| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第一章 材料与方法 | 第9-24页 |
| 1.1 仪器、试剂和耗材 | 第9-10页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第9页 |
| 1.1.2 主要试剂和耗材 | 第9-10页 |
| 1.2 细胞系及胃癌组织标本的选择 | 第10-11页 |
| 1.2.1 细胞系的选择 | 第10页 |
| 1.2.2 胃癌组织标本的选择 | 第10-11页 |
| 1.3 细胞的处理 | 第11-12页 |
| 1.3.1 实验前准备 | 第11页 |
| 1.3.2 首次传代前细胞的复苏 | 第11页 |
| 1.3.3 培养液的更换 | 第11页 |
| 1.3.4 细胞传代 | 第11-12页 |
| 1.3.5 细胞系DNA的提取 | 第12页 |
| 1.4 胃癌组织的处理 | 第12-15页 |
| 1.4.1 胃癌组织DNA的提取 | 第12-13页 |
| 1.4.2 石蜡包埋胃癌组织DNA的提取 | 第13-14页 |
| 1.4.3 DNA样本的焦亚硫酸盐修饰 | 第14-15页 |
| 1.5 胃癌组织RNA的提取与处理 | 第15-18页 |
| 1.5.1 新鲜胃癌组织RNA的提取与纯化 | 第15-16页 |
| 1.5.2 RNA样品中残留DNA的灭活 | 第16页 |
| 1.5.3 石蜡包埋胃癌组织RNA的提取 | 第16-18页 |
| 1.5.4 cDNA的合成 | 第18页 |
| 1.6 亚硫酸盐基因测序法检测IGF2甲基化状态 | 第18-19页 |
| 1.7 IGF2印迹状态检测 | 第19-22页 |
| 1.7.1 细胞系及胃癌组织DNA水平IGF2基因型分析 | 第19-21页 |
| 1.7.2 胃癌组织RNA水平印迹状态检测 | 第21-22页 |
| 1.8 IGF2 mRNA检测 | 第22-23页 |
| 1.8.1 一步法实时荧光定量PCR | 第22页 |
| 1.8.2 Real-time qPCR结果数据分析 | 第22-23页 |
| 1.9 免疫组织化检测胃癌及癌旁组织IGF2蛋白表达 | 第23-24页 |
| 1.9.1 免疫组织化学染色(SP法) | 第23页 |
| 1.9.2 免疫组织化学染色结果评分标准 | 第23-24页 |
| 第二章 结果 | 第24-32页 |
| 2.1 IGF2启动子甲基化状态BGS检测结果 | 第24-26页 |
| 2.1.1 细胞系中IGF2启动子甲基化状态BGS检测结果 | 第24-25页 |
| 2.1.2 EBVa GC 和 EBVn GC 组织中 IGF2 基因启动子甲基化状态 BGS 检测结果 | 第25-26页 |
| 2.2 IGF2 印迹表达状态 | 第26-29页 |
| 2.2.1 DNA水平IGF2基因型分析 | 第26-28页 |
| 2.2.2 胃癌组织中IGF2基因印迹状态表达 | 第28-29页 |
| 2.3 EBVa GC 和 EBVn GC 组织中 IGF2 m RNA 的转录表达 | 第29-31页 |
| 2.4 胃癌及相应癌旁组织中 IGF2 蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 第三章 讨论 | 第32-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 综述 | 第42-66页 |
| 综述参考文献 | 第55-66页 |
| 攻读学位期间的学术成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
