| 中文摘要 | 第12-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-22页 |
| 1.1 α-L-鼠李糖苷酶 | 第15-18页 |
| 1.1.1 α-L-鼠李糖苷酶简介 | 第15页 |
| 1.1.2 α-L-鼠李糖苷酶应用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 α-L-鼠李糖苷酶研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2 挖掘功能基因的策略 | 第18-19页 |
| 1.2.1 寻找新的微生物挖掘功能基因 | 第18页 |
| 1.2.2 基于宏基因组技术挖掘功能基因 | 第18-19页 |
| 1.2.3 利用生物数据库挖掘功能基因 | 第19页 |
| 1.3 人体肠道微生物 | 第19-20页 |
| 1.3.1 概述 | 第19-20页 |
| 1.3.2 人体肠道微生物功能 | 第20页 |
| 1.3.3 人体肠道微生物研究进展 | 第20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 α-L-鼠李糖苷酶家族分类及保守氨基酸基序的确定 | 第22-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-23页 |
| 2.1.1 生物软件及工具 | 第22页 |
| 2.1.2 CAZy数据库 | 第22页 |
| 2.1.3 α-L-鼠李糖苷酶一级序列特征及家族分类 | 第22-23页 |
| 2.1.4 α-L-鼠李糖苷酶保守氨基酸基序的确定 | 第23页 |
| 2.1.5 α-L-鼠李糖苷酶简并引物的设计 | 第23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-26页 |
| 2.2.1 α-L-鼠李糖苷酶的家族分类 | 第23页 |
| 2.2.2 α-L-鼠李糖苷酶保守氨基酸基序的确定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 α-L-鼠李糖苷酶简并引物的设计 | 第25-26页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 肠道宏基因组DNA提取及 α-L-鼠李糖苷酶基因的探测 | 第27-34页 |
| 3.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 实验试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.3 样品宏基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 3.1.4 酶基因保守片段的探测 | 第28-29页 |
| 3.1.5 酶基因保守片段的克隆 | 第29页 |
| 3.1.6 酶基因保守片段的测序及分析 | 第29-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-32页 |
| 3.2.1 样品宏基因组DNA的提取 | 第30页 |
| 3.2.2 酶基因保守片段的探测 | 第30页 |
| 3.2.3 酶基因保守片段的阳性克隆鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.4 酶基因保守片段的序列分析 | 第31-32页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 α-L-鼠李糖苷酶基因克隆、异源表达及纯化 | 第34-46页 |
| 4.1 材料与方法 | 第34-39页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第34-35页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第35页 |
| 4.1.3 高一致性序列全长基因的获取 | 第35-36页 |
| 4.1.4 低一致性序列全长基因的获取 | 第36页 |
| 4.1.5 α-L-鼠李糖苷酶基因的克隆 | 第36-37页 |
| 4.1.6 α-L-鼠李糖苷酶的异源表达 | 第37页 |
| 4.1.7 粗酶液的活性检测 | 第37-38页 |
| 4.1.8 目的蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| 4.1.9 酶比活的测定 | 第39页 |
| 4.2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 4.2.1 高一致性序列全长基因的扩增 | 第39-40页 |
| 4.2.2 低一致性序列全长基因的获取 | 第40页 |
| 4.2.3 全长基因的阳性克隆鉴定 | 第40-41页 |
| 4.2.4 全长酶基因的序列分析 | 第41-42页 |
| 4.2.5 目的蛋白的异源表达 | 第42-43页 |
| 4.2.6 粗酶液的活性检测 | 第43页 |
| 4.2.7 RhaC蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| 4.2.8 RhaC酶比活的测定 | 第44-45页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 总结与展望 | 第46-48页 |
| 5.1 总结 | 第46页 |
| 5.2 展望 | 第46-48页 |
| 创新点 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 个人简历及联系方式 | 第56-57页 |
