摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第15-30页 |
1.1 磁性微纳米颗粒及其生物医学应用 | 第15-16页 |
1.1.1 磁性微纳米颗粒 | 第15-16页 |
1.1.2 磁性微纳米颗粒的生物医学应用 | 第16页 |
1.2 磁性微纳米颗粒用于核酸DNA的分离 | 第16-17页 |
1.2.1 核酸磁分离的基本流程 | 第16-17页 |
1.2.2 核酸磁分离的优势 | 第17页 |
1.3 氧化硅磁颗粒用于核酸DNA的分离 | 第17-20页 |
1.3.1 氧化硅磁颗粒对DNA的吸附 | 第18-19页 |
1.3.2 氧化硅磁颗粒对DNA的脱附 | 第19-20页 |
1.4 氨基修饰的磁颗粒用于核酸DNA的分离 | 第20-21页 |
1.4.1 氨基磁颗粒对DNA的吸附 | 第20页 |
1.4.2 氨基磁颗粒对DNA的脱附 | 第20-21页 |
1.5 羧基修饰的磁颗粒用于核酸DNA的分离 | 第21-25页 |
1.5.1 PEG和盐引起的DNA塌缩 | 第22-24页 |
1.5.2 羧基磁颗粒对DNA的吸附 | 第24-25页 |
1.5.3 羧基磁颗粒对DNA的脱附 | 第25页 |
1.6 其他吸附和脱附类型磁颗粒用于核酸DNA的分离 | 第25-26页 |
1.7 研究展望 | 第26-27页 |
1.8 本论文研究目的、研究内容及创新性 | 第27-30页 |
1.8.1 研究目的 | 第27-28页 |
1.8.2 研究内容 | 第28页 |
1.8.3 创新性 | 第28-30页 |
第二章 氧化硅磁颗粒对微量核酸回收率的研究 | 第30-68页 |
2.1 前言 | 第30-31页 |
2.2 Langmuir吸附模型对氧化硅磁颗粒提取核酸回收率的分析 | 第31-33页 |
2.3 氧化硅磁颗粒对于较高浓度DNA回收率的研究 | 第33-36页 |
2.3.1 实验部分 | 第33-34页 |
2.3.1.1 实验材料和试剂 | 第33页 |
2.3.1.2 仪器设备 | 第33页 |
2.3.1.3 研究方法 | 第33页 |
2.3.1.4 实验方法 | 第33-34页 |
2.3.2 结果与讨论 | 第34-36页 |
2.4 氧化硅磁颗粒对微量DNA回收率的研究 | 第36-47页 |
2.4.1 实验部分 | 第36-40页 |
2.4.1.1 实验材料 | 第36页 |
2.4.1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
2.4.1.3 仪器设备 | 第37页 |
2.4.1.4 研究方法 | 第37-39页 |
2.4.1.5 实验方法 | 第39-40页 |
2.4.2 结果与讨论 | 第40-47页 |
2.4.2.1 目标DNA片段的检测 | 第40-41页 |
2.4.2.2 标准样品的QPCR扩增 | 第41-42页 |
2.4.2.3 标准曲线方程的建立 | 第42-43页 |
2.4.2.4 氧化硅磁颗粒对微量核酸的回收 | 第43-47页 |
2.5 Zeta电位对氧化硅磁颗粒提取微量核酸回收率的影响 | 第47-49页 |
2.5.1 实验部分 | 第47页 |
2.5.1.1 实验材料和试剂 | 第47页 |
2.5.1.2 仪器设备 | 第47页 |
2.5.1.3 实验方法 | 第47页 |
2.5.2 结果与讨论 | 第47-49页 |
2.6 振荡对氧化硅磁颗粒提取微量核酸回收率的影响 | 第49-52页 |
2.6.1 实验部分 | 第49-50页 |
2.6.1.1 实验材料和试剂 | 第49页 |
2.6.1.2 仪器设备 | 第49页 |
2.6.1.3 实验方法 | 第49-50页 |
2.6.2 结果与讨论 | 第50-52页 |
2.7 核酸浓度对氧化硅磁颗粒提取微量核酸回收率的影响 | 第52-57页 |
2.7.1 实验部分 | 第52页 |
2.7.1.1 实验材料和试剂 | 第52页 |
2.7.1.2 仪器设备 | 第52页 |
2.7.1.3 实验方法 | 第52页 |
2.7.2 结果与讨论 | 第52-57页 |
2.8 脱附液体积对氧化硅磁颗粒提取微量核酸回收率的影响 | 第57-60页 |
2.8.1 实验部分 | 第57-58页 |
2.8.1.1 实验材料和试剂 | 第57页 |
2.8.1.2 仪器设备 | 第57页 |
2.8.1.3 实验方法 | 第57-58页 |
2.8.2 结果与讨论 | 第58-60页 |
2.9 磁分离时间对氧化硅磁颗粒提取微量核酸回收率的影响 | 第60-63页 |
2.9.1 实验部分 | 第60-61页 |
2.9.1.1 实验材料和试剂 | 第60页 |
2.9.1.2 仪器设备 | 第60页 |
2.9.1.3 实验方法 | 第60-61页 |
2.9.2 结果与讨论 | 第61-63页 |
2.10 带入氧化硅磁颗粒提高核酸分子检测灵敏度的研究 | 第63-67页 |
2.10.1 实验部分 | 第63页 |
2.10.1.1 实验材料和试剂 | 第63页 |
2.10.1.2 仪器设备 | 第63页 |
2.10.1.3 实验方法 | 第63页 |
2.10.2 结果与讨论 | 第63-67页 |
