| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第12-33页 |
| 1.1 蛋白质的三维结构研究 | 第12页 |
| 1.2 蛋白质的核磁共振研究 | 第12-27页 |
| 1.2.1 核磁共振基本原理 | 第13-14页 |
| 1.2.2 核磁共振研究蛋白质结构的主要参数 | 第14-16页 |
| 1.2.3 顺磁技术在蛋白质结构解析以及动态学研究中的应用 | 第16-20页 |
| 1.2.4 蛋白质动力学性质研究 | 第20-23页 |
| 1.2.5 ~(19)F核磁共振方法在生物大分子研究中的应用 | 第23-27页 |
| 1.3 蛋白质稳定性 | 第27-29页 |
| 1.4 蛋白质的环境效应 | 第29-31页 |
| 1.5 反胶束模型 | 第31-33页 |
| 2 反胶束限域环境下钙调蛋白结构的NMR研究 | 第33-60页 |
| 2.1 引言 | 第33-34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.2.1 钙调蛋白以及MLCK多肽氨基酸序列 | 第34页 |
| 2.2.2 钙调蛋白样品的表达与纯化 | 第34-37页 |
| 2.2.3 化学试剂 | 第37页 |
| 2.2.4 反胶束体系以及样品制备 | 第37页 |
| 2.2.5 核磁共振实验以及数据分析 | 第37-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-59页 |
| 2.3.1 CTAB反胶束包裹对钙调蛋白~1H-~(15)N HSQC谱图的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.2 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白二级结构分析 | 第40-42页 |
| 2.3.3 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白后运动相关时间τ_c | 第42页 |
| 2.3.4 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白后尺寸分析 | 第42-44页 |
| 2.3.5 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白后结构变化 | 第44-48页 |
| 2.3.6 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白侧链指认以及NOE约束获得 | 第48-50页 |
| 2.3.7 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白氢键信息 | 第50-51页 |
| 2.3.8 CTAB反胶束包裹后钙调蛋白结构计算以及结构分析 | 第51-56页 |
| 2.3.9 CTAB反胶束包裹后复合物CaM-MLCK的结构变化 | 第56-59页 |
| 2.4 结论 | 第59-60页 |
| 3 反胶束限域环境下钙调蛋白动力学和功能的NMR研究 | 第60-79页 |
| 3.1 引言 | 第60-61页 |
| 3.2 材料与方法 | 第61-64页 |
| 3.2.1 化学试剂 | 第61页 |
| 3.2.2 蛋白质与多肽氨基酸序列 | 第61-62页 |
| 3.2.3 蛋白质的表达与纯化 | 第62-63页 |
| 3.2.4 多肽滴定钙调蛋白NMR实验 | 第63-64页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第64-77页 |
| 3.3.1 CTAB反胶束中CaM主链酰胺~(15)N的弛豫数据 | 第64-67页 |
| 3.3.2 肌球蛋白轻链激酶MLCK与钙调蛋白相互作用 | 第67-68页 |
| 3.3.3 α-突触蛋白的AcN19与钙调蛋白相互作用 | 第68-71页 |
| 3.3.4 生长抑素Somatostatin与钙调蛋白的相互作用 | 第71-76页 |
| 3.3.5 生长抑素Somatostatin与TR_2C的相互作用 | 第76-77页 |
| 3.3.6 钙调蛋白在反胶束中的功能分析 | 第77页 |
| 3.4 结论 | 第77-79页 |
| 4 蛋白质在复杂环境中折叠以及结合的热力学 | 第79-97页 |
| 4.1 引言 | 第79-81页 |
| 4.2 材料与方法 | 第81-84页 |
| 4.2.1 蛋白样品的制备 | 第81-83页 |
| 4.2.2 核磁共振实验 | 第83-84页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第84-96页 |
| 4.3.1 KH1蛋白突变体在稀溶液的~1H-~(15)N HSQC谱图和19F谱 | 第84-86页 |
| 4.3.2 尿素和氧化三甲胺对KH1 S193D突变体稳定性影响 | 第86-88页 |
| 4.3.3 拥挤环境对KH1 S193D突变体稳定性影响 | 第88-91页 |
| 4.3.4 限域环境对KH1稳定性影响 | 第91-96页 |
| 4.4 结论 | 第96-97页 |
| 5 总结与展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 附录 | 第112-137页 |
| 附表A. CaM在反胶束中的~1H、~(13)C和~(15)N化学位移指认结果 | 第112-126页 |
| 附表B. CaM在稀溶液和反胶束中观测到~1HN的PCSs | 第126-129页 |
| 附表C. CaM在稀溶液和反胶束中观测到~(15)N的PCSs | 第129-132页 |
| 附表D. CaM在稀溶液和反胶束中观测到~(15)N的RDCs | 第132-135页 |
| 附表E. CaM-MLCK在稀溶液和反胶束中观测的PCSs和RDCs | 第135-137页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第137-138页 |
