摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第14-30页 |
1 新疆地区虫媒病毒调查研究状况 | 第14-19页 |
1.1 新疆主要虫媒病毒 | 第14-18页 |
1.2 新疆虫媒病毒研究的发展与展望 | 第18-19页 |
2 黄病毒研究进展 | 第19-24页 |
2.1 基因组及复制周期 | 第19-20页 |
2.2 黄病毒的检测方法 | 第20-21页 |
2.3 黄病毒属主要诊断抗原的研究进展 | 第21-22页 |
2.4 黄病毒的流行情况 | 第22-24页 |
3 研究的目的及意义 | 第24页 |
参考文献 | 第24-30页 |
第二章 新疆地区啮齿动物(鼠)携带虫媒病毒的分子生物学初步检测及分离 | 第30-43页 |
前言 | 第30-31页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
1.1 材料 | 第31-32页 |
1.2 方法 | 第32-36页 |
1.2.1 采集时间与采集地点 | 第32页 |
1.2.2 采集方法 | 第32-33页 |
1.2.3 样品研磨 | 第33页 |
1.2.4 RNA的提取 | 第33页 |
1.2.5 cDNA的制备 | 第33页 |
1.2.6 引物设计与合成 | 第33-34页 |
1.2.7 PCR | 第34-35页 |
1.2.8 病毒的分离与检测 | 第35-36页 |
2 结果 | 第36-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第三章 新疆蜱中新病毒的发现、分离及蜱中分子流行病学调查 | 第43-54页 |
前言 | 第43-44页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
1.1 材料 | 第44-45页 |
1.2 方法 | 第45-48页 |
1.2.1 采集时间与采集地点 | 第45页 |
1.2.3 样本研磨 | 第45-46页 |
1.2.4 RNA的提取 | 第46页 |
1.2.5 cDNA的合成 | 第46页 |
1.2.6 454高通量测序检测样本的准备 | 第46-47页 |
1.2.7 PCR检测 | 第47页 |
1.2.8 组织细胞培养法分离病毒 | 第47页 |
1.2.9 电镜观察 | 第47-48页 |
2 结果 | 第48-52页 |
2.1 捕蜱数量及种类 | 第48页 |
2.2 454高通测序结果 | 第48-49页 |
2.3 蜱样本分毒结果 | 第49-50页 |
2.4 电镜观察实验 | 第50页 |
2.5 蜱样本中XJTV的流行病学调查 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
第四章 新疆蜱携带XJTV基因组序列信息分析与克隆 | 第54-65页 |
前言 | 第54-55页 |
1 材料及方法 | 第55-60页 |
1.1 材料 | 第55页 |
1.2 实验方法 | 第55-60页 |
1.2.1 454高通量测序序列分析与拼接 | 第55-56页 |
1.2.2 RNA-seq高通测序序列分析与拼接 | 第56-57页 |
1.2.3 XJTV序列的 5'与 3'两端序列信息的获取 | 第57-58页 |
1.2.4 XJTV每节段中的片段克隆到pGEM-Teasy | 第58-59页 |
1.2.5 XJTV每节段全长克隆至pGEM-Teasy载体中 | 第59-60页 |
1.2.6 序列的拼接及分析 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-63页 |
2.1 454高通量测序结果分析 | 第60-61页 |
2.2 RNA-seq高通量测序结果分析 | 第61-62页 |
2.3 XJTV全序列信息的克隆 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
第五章 XJTV序列的生物信息学分析 | 第65-75页 |
前言 | 第65-66页 |
1 方法 | 第66-67页 |
1.1 基因序列选取 | 第66页 |
1.2 二级结构预测 | 第66页 |
1.3 三级结构预测 | 第66-67页 |
1.4 系统发育进化分析 | 第67页 |
2 结果与分析 | 第67-72页 |
2.1 XJTV二级结构分析结果 | 第67-70页 |
2.1.1 糖基化位点分析 | 第67页 |
2.1.2 信号肽分析 | 第67-68页 |
2.1.3 跨膜区域 | 第68页 |
2.1.4 黄病毒科保守的模体分析 | 第68-70页 |
2.2 非结构蛋白三级结构预测 | 第70-71页 |
2.3 NS3与NS5的进化分析 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72页 |
参考文献 | 第72-75页 |
第六章 XJTV的CP蛋白基因原核与真核载体构建及抗体制备 | 第75-85页 |
前言 | 第75-76页 |
1 材料与方法 | 第76-79页 |
1.1 材料 | 第76-77页 |
1.2 方法 | 第77-79页 |
1.2.1 CP蛋白基因引物的设计、合成与PCR反应 | 第77页 |
1.2.2 重组表达载体的构建 | 第77页 |
1.2.3 CP蛋白的原核表达 | 第77-78页 |
1.2.4 真核质粒转染实验 | 第78页 |
1.2.5 重组CP蛋白的大量诱导及纯化 | 第78-79页 |
1.2.6 重组CP蛋白兔多克隆抗体的制备 | 第79页 |
1.2.7 Western Blotting分析 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-82页 |
2.1 CP蛋白基因原核与真核质粒构建结果 | 第79-80页 |
2.2 重组CP蛋白基因原核表达结果 | 第80-81页 |
2.3 重组CP基因在真核细胞中表达结果 | 第81-82页 |
2.4 Western Blotting检测抗重组CP蛋白的兔多克隆抗体 | 第82页 |
3 讨论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
结论与展望 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
个人简历 | 第87-88页 |