2.11 本章小结 | 第67-68页 |
第三章 氨基氧化硅磁颗粒对微量核酸的回收研究 | 第68-81页 |
3.1 前言 | 第68-69页 |
3.2 实验部分 | 第69-71页 |
3.2.1 实验材料和试剂 | 第69页 |
3.2.2 仪器设备 | 第69-70页 |
3.2.3 实验方法 | 第70-71页 |
3.2.3.1 氨基氧化硅磁颗粒对核酸的吸附 | 第70页 |
3.2.3.2 核酸从氨基氧化硅磁颗粒上的脱附 | 第70页 |
3.2.3.3 氨基氧化硅磁颗粒对核酸的吸附量分析 | 第70-71页 |
3.2.3.4 氨基氧化硅磁颗粒对PCR扩增的影响 | 第71页 |
3.3 结果与讨论 | 第71-80页 |
3.3.1 氨基氧化硅磁颗粒对微量核酸吸附量的定性分析 | 第71-72页 |
3.3.2 氨基氧化硅磁颗粒对微量核酸吸附量的定量分析 | 第72-74页 |
3.3.3 磷酸根离子对氨基结合DNA分子的脱附 | 第74-75页 |
3.3.4 dNTP浓度对氨基结合DNA分子的脱附影响 | 第75-77页 |
3.3.5 核酸浓度对氨基结合DNA分子的脱附影响 | 第77-78页 |
3.3.6 dNTP用于氨基上DNA分子脱附的模型建立 | 第78页 |
3.3.7 氨基对PCR扩增的影响及带入氨基磁颗粒PCR的检测 | 第78-80页 |
3.4 本章小结 | 第80-81页 |
第四章 羧基氧化硅磁颗粒用于DNA片段的选择性分离研究 | 第81-112页 |
4.1 前言 | 第81-82页 |
4.2 函数拟合法对DNA片段临界聚乙二醇(PEG)浓度的确定 | 第82-94页 |
4.2.1 实验部分 | 第82-85页 |
4.2.1.1 实验材料和试剂 | 第82-83页 |
4.2.1.2 仪器设备 | 第83页 |
4.2.1.3 实验方法 | 第83-85页 |
4.2.2 结果与讨论 | 第85-94页 |
4.2.2.1 DNA片段的准备 | 第85-86页 |
4.2.2.2 函数拟合法对DNA片段临界PEG浓度值的确定 | 第86-88页 |
4.2.2.3 函数拟合法确定临界PEG浓度值的可靠性分析 | 第88-90页 |
4.2.2.4 函数拟合法对DNA片段临界PEG浓度确定的适用性分析 | 第90-92页 |
4.2.2.5 函数拟合法确定DNA片段临界PEG浓度的有效性验证 | 第92-94页 |
4.3 DNA片段临界PEG浓度的影响因素研究 | 第94-99页 |
4.3.1 实验部分 | 第94-95页 |
4.3.1.1 实验材料和试剂 | 第94页 |
4.3.1.2 仪器设备 | 第94页 |
4.3.1.3 实验方法 | 第94-95页 |
4.3.2 结果与讨论 | 第95-99页 |
4.3.2.1 pH对临界PEG浓度的影响 | 第95-96页 |
4.3.2.2 PEG分子量对临界PEG浓度的影响 | 第96页 |
4.3.2.3 长片段DNA对短片段DNA临界PEG浓度的影响 | 第96-97页 |
4.3.2.4 羧基磁颗粒对临界PEG浓度的影响 | 第97-99页 |
4.4 回收谱用于选择性DNA片段分离所需NaCl和PEG浓度的确定 | 第99-110页 |
4.4.1 实验部分 | 第99-101页 |
4.4.1.1 实验材料和试剂 | 第99页 |
4.4.1.2 仪器设备 | 第99页 |
4.4.1.3 实验方法 | 第99-101页 |
4.4.2 结果与讨论 | 第101-110页 |
4.4.2.1 DNA片段的准备 | 第101-102页 |
4.4.2.2 DNA回收率分析及临界PEG浓度确定 | 第102-103页 |
4.4.2.3 DNA片段回收谱的建立及应用 | 第103-105页 |
4.4.2.4 不同长度DNA片段间分离分辨率分析 | 第105-106页 |
4.4.2.5 回收谱用于DNA选择性分离所需NaCl和PEG浓度的确定 | 第106-110页 |
4.5 本章小结 | 第110-112页 |
第五章 羧基氧化硅磁颗粒用于DNA片段选择性分离的初步应用 | 第112-119页 |
5.1 前言 | 第112-113页 |
5.2 实验部分 | 第113-115页 |
5.2.1 实验材料和试剂 | 第113页 |
5.2.2 仪器设备 | 第113页 |
5.2.3 实验方法 | 第113-115页 |
5.2.3.1 DNA片段的准备 | 第113-114页 |
5.2.3.2 DNA片段的选择性分离 | 第114-115页 |
5.3 结果与讨论 | 第115-118页 |
5.3.1 DNA片段选择性分离所需NaCl和PEG浓度的确定 | 第115-116页 |
5.3.2 选择性DNA片段分离 | 第116-118页 |
5.4 本章小结 | 第118-119页 |
第六章 全文总结 | 第119-121页 |
6.1 主要结论 | 第119-120页 |
6.2 研究展望 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-134页 |
附录 | 第134-135页 |
致谢 | 第135-137页 |
攻读学位期间发表(或录用)的学术论文 | 第137-139页 |