摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
缩略词表 | 第7-10页 |
第1章 引言 | 第10-34页 |
1.1 miR-22研究进展 | 第10-27页 |
1.1.1 miR-22与癌症 | 第11-21页 |
1.1.2 miR-22与生理疾病 | 第21-25页 |
1.1.3 miR-22与干/祖细胞分化 | 第25-27页 |
1.2 miRNA与毛囊发育 | 第27-32页 |
1.2.1 毛囊形态发生 | 第27页 |
1.2.2 毛发周期 | 第27-29页 |
1.2.3 miRNA转录后加工酶与毛囊发育 | 第29-30页 |
1.2.4 单个miRNA与毛囊发育 | 第30-32页 |
1.3 研究的目的和意义 | 第32-34页 |
第2章 材料与方法 | 第34-56页 |
2.1 实验材料 | 第34-39页 |
2.1.1 实验动物 | 第34页 |
2.1.2 细胞株 | 第34页 |
2.1.3 载体及菌株 | 第34页 |
2.1.4 引物及miR-22 mimics和inhibitor合成 | 第34页 |
2.1.5 试剂耗材 | 第34-36页 |
2.1.6 溶液配制 | 第36-38页 |
2.1.7 主要仪器设备 | 第38-39页 |
2.2 实验方法 | 第39-56页 |
2.2.1 小鼠杂交 | 第39页 |
2.2.2 转基因小鼠基因组提取与基因型鉴定 | 第39-41页 |
2.2.3 感受态细胞制备 | 第41页 |
2.2.4 RNA提取、反转录与定量PCR | 第41-44页 |
2.2.5 蛋白质提取及WB检测 | 第44-45页 |
2.2.6 DNA切胶回收、酶切、连接与转化 | 第45-47页 |
2.2.7 质粒提取 | 第47-48页 |
2.2.8 双荧光素酶报告基因载体构建以及细胞实验 | 第48-49页 |
2.2.9 Microarray检测与分析 | 第49-50页 |
2.2.10 皮肤组织石蜡包埋块制作 | 第50页 |
2.2.11 皮肤HE分析 | 第50-51页 |
2.2.12 免疫荧光染色 | 第51页 |
2.2.13 免疫组化染色 | 第51-52页 |
2.2.14 miR-22原位杂交 | 第52页 |
2.2.15 Brdu实验检测毛囊细胞分化 | 第52-53页 |
2.2.16 小鼠皮肤创伤实验 | 第53-54页 |
2.2.17 小鼠皮肤拔毛实验 | 第54页 |
2.2.18 小鼠皮肤毛囊干细胞分选与体外克隆形成 | 第54-55页 |
2.2.19 实验数据分析方法及相关软件 | 第55-56页 |
第3章 结果与分析 | 第56-81页 |
3.1 miR-22在小鼠毛囊周期中的表达模式 | 第56-58页 |
3.2 过表达miR-22抑制毛囊形态发生、毛发生长和促进小鼠脱毛 | 第58-62页 |
3.3 过表达miR-22促进毛囊退化 | 第62-65页 |
3.4 miR-22对毛囊退化是必需的 | 第65-66页 |
3.5 过表达miR-22抑制毛囊细胞增殖、分化和促进细胞凋亡 | 第66-70页 |
3.6 过表达miR-22抑制毛囊干细胞体外克隆形成和创伤后毛囊再生 | 第70-72页 |
3.7 miR-22是毛囊退化程序相关基因的关键负调控因子 | 第72-77页 |
3.8 多个毛囊分化转录因子是miR-22的直接靶基因 | 第77-81页 |
第4章 讨论与结论 | 第81-85页 |
4.1 讨论 | 第81-84页 |
4.2 结论 | 第84-85页 |
附录 | 第85-88页 |
附录1 引物序列 | 第85-87页 |
附录2 过表达miR-22促进小鼠胸腺退化 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
个人简历 | 第99页 |