摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
·转基因动物技术 | 第11-13页 |
·转基因动物的发现及其意义 | 第11-12页 |
·转基因技术的特点 | 第12页 |
·转基因技术的研究进展 | 第12-13页 |
·锌指核酸酶技术 | 第13-21页 |
·锌指核酸酶发现及其意义 | 第13页 |
·锌指核酸酶技术简介 | 第13-21页 |
·锌指核酸酶的研究进展 | 第21-22页 |
·酵母单杂交技术 | 第22-23页 |
第二章 筛选系统的建立 | 第23-44页 |
·材料与方法 | 第23-36页 |
·材料 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-36页 |
·结果 | 第36-42页 |
·报告载体的构建结果 | 第36-38页 |
·激活载体的构建结果 | 第38页 |
·随机锌指蛋白库的构建结果: | 第38-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
·报告载体 pReport-N-EGFP | 第42页 |
·随机锌指蛋白库的构建 | 第42页 |
·激活载体 pAD-R-G | 第42-44页 |
第三章 牛酪蛋白基因上锌指蛋白识别位点的筛选 | 第44-50页 |
·材料与方法 | 第44-46页 |
·材料 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-46页 |
·结果 | 第46-49页 |
·设计得到的锌指蛋白识别位点 | 第46-47页 |
·酶切报告载体 pReport-N-EGFP 结果 | 第47页 |
·菌落 PCR 鉴定载体 pReport-N-EGFP-CNSY 与 pReport-N-EGFP-CNSZ | 第47-48页 |
·pReport-N-EGFP-CNS 图谱 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
第四章 利用筛选系统筛选针对牛酪蛋白基因的锌指蛋白 | 第50-55页 |
·材料与方法 | 第50-52页 |
·材料 | 第50页 |
·方法 | 第50-52页 |
·结果 | 第52-54页 |
·筛选条件 | 第52页 |
·PCR 鉴定筛选得到的锌指蛋白 | 第52-53页 |
·EGFP 活性测定 | 第53页 |
·测序结果 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
第五章 酵母单杂交技术验证筛选锌指蛋白的活性 | 第55-64页 |
·材料与方法 | 第55-59页 |
·材料 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-59页 |
·结果 | 第59-62页 |
·报告载体 pLaczi-CNS 构建结果 | 第59-60页 |
·报告菌株构建结果 | 第60页 |
·报告菌株的生长情况 | 第60-61页 |
·pGADT7-ZFS 图谱及其 PCR 鉴定 | 第61页 |
·Leu 缺陷型培养基上菌株的生长状况 | 第61-62页 |
·测定酵母菌株 LacZ 活性 | 第62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
附录 | 第69-74页 |
缩略词 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简介 | 第76页 |