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绵羊肺腺瘤病毒斑点杂交检测方法的建立与初步应用

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略语表第9-10页
1 引言第10-22页
    1.1 绵羊肺腺瘤病第10-11页
        1.1.1 概述第10页
        1.1.2 发现第10页
        1.1.3 流行病学第10-11页
    1.2 绵羊肺腺瘤病的病原第11-14页
        1.2.1 绵羊肺腺瘤病的病原第11-12页
        1.2.2 JSRV基因组结构及生命周期第12-14页
    1.3 绵羊肺腺瘤病毒JSRV的分子生物学第14-16页
        1.3.1 内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)第14-15页
        1.3.2 enJSRV和exJSRV的关系第15-16页
    1.4 绵羊肺腺瘤病的临床病理学第16-17页
    1.5 绵羊肺腺瘤病的病理组织学观察第17-18页
    1.6 绵羊肺腺瘤与人类肺癌的关系第18-19页
    1.7 绵羊肺腺瘤病毒的检测方法第19-21页
        1.7.1 PCR法第19-20页
        1.7.2 双抗体夹心ELISA法第20页
        1.7.3 环介导等温扩增技术第20-21页
    1.8 斑点杂交检测技术的原理第21页
    1.9 研究的目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-29页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 试验动物与样品采集第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要仪器和设备第22页
        2.1.4 杂交所需溶液配制第22-23页
    2.2 方法第23-29页
        2.2.1 病料处理第23-24页
        2.2.2 总DNA的提取第24页
        2.2.3 引物设计和RT-PCR扩增第24-25页
        2.2.4 DIG标记DNA探针的制备第25-26页
        2.2.5 标记DNA探针灵敏度检测第26页
        2.2.6 斑点杂交检测方法的建立第26-27页
        2.2.7 杂交条件的优化第27-28页
        2.2.8 特异性试验第28页
        2.2.9 敏感性试验第28页
        2.2.10 重复性试验第28页
        2.2.11 现地样品检测及其与巢式RT-PCR吻合度检测第28-29页
3 结果第29-37页
    3.1 外周血血样和病肺DNA提取结果第29-30页
    3.2 env基因和U3区的PCR扩增结果第30页
    3.3 测序结果及序列同源性分析第30-31页
    3.4 探针灵敏性检测结果第31页
    3.5 斑点杂交结果判定第31-32页
        3.5.1 结果分析条件设定第31-32页
        3.5.2 阴性第32页
        3.5.3 阳性第32页
    3.6 斑点杂交最佳反应条件的确定第32页
    3.7 特异性试验第32页
    3.8 敏感性试验第32-33页
    3.9 重复性试验第33页
    3.10 现地样品检测及其与RT-PCR吻合度检测结果第33-37页
        3.10.1 斑点杂交检测外周血血样结果第34-36页
        3.10.2 斑点杂交检测OPA病肺结果第36-37页
4 讨论第37-40页
5 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-50页
作者简介第50页

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