 实验材料 | 第35-37页 |
3.1.1 菌种与质粒 | 第35页 |
3.1.2 细胞株 | 第35页 |
3.1.3 细胞培养相关材料 | 第35页 |
3.1.4 工具酶与试剂 | 第35-36页 |
3.1.5 序列的设计合成与测序 | 第36页 |
3.1.6 主要仪器 | 第36页 |
3.1.7 溶液配制 | 第36-37页 |
3.2 试验方法 | 第37-43页 |
3.2.1 RT-PCR 扩增野生型人 BST-2 基因片段 | 第37-39页 |
3.2.2 RT-PCR 产物回收 | 第39页 |
3.2.3 将 RT-PCR 产物连接到 pGEM-T 载体 | 第39-40页 |
3.2.4 质粒转化与菌落挑取 | 第40页 |
3.2.5 质粒少量提取 | 第40页 |
3.2.6 质粒酶切鉴定 | 第40页 |
3.2.7 将鉴定正确的载体双酶切并连接到 pEGFP-C3 或 pFC15A 载体 | 第40-42页 |
3.2.8 质粒转化、少量提取和酶切鉴定 | 第42页 |
3.2.9 质粒的大量提取 | 第42页 |
3.2.10 细胞培养 | 第42页 |
3.2.11 细胞转染 | 第42-43页 |
3.2.12 野生型人 BST-2 蛋白的亚细胞定位 | 第43页 |
3.3 实验结果 | 第43-46页 |
3.3.1 pEGFP-BST-2 与 pFC15A-BST-2 真核表达载体的构建 | 第43-44页 |
3.3.2 EGFP-BST-2 与 BST-2-HaloTag 在 293 FT 细胞中的表达 | 第44-46页 |
3.4 本章讨论与小结 | 第46-49页 |
第4章 人 BST-2 突变体真核表达载体的构建 | 第49-57页 |
4.1 实验材料 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-53页 |
4.2.1 重叠 PCR 反应 | 第49-51页 |
4.2.2 PCR 产物回收 | 第51页 |
4.2.3 PCR 产物连接到 pGEM-T 载体 | 第51页 |
4.2.4 质粒转化、菌落挑取 | 第51页 |
4.2.5 质粒少量提取 | 第51页 |
4.2.6 质粒酶切鉴定 | 第51-52页 |
4.2.7 将鉴定正确的载体双酶切并连接到 pcDNA3.1(+)载体 | 第52页 |
4.2.8 质粒转化、少量提取和酶切鉴定 | 第52-53页 |
4.2.9 质粒的大量提取 | 第53页 |
4.3 实验结果 | 第53-54页 |
4.4 本章讨论与小结 | 第54-57页 |
结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-65页 |
致谢 | 第65页 |