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墨吉明对虾肌肉生长抑制素基因(FmMstn)克隆及功能和多态性研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 文献综述第10-15页
    1.1 脊椎动物Mstn基因的研究进展第10-13页
        1.1.1 TGF-β超家族的简介第10页
        1.1.2 Mstn的发现及其结构特征第10-11页
        1.1.3 Mstn功能与表达第11页
        1.1.4 Mstn基因的突变、多态性及其应用第11-13页
    1.2 无脊椎动物Mstn的研究进展第13页
    1.3 墨吉明对虾的研究进展第13页
    1.4 墨吉明对虾Mstn基因研究的目的及意义第13-15页
2 FmMstn基因的克隆和生物信息学分析第15-35页
    2.1 实验材料第15页
        2.1.1 实验动物第15页
        2.1.2 实验试剂第15页
        2.1.3 实验仪器第15页
    2.2 实验方法和步骤第15-25页
        2.2.1 墨吉明对虾基因组DNA提取第15-16页
        2.2.2 墨吉明对虾总RNA提取第16-17页
        2.2.3 反转录合成FmMstn cDNA模板第17页
        2.2.4 FmMstn编码区(ORF)序列片段的扩增第17-19页
        2.2.5 FmMstn基因 3’UTR序列的扩增第19-20页
        2.2.6 FmMstn基因 5’端序列的扩增第20-23页
        2.2.7 FmMstn内含子(intron)序列扩增第23-24页
        2.2.8 FmMstn启动子(promoter)序列扩增第24-25页
        2.2.9 序列比对分析第25页
    2.3 实验结果与分析第25-33页
        2.3.1 FmMstn基因的结构和序列分析第25-31页
        2.3.2 FmMstn氨基酸的序列比对和同源性分析第31-32页
        2.3.3 FmMstn的系统进化树分析第32-33页
    2.4 讨论第33-35页
3 FmMstn基因的时空表达分析第35-40页
    3.1 材料与方法第35-37页
        3.1.1 试验试剂和仪器第35页
        3.1.2 实验对虾的选择和处理第35页
        3.1.3 样品总RNA的提取第35页
        3.1.4 表达引物设计和内参引物的选择第35-36页
        3.1.5 反转录第一链cDNA模板合成第36页
        3.1.6 荧光定量PCR扩增第36-37页
        3.1.7 荧光定量数据处理第37页
    3.2 结果与分析第37-39页
        3.2.1 FmMstn在不同组织中的表达第37页
        3.2.2 FmMstn在不同蜕皮期对虾组织中的表达第37页
        3.2.3 FmMstn在不同生长速度的对虾中的表达情况第37-39页
    3.3 讨论第39-40页
4 FmMstn基因多态性分析第40-43页
    4.1 实验对虾第40页
    4.2 实验试剂和器材第40页
    4.3 实验方法与步骤第40页
    4.4 结果与分析第40-42页
    4.5 讨论第42-43页
5 FmMstn基因RNA干扰实验第43-46页
    5.1 实验材料第43页
    5.2 实验方法第43-44页
        5.2.1 T7接头引物设计和模板制备第43页
        5.2.2 dsFmMstn-RNA合成第43-44页
        5.2.3 dsFmMstn-RNA注射第44页
    5.3 结果与分析第44页
    5.4 讨论第44-46页
6 结论第46-47页
参考文献第47-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
导师简介第57页

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