| 中文摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1 禽类卵泡发育研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1 禽卵泡发育的特点 | 第15-16页 |
| 1.2 家禽卵泡发育的阶段划分 | 第16-17页 |
| 1.3 家禽卵泡等级发育的特点 | 第17-18页 |
| 1.4 家禽闭锁卵泡的形态特征 | 第18-19页 |
| 2 颗粒细胞在生殖调控中的作用 | 第19-23页 |
| 2.1 卵母细胞通过卵泡细胞转运物质和能量 | 第19-20页 |
| 2.2 颗粒细胞在卵泡发育中的调控作用 | 第20-21页 |
| 2.3 基于颗粒细胞凋亡的卵泡闭锁激素调控 | 第21-23页 |
| 2.4 卵泡细胞对颗粒细胞增殖的调控作用 | 第23页 |
| 3 表皮生长因子在生殖调控中作用 | 第23-25页 |
| 3.1 表皮生长因子的作用机制 | 第23-24页 |
| 3.2 表皮生长因子在卵泡发育中的作用 | 第24-25页 |
| 4 表皮生长因子对Smads信号通路调节 | 第25-26页 |
| 4.1 EGF信号通路对Smads基因的调节 | 第25页 |
| 4.2 Smads信号通路对颗粒细胞的影响 | 第25-26页 |
| 5 miRNA参与颗粒细胞增殖 | 第26-29页 |
| 5.1 miRNA的生物合成及作用机制 | 第26-27页 |
| 5.2 miRNA调控细胞增殖 | 第27-28页 |
| 5.3 miRNA调控性激素合成与分泌 | 第28-29页 |
| 6 本研究的目的和内容 | 第29-31页 |
| 6.1 研究目的和意义 | 第29页 |
| 6.2 研究目标和内容 | 第29-31页 |
| 第二章 鹅卵泡发育的形态与组织学研究 | 第31-48页 |
| 1 引言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-36页 |
| 2.1 实验动物 | 第31页 |
| 2.2 主要器材 | 第31页 |
| 2.3 主要试剂及配制 | 第31-32页 |
| 2.4 样品采集 | 第32页 |
| 2.5 卵泡类型数量及直径大小 | 第32页 |
| 2.6 石蜡切片制作和形态学观察 | 第32-33页 |
| 2.7 电镜样品制备 | 第33-34页 |
| 2.8 卵泡内激素及因子含量测定 | 第34页 |
| 2.9 RNA提取与cDNA的合成 | 第34-36页 |
| 2.10 数据统计分析 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-45页 |
| 3.1 鹅卵泡形态学观察 | 第36-38页 |
| 3.2 鹅闭锁卵泡的形态学观察 | 第38-39页 |
| 3.3 产蛋鹅各级卵泡组织学观察 | 第39-42页 |
| 3.4 产蛋鹅各级卵泡内激素的测定 | 第42-44页 |
| 3.5 产蛋鹅各级卵泡EGF和EGFR基因表达的变化 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 EGF对鹅卵泡发育及卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第48-63页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-53页 |
| 2.1 实验动物 | 第48页 |
| 2.2 实验器材 | 第48页 |
| 2.3 实验试剂 | 第48-49页 |
| 2.4 样品采集 | 第49页 |
| 2.5 RNA提取与cDNA的合成 | 第49-51页 |
| 2.6 鹅等级前卵泡培养和药物处理 | 第51页 |
| 2.7 石蜡切片制作和形态学观察 | 第51页 |
| 2.8 卵泡形态学观察 | 第51页 |
| 2.9 鹅等级前卵泡颗粒细胞的分离 | 第51-52页 |
| 2.10 细胞培养及传代 | 第52页 |
| 2.11 颗粒细胞生长曲线的测定 | 第52-53页 |
| 2.12 数据统计分析 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-61页 |
| 3.1 鹅等级前卵泡颗粒细胞分离与培养 | 第53-54页 |
| 3.2 EGF对体外培养鹅等级前卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第54-56页 |
| 3.3 EGF处理后鹅等级前卵泡颗粒细胞层和膜层形态的变化 | 第56-59页 |
| 3.4 EGF处理鹅等级前卵泡颗粒细胞增殖相关基因表达的变化 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 EGF对参与卵泡颗粒细胞关键基因Smad4表达影响 | 第63-76页 |
| 1 引言 | 第63页 |
| 2 材料与方法 | 第63-65页 |
| 2.1 实验动物 | 第63页 |
| 2.2 主要试剂 | 第63页 |
| 2.3 总RNA提取及cDNA合成 | 第63页 |
| 2.4 基因全长获取 | 第63-64页 |
| 2.5 生物信息学分析 | 第64页 |
| 2.6 细胞培养 | 第64-65页 |
| 2.7 荧光定量PCR分析 | 第65页 |
| 2.8 数据处理与分析 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-74页 |
| 3.1 鹅Smad4基因的克隆与序列分析 | 第65-69页 |
| 3.2 Smad4基因的鹅组织表达特征分析 | 第69-71页 |
| 3.3 EGF介导的Smad4基因对鹅卵泡颗粒细胞表达变化 | 第71-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 第五章 EGF对鹅卵泡颗粒细胞增殖相关miRNA表达的影响 | 第76-91页 |
| 1 引言 | 第76页 |
| 2 材料与方法 | 第76-80页 |
| 2.1 实验材料 | 第76页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第76-77页 |
| 2.3 主要试剂 | 第77页 |
| 2.4 卵巢组织总RNA制备提取 | 第77页 |
| 2.5 RNA质量检测 | 第77-78页 |
| 2.6 小RNA测序技术路线 | 第78页 |
| 2.7 小RNA测序数据分析流程 | 第78-79页 |
| 2.8 鹅等级前颗粒细胞的分离 | 第79页 |
| 2.9 细胞培养及传代 | 第79-80页 |
| 2.10 miRNA定量分析 | 第80页 |
| 2.11 数据统计分析 | 第80页 |
| 3 结果 | 第80-88页 |
| 3.1 RNA质量检测 | 第80-81页 |
| 3.2 原始测序数据产出量 | 第81页 |
| 3.3 Small RNAs测序分析及分类 | 第81-83页 |
| 3.4 鹅已知保守miRNA的鉴定 | 第83-84页 |
| 3.5 miRNA的GO富集和KEGG途径分析 | 第84-85页 |
| 3.6 EGF对参与颗粒细胞增殖的miRNAs表达的影响 | 第85-87页 |
| 3.7 差异miRNA靶基因预测 | 第87-88页 |
| 4 讨论 | 第88-91页 |
| 全文结论 | 第91-92页 |
| 主要创新点 | 第92页 |
| 下一步研究设想 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 附录 | 第107-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第118-119页 |
