摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 猕猴桃溃疡病细菌病害的研究概况 | 第11-12页 |
1.2 植物病原细菌毒素的致病机制研究 | 第12-13页 |
1.3 Phaseolotoxin毒素的研究进展 | 第13-14页 |
1.4 基因功能的研究策略---转座子插入突变 | 第14-15页 |
1.5 快速获取突变体侧翼序列的方法 | 第15-18页 |
2 引言 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-34页 |
3.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的优化 | 第19-20页 |
3.1.1 供试菌株 | 第19页 |
3.1.2 供试培养基 | 第19页 |
3.1.3 供试试剂,试剂盒和主要实验仪器 | 第19页 |
3.1.4 试验方法 | 第19-20页 |
3.2 猕猴桃溃疡病菌EZ-Tn5突变体库的构建 | 第20-21页 |
3.2.1 供试菌株 | 第20页 |
3.2.2 供试培养基 | 第20页 |
3.2.3 试验方法 | 第20-21页 |
3.3 Phaseolotoxin毒素丧失突变株的筛选 | 第21-22页 |
3.3.1 供试菌株 | 第21页 |
3.3.2 供试试剂 | 第21页 |
3.3.3 试验方法 | 第21-22页 |
3.4 Tn5转座子插入突变株的检测 | 第22-25页 |
3.4.1 供试试剂 | 第22-23页 |
3.4.2 供试引物 | 第23页 |
3.4.3 试验方法 | 第23-25页 |
3.5 TAIL-PCR法扩增EZ-Tn5标签的侧翼序列 | 第25-28页 |
3.5.1 供试试剂,试剂盒 | 第25页 |
3.5.2 供试引物 | 第25-26页 |
3.5.3 试验方法 | 第26-28页 |
3.6 Tn5转座子侧翼序列分析及Tn5插入位点的全长基因序列克隆 | 第28-29页 |
3.6.1 侧翼序列分析 | 第28页 |
3.6.2 插入位点的全长基因序列克隆 | 第28-29页 |
3.7 Southern杂交验证转座子插入的拷贝数 | 第29-32页 |
3.7.1 供试试剂 | 第29页 |
3.7.2 供试试剂盒及耗材 | 第29-30页 |
3.7.3 试验方法 | 第30-32页 |
3.8 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响 | 第32-34页 |
3.8.1 试验方法 | 第32-34页 |
4 结果与分析 | 第34-42页 |
4.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的优化 | 第34页 |
4.2 猕猴桃溃疡病菌突变体库的构建 | 第34页 |
4.3 Phaseolotoxin毒素丧失突变株的筛选 | 第34-35页 |
4.4 Tn5转座子插入突变株的检测 | 第35-36页 |
4.5 TAIL-PCR法扩增EZ-Tn5转座子标签的侧翼序列 | 第36-37页 |
4.6 Tn5转座子侧翼序列分析及Tn5插入位点的全长基因序列克隆 | 第37-39页 |
4.7 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响 | 第39-42页 |
5 讨论 | 第42-44页 |
5.1 Phaseolotoxin毒素产生的最佳条件的研究 | 第42页 |
5.2 外源DNA导入微生物基因组中方法的研究 | 第42-43页 |
5.3 Phaseolotoxin毒素基因的研究 | 第43-44页 |
6 结论 | 第44-46页 |
6.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的研究 | 第44页 |
6.2 Phaseolotoxin毒素合成丧失突变株的筛选 | 第44页 |
6.3 猕猴桃溃疡病菌phaseolotoxin毒素丧失突变株的鉴定 | 第44页 |
6.4 Tn5插入失活基因的克隆及其序列分析 | 第44-45页 |
6.5 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |
[附]攻读硕士学位期间已发表的学术论文 | 第55页 |