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人工锌指蛋白的筛选系统的构建及其在牛β酪蛋白基因上的应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·转基因动物技术第11-13页
     ·转基因动物的发现及其意义第11-12页
     ·转基因技术的特点第12页
     ·转基因技术的研究进展第12-13页
   ·锌指核酸酶技术第13-21页
     ·锌指核酸酶发现及其意义第13页
     ·锌指核酸酶技术简介第13-21页
   ·锌指核酸酶的研究进展第21-22页
   ·酵母单杂交技术第22-23页
第二章 筛选系统的建立第23-44页
   ·材料与方法第23-36页
     ·材料第23-25页
     ·方法第25-36页
   ·结果第36-42页
     ·报告载体的构建结果第36-38页
     ·激活载体的构建结果第38页
     ·随机锌指蛋白库的构建结果:第38-42页
   ·讨论第42-44页
     ·报告载体 pReport-N-EGFP第42页
     ·随机锌指蛋白库的构建第42页
     ·激活载体 pAD-R-G第42-44页
第三章 牛酪蛋白基因上锌指蛋白识别位点的筛选第44-50页
   ·材料与方法第44-46页
     ·材料第44-45页
     ·方法第45-46页
   ·结果第46-49页
     ·设计得到的锌指蛋白识别位点第46-47页
     ·酶切报告载体 pReport-N-EGFP 结果第47页
     ·菌落 PCR 鉴定载体 pReport-N-EGFP-CNSY 与 pReport-N-EGFP-CNSZ第47-48页
     ·pReport-N-EGFP-CNS 图谱第48-49页
   ·讨论第49-50页
第四章 利用筛选系统筛选针对牛酪蛋白基因的锌指蛋白第50-55页
   ·材料与方法第50-52页
     ·材料第50页
     ·方法第50-52页
   ·结果第52-54页
     ·筛选条件第52页
     ·PCR 鉴定筛选得到的锌指蛋白第52-53页
     ·EGFP 活性测定第53页
     ·测序结果第53-54页
   ·讨论第54-55页
第五章 酵母单杂交技术验证筛选锌指蛋白的活性第55-64页
   ·材料与方法第55-59页
     ·材料第55-56页
     ·方法第56-59页
   ·结果第59-62页
     ·报告载体 pLaczi-CNS 构建结果第59-60页
     ·报告菌株构建结果第60页
     ·报告菌株的生长情况第60-61页
     ·pGADT7-ZFS 图谱及其 PCR 鉴定第61页
     ·Leu 缺陷型培养基上菌株的生长状况第61-62页
     ·测定酵母菌株 LacZ 活性第62页
   ·讨论第62-64页
结论第64-65页
参考文献第65-69页
附录第69-74页
缩略词第74-75页
致谢第75-76页
作者简介第76页

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