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猕猴桃溃疡病菌突变体库构建及其phaselotoxin合成相关基因的克隆

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 文献综述第11-18页
    1.1 猕猴桃溃疡病细菌病害的研究概况第11-12页
    1.2 植物病原细菌毒素的致病机制研究第12-13页
    1.3 Phaseolotoxin毒素的研究进展第13-14页
    1.4 基因功能的研究策略---转座子插入突变第14-15页
    1.5 快速获取突变体侧翼序列的方法第15-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-34页
    3.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的优化第19-20页
        3.1.1 供试菌株第19页
        3.1.2 供试培养基第19页
        3.1.3 供试试剂,试剂盒和主要实验仪器第19页
        3.1.4 试验方法第19-20页
    3.2 猕猴桃溃疡病菌EZ-Tn5突变体库的构建第20-21页
        3.2.1 供试菌株第20页
        3.2.2 供试培养基第20页
        3.2.3 试验方法第20-21页
    3.3 Phaseolotoxin毒素丧失突变株的筛选第21-22页
        3.3.1 供试菌株第21页
        3.3.2 供试试剂第21页
        3.3.3 试验方法第21-22页
    3.4 Tn5转座子插入突变株的检测第22-25页
        3.4.1 供试试剂第22-23页
        3.4.2 供试引物第23页
        3.4.3 试验方法第23-25页
    3.5 TAIL-PCR法扩增EZ-Tn5标签的侧翼序列第25-28页
        3.5.1 供试试剂,试剂盒第25页
        3.5.2 供试引物第25-26页
        3.5.3 试验方法第26-28页
    3.6 Tn5转座子侧翼序列分析及Tn5插入位点的全长基因序列克隆第28-29页
        3.6.1 侧翼序列分析第28页
        3.6.2 插入位点的全长基因序列克隆第28-29页
    3.7 Southern杂交验证转座子插入的拷贝数第29-32页
        3.7.1 供试试剂第29页
        3.7.2 供试试剂盒及耗材第29-30页
        3.7.3 试验方法第30-32页
    3.8 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响第32-34页
        3.8.1 试验方法第32-34页
4 结果与分析第34-42页
    4.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的优化第34页
    4.2 猕猴桃溃疡病菌突变体库的构建第34页
    4.3 Phaseolotoxin毒素丧失突变株的筛选第34-35页
    4.4 Tn5转座子插入突变株的检测第35-36页
    4.5 TAIL-PCR法扩增EZ-Tn5转座子标签的侧翼序列第36-37页
    4.6 Tn5转座子侧翼序列分析及Tn5插入位点的全长基因序列克隆第37-39页
    4.7 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响第39-42页
5 讨论第42-44页
    5.1 Phaseolotoxin毒素产生的最佳条件的研究第42页
    5.2 外源DNA导入微生物基因组中方法的研究第42-43页
    5.3 Phaseolotoxin毒素基因的研究第43-44页
6 结论第44-46页
    6.1 猕猴桃溃疡病菌产phaseolotoxin毒素条件的研究第44页
    6.2 Phaseolotoxin毒素合成丧失突变株的筛选第44页
    6.3 猕猴桃溃疡病菌phaseolotoxin毒素丧失突变株的鉴定第44页
    6.4 Tn5插入失活基因的克隆及其序列分析第44-45页
    6.5 转座子插入失活基因对猕猴桃溃疡病菌致病性的影响第45-46页
参考文献第46-52页
附录第52-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页
[附]攻读硕士学位期间已发表的学术论文第55页

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