摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一部分 综述部分 | 第13-43页 |
第一章 转基因生物反应器的研究进展 | 第13-20页 |
1 转基因动物制备的方法与技术 | 第13-15页 |
2 不同生物反应器 | 第15-16页 |
3 转基因动物生物反应器不同表达系统 | 第16-18页 |
3.1 血液 | 第17页 |
3.2 膀胱 | 第17页 |
3.3 精液 | 第17-18页 |
3.4 卵 | 第18页 |
3.5 乳腺 | 第18页 |
4 问题与展望 | 第18-20页 |
第二章 CRISPR/CAS介导的基因编辑技术 | 第20-29页 |
1 CRISPR/CAS9系统的发现 | 第21-22页 |
2 CRISPR/CAS系统的分类 | 第22-25页 |
2.1 CRISPR-cas9系统 | 第23-25页 |
3 CRISPR-CAS9技术的应用 | 第25-28页 |
3.1 基因编辑 | 第25-26页 |
3.2 在基因治疗中的应用 | 第26-27页 |
3.3 在转基因动物的应用 | 第27-28页 |
4 问题与展望 | 第28-29页 |
第三章 胰岛素的介绍及应用 | 第29-33页 |
1 胰岛素的发展 | 第29页 |
2 胰岛素及受体的功能与结构 | 第29-31页 |
2.1 胰岛素的功能 | 第29页 |
2.2 胰岛素的结构 | 第29-30页 |
2.3 胰岛素受体的作用 | 第30页 |
2.4 胰岛素受体的结构特点 | 第30-31页 |
3 胰岛素应用与展望 | 第31-33页 |
3.1.1 型糖尿病治疗 | 第31-32页 |
3.1.2 型糖尿病治疗 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-43页 |
第二部分 实验研究部分 | 第43-76页 |
第一章 同源重组载体和CRISPR/CAS载体的构建 | 第43-57页 |
引言 | 第43-44页 |
材料与方法 | 第44-49页 |
1 实验材料 | 第44-45页 |
2 实验方法 | 第45-49页 |
结果 | 第49-55页 |
1 同源打靶载体鉴定 | 第49-53页 |
2 CRISPR/cas9载体构建活性检测 | 第53-55页 |
讨论 | 第55-57页 |
第二章 牛成纤维细胞转染及单克隆细胞的鉴定 | 第57-71页 |
前言 | 第57-58页 |
材料与方法 | 第58-61页 |
1 实验材料 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-61页 |
结果 | 第61-69页 |
1 牛胎儿成纤维细胞皮肤细胞分离和形态观察 | 第61-62页 |
2 牛胎儿成纤维细胞生长曲线绘制 | 第62-63页 |
3 转染条件筛选结果 | 第63-64页 |
4 单克隆细胞阳性筛选 | 第64-65页 |
5 单克隆细胞hINS和Neo基因鉴定 | 第65-67页 |
6 同源打靶载体片段完整性验证 | 第67页 |
7 同源重组验证 | 第67-68页 |
8 hINS基因在mRNA和Western Blot水平表达 | 第68-69页 |
讨论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
结论 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |