| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 课题背景 | 第11-12页 |
| 1.2 植物三萜类化合物合成途径及其关键酶研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 植物三萜类化合物的生物合成途径 | 第12-14页 |
| 1.2.2 鲨烯合成酶(SS)的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 鲨烯环氧酶(SE)的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3 高等植物中次生代谢的调控 | 第16-18页 |
| 1.3.1 环境的诱导的调控 | 第16-17页 |
| 1.3.2 代谢工程的调控 | 第17-18页 |
| 1.4 白桦三萜化合物的研究现状 | 第18-20页 |
| 2 白桦鲨烯合成酶SS和鲨烯环氧酶SE基因克隆及生物信息学分析 | 第20-49页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.1.2.1 白桦组培苗总RNA提取及DNA消化（Tris-CTAB法） | 第20页 |
| 2.1.2.2 RNA的电泳检测及鉴定 | 第20页 |
| 2.1.2.4 SPSS全长序列cDNA克隆 | 第20-25页 |
| 2.1.2.4.1 BpSS基因部分保守cDNA的克隆 | 第20-22页 |
| 2.1.2.4.2 5、RACE 获得 SpSS 基因 5'末端 | 第22-23页 |
| 2.1.2.4.3 3'RACE 获得 SpSS 基因的 3'端 | 第23-25页 |
| 2.1.2.4.4 SpSS基因oDNA全长的获得 | 第25页 |
| 2.1.2.5 BpSE全长cDNA的克隆 | 第25-27页 |
| 2.1.2.6 生物信息学分巧 | 第27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-47页 |
| 2.2.1 BpSS cDNA序列全长克隆及生物信息学分析 | 第27-36页 |
| 2.2.2 BpSE cDNA全长的克隆及生物信息学分析 | 第36-47页 |
| 2.3 讨论 | 第47-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 3 白桦植株中BpSS和BpSE基因对不同激素诱导的响应及时空表达特性 | 第49-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 3.1.2 植物激素诱导处理 | 第49页 |
| 3.1.3 菌种与载体 | 第49页 |
| 3.1.4 主要酶及化学试剂 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-53页 |
| 3.2.1 BpSS和BpSE基因的定量PCR | 第49-50页 |
| 3.2.2 BpSS基因的亚细胞定位 | 第50-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-55页 |
| 3.3.1 白桦BpSS和BpSE组织特异性表达 | 第53-54页 |
| 3.3.2 BpSS和BpSE基因表达对植物激素的响应 | 第54页 |
| 3.3.3 BpSS在洋葱表皮细胞内的分布 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 4 白桦BpSS和BpSE基因的启动子克隆与分析 | 第57-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 4.1.2 菌种与载体 | 第57页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-61页 |
| 4.2.1 白桦基因组DNA提取 | 第57页 |
| 4.2.2 白桦BpSS和BpSE基因的启动子克隆 | 第57-61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-66页 |
| 4.3.1 BpSS和BpSE基因启动子序列克隆 | 第61页 |
| 4.3.2 BpSS和BpSE基因启动子序列分析 | 第61-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-67页 |
| 4.4.1 BpSS、BpSE基因上游的启动子元件响应激素应答 | 第66-67页 |
| 4.4.2 可能参与BpSS、BpSE基因调控的转录因子 | 第67页 |
| 4.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 5 白桦BpSS、BpSE基因在酿酒酵母中的表达 | 第68-78页 |
| 5.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.1.1 菌株和载体 | 第68页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-73页 |
| 5.2.1 酵母表达载体的构建 | 第68-69页 |
| 5.2.2 重组质粒和pYES2质粒的酵母转化及鉴定 | 第69-70页 |
| 5.2.3 重组酵母INVScl-pYES2-BpSS鲨烯产量的检测 | 第70页 |
| 5.2.4 重组酵母INVScl-pYES2-BpSE鲨烯环氧酶活性的检测 | 第70-73页 |
| 5.3 结果与分析 | 第73-75页 |
| 5.3.1 酵母重组子INVSc1(pYES2-BpSS,pYES2-BpSE)的获得 | 第73页 |
| 5.3.2 重组酵母INVScl(pYES2-BpSS)鲨烯产量的检测 | 第73-74页 |
| 5.3.3 重组酵母INVScl(pYES2-BpSE)鲨烯环氧酶活性的检测 | 第74-75页 |
| 5.4 讨论 | 第75-77页 |
| 5.4.1 重组酵母INVScl(pYES2-BpSS)鲨烯产量的分析 | 第75-76页 |
| 5.4.2 重组酵母INVScl(pYES2-BpSE)鲨烯环氧酶活性的分析 | 第76-77页 |
| 5.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
