| 学位论文数据集 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-42页 |
| 1.1 HIV-1病毒结合并进入宿主细胞 | 第20-22页 |
| 1.1.1 HIV-1病毒进入宿主细胞的基础 | 第20-22页 |
| 1.1.2 HIV-1病毒受体的发现 | 第22页 |
| 1.2 HIV-1病毒的脱壳过程 | 第22-27页 |
| 1.2.1 病毒的衣壳结构 | 第23-25页 |
| 1.2.2 脱壳过程发生的时间及地点 | 第25-26页 |
| 1.2.3 脱壳研究中的实验阻碍 | 第26-27页 |
| 1.3 HIV-1病毒的逆转录 | 第27-31页 |
| 1.3.1 病毒颗粒逆转录的过程 | 第27-29页 |
| 1.3.2 宿主细胞中的逆转录 | 第29-31页 |
| 1.4 HIV-1病毒的整合过程 | 第31-33页 |
| 1.4.1 整合过程的研究历史 | 第32页 |
| 1.4.2 宿主细胞内的整合过程 | 第32-33页 |
| 1.5 HIV-1病毒的组装、出芽和成熟 | 第33-36页 |
| 1.5.1 HIV-1病毒颗粒的组装和出芽过程 | 第34-35页 |
| 1.5.2 成熟的HIV-1病毒颗粒 | 第35-36页 |
| 1.6 HIV-1病毒的荧光标记 | 第36-41页 |
| 1.6.1 常用的荧光材料 | 第36-38页 |
| 1.6.2 荧光标记的HIV-1病毒颗粒 | 第38-40页 |
| 1.6.3 TALEN和CRISPR/Cas技术 | 第40-41页 |
| 1.7 本文研究思路与主要内容 | 第41-42页 |
| 第二章 HIV-1病毒早期侵染过程中的多步解离 | 第42-101页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第44-63页 |
| 2.1.1 实验材料与仪器 | 第44-47页 |
| 2.1.2 HIV-1重组质粒的构建 | 第47-54页 |
| 2.1.3 细胞培养 | 第54-57页 |
| 2.1.4 细胞转染 | 第57-58页 |
| 2.1.5 病毒颗粒的制备 | 第58页 |
| 2.1.6 荧光标记及病毒纯化 | 第58-59页 |
| 2.1.7 病毒p24表达量的测定(ELISA) | 第59-61页 |
| 2.1.8 免疫荧光 | 第61-62页 |
| 2.1.9 病毒滴度的测定(TCID50) | 第62页 |
| 2.1.10 病毒侵染及荧光成像 | 第62-63页 |
| 2.1.11 药物抑制实验 | 第63页 |
| 2.2 实验结果 | 第63-98页 |
| 2.2.1 构建有侵染能力的双色荧光病毒HIV~(Ru-TC) | 第63-67页 |
| 2.2.2 实时成像分析HIV-1基因组从衣壳蛋白中的释放过程 | 第67-70页 |
| 2.2.3 统计分析HIV-1病毒的脱壳过程 | 第70-75页 |
| 2.2.4 实时成像和统计分析基因组与基质蛋白的分离过程 | 第75-84页 |
| 2.2.5 实时成像和统计分析衣壳蛋白与基质蛋白的分离过程 | 第84-91页 |
| 2.2.6 实时成像分析基因组,衣壳蛋白与基质蛋白的多步解离过程 | 第91-94页 |
| 2.2.7 统计分析基因组,衣壳蛋白与基质蛋白的多步解离过程 | 第94-98页 |
| 2.3 结论 | 第98-101页 |
| 第三章 荧光探针抗漂白的新方法 | 第101-122页 |
| 3.1 实验材料和方法 | 第101-108页 |
| 3.1.1 质粒 | 第101-104页 |
| 3.1.2 细胞培养 | 第104-105页 |
| 3.1.3 细胞转染 | 第105页 |
| 3.1.4 病毒颗粒的制备 | 第105-106页 |
| 3.1.5 荧光标记及病毒纯化 | 第106页 |
| 3.1.6 免疫荧光 | 第106-107页 |
| 3.1.7 病毒滴度的测定(TCID50) | 第107-108页 |
| 3.1.8 病毒侵染及荧光成像 | 第108页 |
| 3.2 实验结果 | 第108-120页 |
| 3.2.1 构建耐漂白的单色荧光病毒颗粒HIV~(nC-Ru) | 第108-112页 |
| 3.2.2 脱壳过程中病毒抗漂白性能的消除 | 第112-118页 |
| 3.2.3 在最近真实地情况下研究HIV-1病毒的脱壳过程 | 第118-120页 |
| 3.3 结论 | 第120-122页 |
| 第四章 TALE用于HIV-1前病毒基因组成像 | 第122-131页 |
| 4.1 实验材料和方法 | 第122页 |
| 4.2 实验结果 | 第122-129页 |
| 4.2.1 TALE探针的设计和构建 | 第122-124页 |
| 4.2.2 TALE探针的量子点荧光标记和验证 | 第124-127页 |
| 4.2.3 活细胞内HIV-1前病毒DNA的单拷贝基因位点成像 | 第127-129页 |
| 4.3 结论 | 第129-131页 |
| 第五章 CRISPR用于HIV-1前病毒基因组 | 第131-136页 |
| 5.1 实验材料和方法 | 第131-132页 |
| 5.2 实验结果 | 第132-135页 |
| 5.2.1 CRISPR体系的设计和构建 | 第132-133页 |
| 5.2.2 CRISPR体系的量子点荧光标记和验证 | 第133-134页 |
| 5.2.3 活细胞内HIV-1前病毒DNA的单拷贝基因位点成像 | 第134-135页 |
| 5.3 结论 | 第135-136页 |
| 第六章 上转换纳米晶体传感器 | 第136-146页 |
| 6.1 实验材料和方法 | 第137-138页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第137页 |
| 6.1.2 上转换荧光纳米颗粒的表面官能团修饰 | 第137页 |
| 6.1.3 TNT和TNP的检测 | 第137-138页 |
| 6.2 实验结果 | 第138-144页 |
| 6.2.1 上转换纳米传感器的制备和表征 | 第138-140页 |
| 6.2.2 荧光分析检测及条件探索 | 第140-144页 |
| 6.3 结论 | 第144-146页 |
| 第七章 总结 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第164-165页 |
| 作者与导师简介 | 第165-166页 |
| 附件 | 第166-167页 |
