| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 环境激素概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 环境激素类物质及其种类 | 第14页 |
| 1.1.2 环境激素研究的发展历程 | 第14-15页 |
| 1.1.3 环境激素目前研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 双酚 A 概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 双酚 A 的理化性质及用途 | 第16-17页 |
| 1.2.2 双酚 A 的来源 | 第17-18页 |
| 1.2.3 双酚 A 的浓度分布 | 第18-19页 |
| 1.2.4 双酚 A 的检测 | 第19页 |
| 1.3 鱼类免疫系统概述 | 第19-22页 |
| 1.3.1 鱼类特异性免疫 | 第20页 |
| 1.3.2 鱼类非特异性免疫 | 第20-22页 |
| 1.4 双酚 A 对鱼类的免疫毒性研究进展 | 第22-23页 |
| 1.5 目的与意义 | 第23-24页 |
| 1.5.1 红鲤鱼的选取 | 第23页 |
| 1.5.2 本项研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.6 研究内容和技术路线 | 第24-27页 |
| 1.7 课题来源 | 第27-28页 |
| 第二章 双酚 A 长期暴露对红鲤鱼成鱼的氧化压迫 | 第28-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.1 实验动物及饲养条件 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 实验设计与样本采集 | 第29-30页 |
| 2.2.2 组织均浆制备 | 第30页 |
| 2.2.3 蛋白含量的测定 | 第30页 |
| 2.2.4 氧化压迫参数测定 | 第30-31页 |
| 2.2.5 抗氧化参数测定 | 第31页 |
| 2.2.6 数据处理 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-34页 |
| 2.3.1 氧化压迫参数变化 | 第31-32页 |
| 2.3.2 抗氧化参数变化 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 双酚 A 长期暴露对红鲤鱼免疫相关指标的影响 | 第36-49页 |
| 3.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 实验动物及饲养条件 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 实验设计 | 第37页 |
| 3.2.2 样本采集 | 第37-38页 |
| 3.2.3 组织均浆制备 | 第38页 |
| 3.2.4 蛋白含量的测定 | 第38页 |
| 3.2.5 呼吸爆发活性 | 第38页 |
| 3.2.6 血清溶菌酶 | 第38-39页 |
| 3.2.7 总蛋白/白蛋白/球蛋白 | 第39页 |
| 3.2.8 免疫球蛋白 IgM | 第39页 |
| 3.2.9 补体 C3 | 第39页 |
| 3.2.10 数据处理 | 第39-40页 |
| 3.3 结果 | 第40-44页 |
| 3.3.1 呼吸爆发活性 | 第40-41页 |
| 3.3.2 血清溶菌酶 | 第41-42页 |
| 3.3.3 总蛋白/白蛋白/球蛋白 | 第42页 |
| 3.3.4 免疫球蛋白 IgM | 第42-43页 |
| 3.3.5 补体 C3 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-48页 |
| 3.4.1 氧化防御 | 第45页 |
| 3.4.2 免疫指标 | 第45-48页 |
| 3.5 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 红鲤鱼巨噬细胞的体外培养及氧化还原参数侧定 | 第49-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第49-52页 |
| 4.1.1 实验动物及饲养条件 | 第49-50页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 4.1.3 主要实验试剂盒 | 第50页 |
| 4.1.4 其他试剂和耗材 | 第50页 |
| 4.1.5 主要溶液和配制 | 第50-51页 |
| 4.1.6 主要仪器与设备 | 第51-52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 4.2.1 实验设计 | 第52页 |
| 4.2.2 头肾巨噬细胞分离方法 | 第52-53页 |
| 4.2.3 血小球计数板计数 | 第53-54页 |
| 4.2.4 红鲤鱼头肾巨噬细胞最适培养基的选择 | 第54页 |
| 4.2.5 红鲤鱼头肾巨噬细胞最适培养条件选择 | 第54页 |
| 4.2.6 红鲤鱼头肾巨噬细胞增殖实验 | 第54-55页 |
| 4.2.7 红鲤鱼头肾巨噬细胞的鉴定 | 第55页 |
| 4.2.8 样本采集 | 第55-56页 |
| 4.2.9 蛋白含量的测定 | 第56页 |
| 4.2.10 氧化还原参数测定 | 第56页 |
| 4.2.11 数据处理 | 第56页 |
| 4.3 结果 | 第56-64页 |
| 4.3.1 巨噬细胞最适培养基的选择 | 第56-57页 |
| 4.3.2 巨噬细胞最适培养温度及铺板密度的选择 | 第57-58页 |
| 4.3.3 巨噬细胞增殖实验 | 第58-59页 |
| 4.3.4 巨噬细胞体外培养 | 第59-60页 |
| 4.3.5 巨噬细胞的鉴定 | 第60-61页 |
| 4.3.6 氧化还原参数 | 第61-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-67页 |
| 4.4.1 红鲤鱼巨噬细胞离体培养 | 第65-66页 |
| 4.4.2 红鲤鱼巨噬细胞氧化还原参数变化 | 第66-67页 |
| 4.5 小结 | 第67-68页 |
| 第五章 双酚 A 短期暴露对红鲤鱼巨噬细胞免疫相关基因表达的影响 | 第68-87页 |
| 5.1 实验材料 | 第68-70页 |
| 5.1.1 实验动物及饲养条件 | 第68-69页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第69页 |
| 5.1.3 主要实验试剂盒 | 第69页 |
| 5.1.4 其他试剂和耗材 | 第69页 |
| 5.1.5 主要溶液和配制 | 第69-70页 |
| 5.1.6 主要仪器与设备 | 第70页 |
| 5.2 实验方法 | 第70-77页 |
| 5.2.1 实验设计 | 第70-71页 |
| 5.2.2 样本采集 | 第71页 |
| 5.2.3 巨噬细胞总 RNA 的提取 | 第71-72页 |
| 5.2.4 巨噬细胞 cDNA 的获得 | 第72页 |
| 5.2.5 巨噬细胞免疫相关基因的引物验证 | 第72-76页 |
| 5.2.6 BPA 暴露对巨噬细胞免疫相关基因 Real-time PCR 分析 | 第76-77页 |
| 5.2.7 数据处理 | 第77页 |
| 5.3 结果 | 第77-85页 |
| 5.3.1 巨噬细胞 RNA 的提取及 RNA 凝胶电泳图 | 第77-78页 |
| 5.3.2 巨噬细胞免疫相关基因引物验证 | 第78-82页 |
| 5.3.3 BPA 刺激巨噬细胞相关免疫基因表达差异 | 第82-85页 |
| 5.4 讨论 | 第85-86页 |
| 5.5 小结 | 第86-87页 |
| 结论与展望 | 第87-89页 |
| 一、结论 | 第87-88页 |
| 二、展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-96页 |
| 参加课题与科研成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
