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示踪鼠疫菌构建及吞噬细胞对其吞噬能力的观察

缩略词表第1-7页
摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第12-19页
 1. 鼠疫菌的流行与概况第12-13页
 2. 鼠疫的致病机制第13-15页
 3. 宿主免疫第15页
 4. 鼠疫疫苗的研究第15-16页
 5. 本实验的目的和意义第16-18页
 6. 实验流程第18-19页
1. 实验材料第19页
   ·实验菌株及主要材料第19页
   ·实验所用主要试剂第19页
2. 实验方法第19-29页
   ·重组质粒的构建第19-22页
     ·引物设计与扩增目的片段第19-20页
     ·目的片段和质粒酶切第20-21页
     ·载体与目的基因的连接第21页
     ·连接体系转化感受态细胞第21页
     ·阳性克隆的增菌与筛选鉴定第21-22页
   ·细胞复苏第22-23页
     ·HEK293 细胞复苏第22页
     ·HEK293 传代第22页
     ·细胞铺板前计数第22页
     ·转染HEK293 细胞第22-23页
   ·融合蛋白免疫原性测定第23-24页
     ·细胞裂解第23页
     ·SDS-PAGE 蛋白电泳第23页
     ·Western blot第23-24页
   ·共聚焦检测巨噬细胞RAW 吞噬第24-25页
     ·增菌第24页
     ·巨噬细胞RAW 铺板第24页
     ·细胞吞噬实验第24-25页
   ·双质粒电转化进入EV76 和201P-第25-26页
     ·真核质粒pIRE52 DsRed-Expre552 转入EV76第25页
     ·重组真核质粒转入201P-第25页
     ·再次电转表达绿色荧光蛋白的原核质粒PBC-GFP第25-26页
   ·动物实验第26-29页
     ·准备工作第26页
     ·菌落计数第26页
     ·免疫小鼠第26页
     ·提取脾脏和腹腔巨噬细胞第26-29页
       ·提取腹腔内的巨噬细胞第27页
       ·脾脏处理第27-28页
         ·分离中性粒细胞第27页
         ·分离巨噬细胞第27-28页
         ·分离树突细胞第28页
       ·酶联免疫法检测小鼠体内抗体第28-29页
3. 结果与讨论第29-48页
   ·重组质粒转染293 细胞第29-30页
   ·WESTERN BLOT 鉴定目的蛋白第30-31页
   ·细胞吞噬实验第31-32页
   ·原核质粒表达第32-33页
   ·流式细胞仪检测结果第33-46页
   ·酶联免疫法检测免疫小鼠抗体的结果第46-48页
综述第48-54页
参考文献第54-57页
附录第57-73页
 实验所用主要仪器第57-58页
 实验所用试剂配制方法第58-71页
 硕士期间完成的其他工作第71-72页
 硕士期间发表的论文第72-73页
个人简历第73-74页
致谢第74-75页

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