| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 绪论 | 第14-33页 |
| 1.1 植物内生真菌 | 第14-16页 |
| 1.2 内生真菌宿主植物的选择 | 第16-17页 |
| 1.3 植物内生真菌活性代谢产物研究进展 | 第17-27页 |
| 1.3.1 生物碱类 | 第17-19页 |
| 1.3.2 萜类 | 第19-20页 |
| 1.3.3 甾体类 | 第20页 |
| 1.3.4 醌类 | 第20-21页 |
| 1.3.5 酯类 | 第21-23页 |
| 1.3.6 黄酮类 | 第23-24页 |
| 1.3.7 酚类及有机酸 | 第24页 |
| 1.3.8 酮类 | 第24-26页 |
| 1.3.9 其他类型 | 第26-27页 |
| 1.4 植物内生真菌产活性代谢产物的机制 | 第27页 |
| 1.5 微生物诱变 | 第27-31页 |
| 1.5.1 物理诱变 | 第28页 |
| 1.5.2 化学诱变 | 第28-29页 |
| 1.5.3 复合诱变 | 第29页 |
| 1.5.4 空间诱变及其地面模拟诱变 | 第29-31页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 1.7 研究内容 | 第32-33页 |
| 2 温莪术内生真菌的分离、鉴定及活性菌株的筛选 | 第33-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 生物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂与培养基 | 第34页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 2.2.1 温莪术内生真菌分离鉴定 | 第35页 |
| 2.2.2 活性菌株筛选 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-39页 |
| 2.3.1 温莪术内生真菌分离鉴定 | 第36-38页 |
| 2.3.2 活性菌株筛选 | 第38-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-41页 |
| 3 活性菌株EZG0807分子生物学鉴定及其生物学特性研究 | 第41-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-43页 |
| 3.1.1 菌株 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要试剂与培养基 | 第42页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.2.1 活性菌株形态学特征 | 第43页 |
| 3.2.2 活性菌株分子生物学鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2.3 活性菌株生物学特性 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 3.3.1 活性菌株EZG0807的鉴定 | 第45-48页 |
| 3.3.2 活性菌株EZG0807生物学特性 | 第48-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 4 模拟空间环境诱变内生真菌EZG0807 | 第53-77页 |
| 4.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 4.1.1 微生物材料 | 第54页 |
| 4.1.2 主要试剂与培养基 | 第54-55页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-62页 |
| 4.2.1 模拟空间环境诱变EZG0807 | 第55-56页 |
| 4.2.2 高活性突变株的筛选 | 第56-57页 |
| 4.2.3 高活性突变株的遗传稳定性检测 | 第57页 |
| 4.2.4 高活性突变株与出发菌株的比较 | 第57-58页 |
| 4.2.5 AFLP分子标记 | 第58-60页 |
| 4.2.6 目的条带的克隆 | 第60-62页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第62-76页 |
| 4.3.1 高活性突变株的筛选 | 第62-66页 |
| 4.3.2 突变菌株M7226的遗传稳定性 | 第66-67页 |
| 4.3.3 突变菌株M7226与出发菌株EZG0807生物学性质比较 | 第67-71页 |
| 4.3.4 模拟空间环境诱变机理探索 | 第71-76页 |
| 4.4 小结 | 第76-77页 |
| 5 菌株M7226发酵条件优化 | 第77-87页 |
| 5.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.1.1 菌株 | 第78页 |
| 5.1.2 主要培养基 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-79页 |
| 5.2.1 RSM优化发酵条件 | 第78页 |
| 5.2.2 菌株发酵及样品制备 | 第78页 |
| 5.2.3 发酵液抑菌活性测定 | 第78-79页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第79-85页 |
| 5.3.1 实验设计方案 | 第79页 |
| 5.3.2 二次回归拟合及方差分析 | 第79-81页 |
| 5.3.3 最佳发酵条件的确定 | 第81-85页 |
| 5.4 小结 | 第85-87页 |
| 6 菌株M7226次级代谢产物的分离纯化、结构鉴定及其生物活性研究 | 第87-103页 |
| 6.1 实验材料 | 第88-89页 |
| 6.1.1 菌株 | 第88页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第88-89页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第89页 |
| 6.2 实验方法 | 第89-93页 |
| 6.2.1 菌株M7226发酵及发酵液的预处理 | 第89-90页 |
| 6.2.2 菌株M7226发酵产物的提取与分离 | 第90-91页 |
| 6.2.3 化合物结构鉴定 | 第91-93页 |
| 6.2.4 最小抑菌浓度测定 | 第93页 |
| 6.2.5 细胞抑制率测定 | 第93页 |
| 6.2.6 数据统计学分析 | 第93页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第93-101页 |
| 6.3.1 菌株M7226次级代谢产物的结构鉴定 | 第94-97页 |
| 6.3.2 单体化合物抗菌活性分析 | 第97-99页 |
| 6.3.3 单体化合物抗肿瘤活性分析 | 第99-101页 |
| 6.4 小结 | 第101-103页 |
| 7 次级代谢产物体外抗肿瘤作用机制探索 | 第103-115页 |
| 7.1 实验材料 | 第104-105页 |
| 7.1.1 样品 | 第104页 |
| 7.1.2 细胞株 | 第104页 |
| 7.1.3 培养基及试剂 | 第104页 |
| 7.1.4 主要仪器 | 第104-105页 |
| 7.2 实验方法 | 第105-107页 |
| 7.2.1 荧光显微镜下观察细胞形态 | 第105页 |
| 7.2.2 活体细胞在线培养 | 第105页 |
| 7.2.3 RT-PCR测定基因表达水平 | 第105-107页 |
| 7.2.4 数据统计学分析 | 第107页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第107-114页 |
| 7.3.1 荧光显微镜下HepG2细胞形态 | 第107-109页 |
| 7.3.2 活体细胞在线培养 | 第109-110页 |
| 7.3.3 HepG2细胞相关基因表达水平 | 第110-114页 |
| 7.4 小结 | 第114-115页 |
| 8 结论与展望 | 第115-118页 |
| 8.1 结论 | 第115-117页 |
| 8.2 创新点 | 第117页 |
| 8.3 展望 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-139页 |
| 附录 | 第139-140页 |
| 攻读博士学位期间所发表的论文 | 第139页 |
| 攻读博士学位期间参加与本学位相关的科研课题 | 第139-140页 |
| 附图 | 第140-144页 |
