摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-15页 |
1.1 脊椎动物Mstn基因的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 TGF-β超家族的简介 | 第10页 |
1.1.2 Mstn的发现及其结构特征 | 第10-11页 |
1.1.3 Mstn功能与表达 | 第11页 |
1.1.4 Mstn基因的突变、多态性及其应用 | 第11-13页 |
1.2 无脊椎动物Mstn的研究进展 | 第13页 |
1.3 墨吉明对虾的研究进展 | 第13页 |
1.4 墨吉明对虾Mstn基因研究的目的及意义 | 第13-15页 |
2 FmMstn基因的克隆和生物信息学分析 | 第15-35页 |
2.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.1 实验动物 | 第15页 |
2.1.2 实验试剂 | 第15页 |
2.1.3 实验仪器 | 第15页 |
2.2 实验方法和步骤 | 第15-25页 |
2.2.1 墨吉明对虾基因组DNA提取 | 第15-16页 |
2.2.2 墨吉明对虾总RNA提取 | 第16-17页 |
2.2.3 反转录合成FmMstn cDNA模板 | 第17页 |
2.2.4 FmMstn编码区(ORF)序列片段的扩增 | 第17-19页 |
2.2.5 FmMstn基因 3’UTR序列的扩增 | 第19-20页 |
2.2.6 FmMstn基因 5’端序列的扩增 | 第20-23页 |
2.2.7 FmMstn内含子(intron)序列扩增 | 第23-24页 |
2.2.8 FmMstn启动子(promoter)序列扩增 | 第24-25页 |
2.2.9 序列比对分析 | 第25页 |
2.3 实验结果与分析 | 第25-33页 |
2.3.1 FmMstn基因的结构和序列分析 | 第25-31页 |
2.3.2 FmMstn氨基酸的序列比对和同源性分析 | 第31-32页 |
2.3.3 FmMstn的系统进化树分析 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
3 FmMstn基因的时空表达分析 | 第35-40页 |
3.1 材料与方法 | 第35-37页 |
3.1.1 试验试剂和仪器 | 第35页 |
3.1.2 实验对虾的选择和处理 | 第35页 |
3.1.3 样品总RNA的提取 | 第35页 |
3.1.4 表达引物设计和内参引物的选择 | 第35-36页 |
3.1.5 反转录第一链cDNA模板合成 | 第36页 |
3.1.6 荧光定量PCR扩增 | 第36-37页 |
3.1.7 荧光定量数据处理 | 第37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-39页 |
3.2.1 FmMstn在不同组织中的表达 | 第37页 |
3.2.2 FmMstn在不同蜕皮期对虾组织中的表达 | 第37页 |
3.2.3 FmMstn在不同生长速度的对虾中的表达情况 | 第37-39页 |
3.3 讨论 | 第39-40页 |
4 FmMstn基因多态性分析 | 第40-43页 |
4.1 实验对虾 | 第40页 |
4.2 实验试剂和器材 | 第40页 |
4.3 实验方法与步骤 | 第40页 |
4.4 结果与分析 | 第40-42页 |
4.5 讨论 | 第42-43页 |
5 FmMstn基因RNA干扰实验 | 第43-46页 |
5.1 实验材料 | 第43页 |
5.2 实验方法 | 第43-44页 |
5.2.1 T7接头引物设计和模板制备 | 第43页 |
5.2.2 dsFmMstn-RNA合成 | 第43-44页 |
5.2.3 dsFmMstn-RNA注射 | 第44页 |
5.3 结果与分析 | 第44页 |
5.4 讨论 | 第44-46页 |
6 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
导师简介 | 第57页 |