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水蛭酶解提取物和淫羊藿苷抑制动脉粥样硬化进展的药理学机制研究

中文摘要第10-16页
ABSTRACT第16-22页
符号说明第23-24页
第一章 前言第24-35页
    1.1 内皮功能紊乱假说第25-30页
        1.1.1 血管内皮细胞第27-28页
        1.1.2 单核细胞和巨噬细胞第28-29页
        1.1.3 丝裂原激活的蛋白激酶第29页
        1.1.4 NFκB第29-30页
    1.2 中药水蛭的研究概况第30-32页
        1.2.1 中药水蛭的药理研究第30-31页
        1.2.2 中药水蛭在心脑血管疾病中的应用及研究第31-32页
    1.3 淫羊藿苷的研究概况第32-35页
        1.3.1 淫羊藿苷的药理研究第33页
        1.3.2 淫羊藿苷在动脉粥样硬化中的应用及研究第33-35页
第二章 水蛭酶解提取物和淫羊藿苷抑制ApoE敲除小鼠动脉粥样硬化进展第35-52页
    2.1 实验材料第35-37页
        2.1.1 实验仪器第35页
        2.1.2 实验动物第35页
        2.1.3 实验耗材第35页
        2.1.4 实验试剂第35-36页
        2.1.5 试剂配制第36-37页
    2.2 实验方法第37-41页
        2.2.1 实验动物分组第37页
        2.2.2 超声生物显微镜(UBM)第37-38页
        2.2.3 实验动物解剖及心脏、主动脉取材第38-39页
        2.2.4 组织冰冻切片第39-40页
        2.2.5 油红O染色第40页
        2.2.6 HE染色第40-41页
        2.2.7 免疫组化染色第41页
        2.2.8 数据处理及统计学第41页
    2.3 实验结果第41-48页
        2.3.1 超声生物显微镜(UBM)观察主动脉弓处动脉粥样硬化斑块第41-44页
        2.3.2 主动脉根部动脉粥样硬化斑块油红O染色第44-46页
        2.3.3 主动脉弓动脉粥样硬化斑块MOMA-2染色第46-48页
        2.3.4 小鼠血清中细胞因子检测第48页
    2.4 讨论第48-50页
    2.5 本章小结第50-52页
第三章 水蛭酶解提取物抑制内皮细胞功能紊乱第52-71页
    3.1 实验材料第52-56页
        3.1.1 实验仪器第52-53页
        3.1.2 实验耗材第53页
        3.1.3 实验试剂第53-54页
        3.1.4 引物序列第54页
        3.1.5 试剂配制第54-56页
    3.2 实验方法第56-64页
        3.2.1 细胞培养第56页
        3.2.2 内皮功能紊乱细胞模型第56页
        3.2.3 总RNA提取第56-57页
        3.2.4 逆转录(RTPCR)第57-58页
        3.2.5 PCR扩增第58-59页
        3.2.6 琼脂糖凝胶电泳第59页
        3.2.7 MTT实验(药物细胞毒性检测)第59页
        3.2.8 细胞总蛋白质提取第59-60页
        3.2.9 BCA法蛋白质定量第60页
        3.2.10 蛋白质免疫印迹(western blot)第60-62页
        3.2.11 NO含量测定第62-63页
        3.2.12 粘附能力实验第63页
        3.2.13 迁移能力实验第63-64页
        3.2.14 数据处理及统计学第64页
    3.3 实验结果第64-68页
        3.3.1 TNF-α诱导的EA.hy926内皮细胞功能紊乱模型及药物作用剂量筛选第64-65页
        3.3.2 粘附能力实验第65-66页
        3.3.3 迁移能力实验第66-67页
        3.3.4 粘附和迁移相关蛋白检测第67-68页
    3.4 讨论第68-69页
    3.5 本章小结第69-71页
第四章 水蛭酶解提取物抑制动脉粥样硬化进展的机制研究第71-79页
    4.1 实验材料第71-73页
        4.1.1 实验仪器第71页
        4.1.2 实验耗材第71-72页
        4.1.3 实验试剂第72-73页
    4.2 实验方法第73-74页
        4.2.1 NF-κB激活-核转移检测第73-74页
        4.2.2 westen blot蛋白质免疫印迹第74页
    4.3 实验结果第74-76页
        4.3.1 荧光染色检测NF-κB激活和p65亚基的核转移第74页
        4.3.2 Western blot检测NF-κB p65亚基的核转移情况第74-75页
        4.3.3 LEE对MAPK信号通路上相关蛋白p38、ERK、JNK的磷酸化的影响第75-76页
    4.4 讨论第76-78页
    4.5 本章小结第78-79页
第五章 淫羊藿苷抑制动脉粥样硬化进展机制的研究第79-88页
    5.1 实验材料第79-80页
        5.1.1 实验仪器第79页
        5.1.2 实验试剂第79-80页
        5.1.3 实验耗材第80页
    5.2 实验方法第80-82页
        5.2.1 总RNA提取第80页
        5.2.2 逆转录及PCR扩增第80页
        5.2.3 实时定量PCR第80-81页
        5.2.4 基因芯片表达谱分析第81页
        5.2.5 迁移实验第81-82页
    5.3 实验结果第82-86页
        5.3.1 小鼠主动脉管壁中CX3CR1和CX3CL1表达水平检测第82-84页
        5.3.2 基因芯片表达谱分析第84页
        5.3.3 巨噬细胞CX3CR1转录水平及表达水平检测第84-85页
        5.3.4 迁移实验第85-86页
    5.4 讨论第86-87页
    5.5 本章小结第87-88页
第六章 总结第88-91页
参考文献第91-97页
致谢第97-98页
攻读学位期间发表的学术论文目录第98-99页
学位论文评阅及答辩情况表第99-100页
附件第100-112页

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