| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 虫媒病 | 第13-14页 |
| 1.2 虫媒病检测技术 | 第14-16页 |
| 1.2.1 血清学方法 | 第14页 |
| 1.2.2 传统的分离培养鉴定技术 | 第14-15页 |
| 1.2.3 分子生物学检测技术 | 第15-16页 |
| 1.3 环介导等温扩增（Loop-mediated isothernal amplification, LAMP） | 第16-19页 |
| 1.3.1 LAMP引物设计 | 第16页 |
| 1.3.2 LAMP扩增反应步骤 | 第16-17页 |
| 1.3.3 LAMP扩增反应结果的检测方法 | 第17-18页 |
| 1.3.4 LAMP的应用 | 第18页 |
| 1.3.5 LAMP前景 | 第18-19页 |
| 1.4 PCR-反向现状印迹杂交技术 | 第19-20页 |
| 1.5 ZnO纳米材料 | 第20-27页 |
| 1.5.1 纳米材料的特性 | 第20-21页 |
| 1.5.2 氧化锌纳米材料的制备方法 | 第21-24页 |
| 1.5.3 ZnO纳米材料在生物医学领域的应用 | 第24-27页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 乙脑病毒环介导等温扩增检测方法的建立 | 第29-42页 |
| 2.1 引言 | 第29-30页 |
| 2.2 材料及仪器设备 | 第30页 |
| 2.2.1 材料 | 第30页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第30页 |
| 2.3 实验部分 | 第30-36页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第30-32页 |
| 2.3.2 JEV病毒培养 | 第32-34页 |
| 2.3.3 RT-PCR鉴定cDNA | 第34页 |
| 2.3.4 RT-LAMP检测方法的建立及条件优化 | 第34-36页 |
| 2.4 结果 | 第36-41页 |
| 2.4.1 RT-PCR扩增cDNA的结果 | 第36-37页 |
| 2.4.2 RT-LAMP引物验证实验结果 | 第37-38页 |
| 2.4.3 RT-LAMP反应最佳引物浓度 | 第38页 |
| 2.4.4 RT-LAMP反应温度的优化 | 第38-39页 |
| 2.4.5 RT-LAMP反应时间的优化 | 第39页 |
| 2.4.6 RT-LAMP检测方法的敏感性评价结果 | 第39-40页 |
| 2.4.7 RT-LAMP检测方法的特异性评价结果 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 纳米氧化锌的制备及其对RT-LAMP方法检测JEV的影响 | 第42-53页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料及仪器设备 | 第42-43页 |
| 3.2.1 材料 | 第42-43页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第43页 |
| 3.3 实验部分 | 第43-46页 |
| 3.3.1 ZnO纳米材料的制备与表征 | 第43-44页 |
| 3.3.2 JEV病毒培养 | 第44-45页 |
| 3.3.3 不同形貌ZnO纳米材料对RT-LAMP反应的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 不同浓度的花状ZnO纳米材料对RT-LAMP反应的影响 | 第46页 |
| 3.3.5 花状ZnO纳米材料对RT-LAMP反应温度的影响 | 第46页 |
| 3.3.6 花状ZnO纳米材料对RT-LAMP反应时间的影响 | 第46页 |
| 3.4 结果 | 第46-51页 |
| 3.4.1 ZnO纳米材料的晶体结构和形貌分析 | 第46-49页 |
| 3.4.2 不同形貌的ZnO纳米材料对RT-LAMP的影响 | 第49页 |
| 3.4.3 不同浓度的花状纳米ZnO对RT-LAMP检测方法的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.4 花状纳米ZnO对RT-LAMP反应温度的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.5 花状纳米ZnO对RT-LAMP反应时间的影响 | 第51页 |
| 3.5 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 同时检测蝇媒携带的7种细菌性病原微生物的反向线状印迹杂交检测技术的建立 | 第53-67页 |
| 4.1 引言 | 第53-54页 |
| 4.2 材料和仪器设备 | 第54页 |
| 4.2.1 材料 | 第54页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第54页 |
| 4.3 实验部分 | 第54-60页 |
| 4.3.1 标准菌株 | 第54-55页 |
| 4.3.2 标准菌株的复苏培养 | 第55页 |
| 4.3.3 标准菌株的鉴定 | 第55-56页 |
| 4.3.4 标准菌株DNA提取 | 第56页 |
| 4.3.5 引物和探针的设计与合成 | 第56页 |
| 4.3.6 PCR扩增标准菌株 | 第56-58页 |
| 4.3.7 反向线状印迹杂交（RLB）方法的建立及其条件优化 | 第58-60页 |
| 4.4 结果 | 第60-65页 |
| 4.4.1 标准菌株的鉴定结果 | 第60-61页 |
| 4.4.2 目的序列片段的PCR扩增 | 第61页 |
| 4.4.3 最佳特异性探针的确定 | 第61-62页 |
| 4.4.4 探针最佳终浓度的确定 | 第62-63页 |
| 4.4.5 标准菌株PCR产物与特异性探针杂交结果 | 第63-64页 |
| 4.4.6 PCR-RLB敏感性实验 | 第64-65页 |
| 4.5 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 利用PCR-RLB检测技术调查兰州市不同环境家蝇携带病原情况 | 第67-79页 |
| 5.1 引言 | 第67页 |
| 5.2 材料及仪器设备 | 第67-68页 |
| 5.2.1 材料 | 第67-68页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第68页 |
| 5.3 实验部分 | 第68-71页 |
| 5.3.1 样品采集与处理 | 第68页 |
| 5.3.2 样品体表细菌基因组DNA提取 | 第68-69页 |
| 5.3.3 PCR扩增 | 第69页 |
| 5.3.4 PCR-RLB溶解配制 | 第69页 |
| 5.3.5 利用PCR-反向线状杂交技术检测甘肃省兰州市不同区域苍蝇携菌情况 | 第69-71页 |
| 5.4 结果 | 第71-77页 |
| 5.4.1 PCR扩增结果 | 第71页 |
| 5.4.2 利用PCR-RLB方法检测不同环境家蝇携菌情况 | 第71-77页 |
| 5.5 讨论 | 第77-79页 |
| 第六章 全文结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-97页 |
| 附录 | 第97-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 作者简历 | 第105页 |
