摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩写表(中英文对照) | 第7-11页 |
第一章 有毒动物毒腺的转录组学研究进展 | 第11-21页 |
1.1 有毒动物毒素的概况 | 第11-13页 |
1.2 有毒动物毒素的药用前景 | 第13-15页 |
1.3 有毒动物转录组学研究 | 第15-19页 |
1.3.1 构建cDNA文库 | 第15-19页 |
1.3.2 454式高通量测序技术 | 第19页 |
1.4 本文的研究背景和思路 | 第19-21页 |
第二章 雷氏大疣蛛毒腺转录组学研究 | 第21-62页 |
2.1 前言 | 第21-22页 |
2.2 材料、器材、试剂 | 第22-25页 |
2.2.1 材料 | 第22页 |
2.2.2 器材 | 第22页 |
2.2.3 试剂 | 第22-23页 |
2.2.4 部分试剂、溶液的配制 | 第23-25页 |
2.3 实验方法 | 第25-35页 |
2.3.1 雷氏大疣蛛毒腺cDNA文库构建的流程图(图2-2) | 第25页 |
2.3.2 RNA提取 | 第25-27页 |
2.3.3 通过LD-PCR合成SMARTer cDNA | 第27-29页 |
2.3.3.1 合成第一链cDNA | 第27-28页 |
2.3.3.2 通过LD-PCR合成双链cDNA | 第28-29页 |
2.3.4 双链cDNA的纯化及分级分离 | 第29-31页 |
2.3.5 通过In-fusion将SMARTer cDNA同源重组进入pSMART2IFD载体中 | 第31-32页 |
2.3.6 将重组的质粒转化进入大肠杆菌细胞中 | 第32-33页 |
2.3.7 计算构建好的质粒文库的滴度 | 第33页 |
2.3.8 DNA测序和生物信息学分析 | 第33-35页 |
2.3.8.1 菌落PCR鉴定文库转化子 | 第33-34页 |
2.3.8.2 DNA测序 | 第34页 |
2.3.8.3 生物信息学分析 | 第34-35页 |
2.4 结果 | 第35-60页 |
2.4.1 雷氏大疣蛛cDNA文库的构建 | 第35-37页 |
2.4.2 EST的测序及聚类分析 | 第37-38页 |
2.4.3 族的鉴定 | 第38-40页 |
2.4.4 雷氏大疣蛛毒腺cDNA文库中的类毒素基因 | 第40-55页 |
2.4.4.1 超家族Ⅰ | 第42-43页 |
2.4.4.2 超家族Ⅱ | 第43-45页 |
2.4.4.3 超家族Ⅲ | 第45-46页 |
2.4.4.4 超家族Ⅳ | 第46页 |
2.4.4.5 超家族Ⅴ | 第46-47页 |
2.4.4.6 超家族Ⅵ | 第47-48页 |
2.4.4.7 超家族Ⅶ | 第48-49页 |
2.4.4.8 超家族Ⅷ | 第49-50页 |
2.4.4.9 超家族Ⅸ | 第50页 |
2.4.4.10 超家族Ⅹ | 第50-51页 |
2.4.4.11 超家族Ⅺ | 第51-52页 |
2.4.4.12 超家族Ⅻ | 第52-53页 |
2.4.4.13 超家族ⅪⅡ | 第53-54页 |
2.4.4.14 超家族ⅩⅣ | 第54-55页 |
2.4.5 雷氏大疣蛛毒腺cDNA文库中蛋白质GO注释分析 | 第55-60页 |
2.5 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
附表 | 第71-79页 |
致谢 | 第79-81页 |