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番茄抗叶霉病Cf-12候选基因的筛选及抗性应答机制分析

摘要第10-13页
Abstract第13-16页
1 前言第17-41页
    1.1 植物抗性机制研究进展第17-29页
        1.1.1 植物抗病机制模型第17-19页
        1.1.2 植物抗性(R)基因第19-22页
        1.1.3 病原物Avr基因产物结构与功能第22-23页
        1.1.4 植物与病原菌的互作模式第23-24页
        1.1.5 植物对病原菌的抗性信号传导第24-28页
        1.1.6 植物防卫反应的启动第28-29页
    1.2 番茄与叶霉菌的互作研究进展第29-34页
        1.2.1 番茄叶霉病抗性基因第29-31页
        1.2.2 叶霉菌Avr基因产物的结构和功能第31-32页
        1.2.3 Cf/Avr的蛋白识别复合体及下游防卫信号转导第32-34页
    1.3 高通量测序技术第34-37页
        1.3.1 高通量测序技术概述第34页
        1.3.2 转录组测序技术研究第34-37页
    1.4 VIGS技术在植物基因功能鉴定中的作用第37-38页
    1.5 研究目的意义第38-39页
    1.6 研究内容与技术路线第39-41页
        1.6.1 研究内容第39-40页
        1.6.2 研究技术路线第40-41页
2 材料与方法第41-61页
    2.1 Cf-12 基因对C.fulvum的抗性特征第41-42页
        2.1.1 试验材料第41页
        2.1.2 试验方法第41-42页
    2.2 Cf-12 基因对C.fulvum的抗性范围第42-43页
    2.3 Cf-12 基因的抗性遗传规律第43页
        2.3.1 试验材料第43页
        2.3.2 试验方法第43页
    2.4 番茄抗叶霉病Cf-12候选基因的筛选第43-47页
        2.4.1 LA0716、CGN7495两亲本重测序第43-44页
        2.4.2 LA0716与CGN7495 F_2代群体简化测序第44-45页
        2.4.3 亲本重测序与F_2代简化测序的关联分析第45-46页
        2.4.4 关联区域内Cf-12候选基因的获得第46页
        2.4.5 Cf-12候选基因编码蛋白的生物信息学分析第46-47页
        2.4.6 Cf-12候选基因的表达模式分析第47页
    2.5 Cf-12 番茄与C.fulvum非亲和互作的转录组学分析第47-57页
        2.5.1 试验材料第48页
        2.5.2 RNA测序文库的构建第48页
        2.5.3 RNA-seq生物信息分析流程第48-51页
        2.5.4 可变剪接的识别第51页
        2.5.5 基因的表达水平分析第51-52页
        2.5.6 RNA-seq样品间相关性分析第52页
        2.5.7 样品间差异表达基因的筛选第52-53页
        2.5.8 差异表达基因的GO分析第53页
        2.5.9 差异表达基因的Pathway分析第53页
        2.5.10 差异表达基因的蛋白互作分析第53页
        2.5.11 差异表达基因的转录因子分析第53-54页
        2.5.12 DEGs的q RT-PCR校验第54-57页
    2.6 部分基因的VIGS验证第57-61页
        2.6.1 VIGS载体的构建第57-59页
        2.6.2 VIGS农杆菌侵染体系的建立第59-60页
        2.6.3 基因沉默植株的C.fulvum侵染性鉴定第60-61页
3 结果与分析第61-135页
    3.1 Cf-12 基因对C.fulvum的抗性特征第61-64页
        3.1.1 台盼蓝染色和抗病性鉴定第61-63页
        3.1.2 H_2O_2的染色监测第63-64页
    3.2 Cf-12 基因对C.fulvum的抗性范围第64页
    3.3 Cf-12 基因的抗性遗传规律分析第64-67页
    3.4 番茄抗叶霉病Cf-12 候选基因的筛选结果第67-95页
        3.4.1 亲本重测序及子代简化测序结果分析第67-72页
        3.4.2 亲本重测序与F_2代简化测序的关联分析第72-74页
        3.4.3 关联区域内Cf-12候选基因的确定第74-79页
        3.4.4 Cf-12候选基因及编码蛋白的生物信息学分析第79-89页
        3.4.5 候选基因编码蛋白的功能和交互网络分析第89-94页
        3.4.6 Cf-12候选基因的表达模式分析第94-95页
    3.5 Cf-12 番茄与C.fulvum非亲和互作的转录组学分析第95-131页
        3.5.1 样本RNA含量和质量检测结果第95页
        3.5.2 RNA-seq质量评估结果第95页
        3.5.3 参考序列的比对情况统计第95-101页
        3.5.4 基因表达水平和相关性分析第101-104页
        3.5.5 差异表达基因的识别第104-108页
        3.5.6 DEGs的qRT-PCR校验第108-110页
        3.5.7 非亲和互作的可变剪接识别第110-116页
        3.5.8 差异表达基因的GO分析第116-120页
        3.5.9 差异表达基因的Pathway分析第120-129页
        3.5.10 非亲和互作的转录因子分析第129-130页
        3.5.11 Cf-12番茄和C.fulvum非亲和互作的机制第130-131页
    3.6 部分基因的VIGS验证第131-135页
        3.6.1 质粒和目的基因片段的提取结果第131-132页
        3.6.2 含目的基因TRV2载体的构建结果第132页
        3.6.3 VIGS的症状调查第132-135页
4 讨论第135-144页
    4.1 Cf-12基因与C.fulvum的互作特征第135-136页
        4.1.1 Cf与C.fulvum的亲和互作特征第135页
        4.1.2 Cf-12基因与C.fulvum的非亲和互作特征第135-136页
    4.2 Cf基因对C.fulvum生理小种的抗性范围第136页
    4.3 Cf-12 基因对C.fulvum的抗性遗传第136-137页
    4.4 亲本重测序与F_2代简化测序筛选Cf-12基因第137-138页
    4.5 Cf-12基因介导的对C.fulvum的抗性应答机制第138-142页
        4.5.1 抗性应答反应中的差异基因聚类第139页
        4.5.2 抗性应答反应中差异基因的可变剪接第139-140页
        4.5.3 抗性应答反应中差异表达基因的GO和Pathway分析第140-142页
    4.6 部分基因的VIGS侵染验证第142-143页
    4.7 本试验的创新点第143页
    4.8 展望第143-144页
5 结论第144-145页
致谢第145-146页
参考文献第146-167页
附录第167-183页
攻读博士学位期间发表的学术论文第183页

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