中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 绪论 | 第13-18页 |
1. 研究背景 | 第13-15页 |
1.1 肝星状细胞的活化是肝纤维化病程中的重要环节 | 第13-14页 |
1.2 抗肝纤维化的候选药物 | 第14-15页 |
2. 科学问题的提出 | 第15页 |
3. 研究内容 | 第15-16页 |
3.1 体内研究评价DHA对肝损伤和肝纤维化的作用 | 第15-16页 |
3.2 体外研究评价DHA对HSC增殖活化、凋亡的影响 | 第16页 |
4. 研究意义 | 第16-18页 |
第二章 DHA对BDL诱导的肝纤维化的体内研究 | 第18-34页 |
1. 前言 | 第18-19页 |
2. 实验材料 | 第19-20页 |
2.1 实验动物 | 第19页 |
2.2 实验试剂与药物 | 第19-20页 |
2.3 实验器材 | 第20页 |
3. 实验方法 | 第20-25页 |
3.1 实验用药物DHA、秋水仙碱的配制 | 第20页 |
3.2 大鼠BDL肝纤维化模型的建立与给药治疗 | 第20-21页 |
3.3 肝组织病理切片 | 第21页 |
3.4 免疫荧光染色 | 第21页 |
3.5 Western blotting | 第21-24页 |
3.6 ELISA检测 | 第24页 |
3.7 肝组织中Hyp含量的测定 | 第24-25页 |
3.8 数据分析 | 第25页 |
4. 实验结果 | 第25-32页 |
4.1 DHA减轻由BDL引起的肝组织损伤和炎症 | 第25-27页 |
4.2 DHA减轻由BDL引起的肝组织胶原蛋白沉积 | 第27-29页 |
4.3 DHA抑制由BDL诱导的HSC活化 | 第29-31页 |
4.4 DHA体内诱导HSC凋亡 | 第31-32页 |
5. 讨论 | 第32-34页 |
第三章 DHA对HSC增殖活化、凋亡的体外研究 | 第34-59页 |
1. 前言 | 第34-36页 |
2. 实验材料 | 第36-37页 |
2.1 实验用细胞及药物 | 第36页 |
2.2 实验试剂与抗体 | 第36页 |
2.3 实验仪器 | 第36-37页 |
3. 实验方法 | 第37-41页 |
3.1 细胞培养 | 第37页 |
3.2 药物配制 | 第37页 |
3.3 MTT检测DHA对肝细胞LO2活力影响 | 第37页 |
3.4 LDH检测DHA对肝细胞LO2细胞毒性影响 | 第37-38页 |
3.5 ALT、AST活性检测DHA对肝细胞LO2细胞损伤影响 | 第38页 |
3.6 MTT检测DHA对肝星状细胞HSC活力影响 | 第38-39页 |
3.7 LDH检测DHA对肝星状细胞HSC细胞毒性影响 | 第39页 |
3.8 流式细胞仪检测DHA对肝星状细胞HSC细胞周期的影响 | 第39-40页 |
3.9 Western blotting,检测DHA对HSC的周期蛋白的影响 | 第40页 |
3.10 Hoechst33258染色检测DHA对HSC凋亡的影响 | 第40页 |
3.11 JC-1检测观察DHA对HSC线粒体凋亡的影响 | 第40-41页 |
3.12 细胞免疫荧光观察DHA对HSC活化蛋白的影响 | 第41页 |
3.13 Western blot检测与DHA对HSC凋亡相关蛋白的影响 | 第41页 |
3.14 数据分析 | 第41页 |
4. 实验结果 | 第41-57页 |
4.1 DHA体外对正常肝细胞的细胞毒作用 | 第41-43页 |
4.2 DHA体外抑制HSC的增殖 | 第43-45页 |
4.3 DHA体外阻滞HSC细胞周期于S期 | 第45-47页 |
4.4 DHA体外诱导HSC细胞线粒体凋亡 | 第47-52页 |
4.5 DHA通过抑制PI3K/Akt信号转导诱导HSC的凋亡 | 第52-54页 |
4.6 DHA抑制纤维化标志物的表达 | 第54-57页 |
5. 讨论 | 第57-59页 |
全文小结 | 第59-60页 |
文献综述 | 第60-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录 | 第73-75页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第75-77页 |
致谢 | 第77页 |