| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 超表达法及RNA 干扰法的应用 | 第13-14页 |
| ·超表达法 | 第13页 |
| ·RNA 干扰 | 第13-14页 |
| 2 植物抗病反应 | 第14-20页 |
| ·植物的抗病性 | 第14-15页 |
| ·植物抗病性相关的基因 | 第15-17页 |
| ·植物抗病性的分子机制 | 第17-19页 |
| ·植物抗病反应中的信号传导 | 第19-20页 |
| 3 植物抗性基因 RAR1 与SGT1 研究概述 | 第20-22页 |
| 4 植物抗病基因工程策略 | 第22-23页 |
| 5 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 NbRAR1 表达载体构建及农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第25-49页 |
| 1 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·酶、生化试剂及试剂盒 | 第25页 |
| ·烟草叶盘法转化再生培养培养基 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·NbRAR1 克隆载体的构建 | 第26-30页 |
| ·NbRAR1 的生物信息学分析 | 第30页 |
| ·NbRAR1 植物超表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·NbRAR1 干扰载体的构建 | 第32-33页 |
| ·NbRAR1 表达载体转化农杆菌 | 第33-34页 |
| ·NbRAR1 表达载体的烟草遗传转化 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草植株的PCR 检测 | 第35页 |
| ·转基因烟草植株的GUS 组织化学染色 | 第35页 |
| ·转基因烟草植株的RT-PCR 分析 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·NbRAR1 克隆载体的构建 | 第36页 |
| ·NbRAR1 基因的PCR 扩增 | 第36页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·克隆载体测序结果 | 第36页 |
| ·NbRAR1 的生物信息学分析 | 第36-40页 |
| ·NbRAR1 的核苷酸序列分析 | 第36-38页 |
| ·NbRAR1 编码的氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| ·NbRAR1 的蛋白质结构分析 | 第39-40页 |
| ·NbRAR1 植物超表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·NbRAR1 基因的PCR 扩增 | 第40页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第40页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第40-42页 |
| ·NbRAR1 干扰载体的构建 | 第42-44页 |
| ·NbRAR1 正向干扰片段的PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第43页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第43页 |
| ·NbRAR1 基因反向干扰片段的PCR 扩增 | 第43-44页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第44页 |
| ·NbRAR1 表达载体的烟草遗传转化 | 第44-45页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 检测 | 第45页 |
| ·转基因烟草植株的 GUS 组织化学染色分析 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草植株的 RT-PCR 分析 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| ·RAR1 基因 | 第46-47页 |
| ·表达载体的选择 | 第47页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第47-49页 |
| 第三章 NbSGT1 表达载体的构建及农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第49-65页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·菌株与质粒 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·酶、生化试剂及试剂盒 | 第49页 |
| ·烟草叶盘法转化再生培养培养基 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·NbSGT1 克隆载体的构建 | 第49-50页 |
| ·NbSGT1 的生物信息学分析 | 第50页 |
| ·NbSGT1 植物超表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·NbSGT1 干扰载体的构建 | 第51页 |
| ·NbSGT1 表达载体转化农杆菌 | 第51页 |
| ·NbSGT1 表达载体的烟草遗传转化 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草植株的PCR 检测 | 第52页 |
| ·转基因烟草植株的GUS 组织化学染色分析 | 第52页 |
| ·转基因烟草植株的RT-PCR 分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-63页 |
| ·NbSGT1 克隆载体的构建 | 第52-53页 |
| ·NbSGT1 基因的PCR 扩增 | 第52页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第52-53页 |
| ·克隆载体测序结果 | 第53页 |
| ·NbSGT1 的生物信息学分析 | 第53-57页 |
| ·NbSGT1 的核苷酸序列分析 | 第53-55页 |
| ·NbSGT1 的氨基酸序列分析 | 第55-57页 |
| ·NbSGT1 的蛋白质结构分析 | 第57页 |
| ·NbSGT1 植物超表达载体的构建 | 第57-59页 |
| ·NbSGT1 的PCR 扩增 | 第57-58页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第58页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·NbSGT1 干扰载体的构建 | 第59-61页 |
| ·NbSGT1 基因正向干扰片段的PCR 扩增 | 第59页 |
| ·重组子 PCR 鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第60页 |
| ·NbSGT1 基因反向干扰片段的PCR 扩增 | 第60页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第60-61页 |
| ·NbSGT1 表达载体的烟草遗传转化 | 第61页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 检测 | 第61-62页 |
| ·转基因烟草植株的 GUS 组织化学染色分析 | 第62-63页 |
| ·转基因烟草植株的 RT-PCR 分析 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| ·SGT1 基因 | 第63页 |
| ·转基因植株检测方法的选择 | 第63-65页 |
| 总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 附录 1 缩略词 | 第75-76页 |
| 附录2 实验所用试剂部分配方 | 第76-79页 |
| 附录3 在Genebank 登录的序列 | 第79-84页 |
| 附录4 部分转基因苗图片 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |