摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第10-22页 |
1.花色代谢的研究现状 | 第10-11页 |
2.类黄酮的功能、合成途径及其影响因素 | 第11-14页 |
3.査尔酮异构酶(Chalcone Isomerase,CHI)研究现状 | 第14-21页 |
4.研究意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-39页 |
1.实验材料 | 第22-24页 |
1.1 植物材料 | 第22页 |
1.2 表达载体及菌种 | 第22页 |
1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
1.4 仪器设备 | 第23-24页 |
2.实验方法 | 第24-39页 |
2.1 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)cDNA全长的克隆 | 第24-29页 |
2.2 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)基因组序列的克隆 | 第29-30页 |
2.3 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的生物信息学分析 | 第30页 |
2.4 红色、白色香雪兰中查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的基因表达量差异的半定量分析 | 第30页 |
2.5 红色香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)在花开放各时期的基因表达量半定量分析 | 第30页 |
2.6 红色香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)在不同组织中的基因表达量半定量分析 | 第30-31页 |
2.7 构建原核表达载体pET28a-FhCHIs | 第31-32页 |
2.8 原核表达载体pET28a-FhCHIs可溶性重组蛋白的体外诱导 | 第32-34页 |
2.9 可溶性重组蛋白pET28a-FhCHIs的纯化 | 第34-35页 |
2.10 体外检测重组蛋白pET28a-FhCHIs的酶活性 | 第35页 |
2.11 构建真核表达载体pBI121-FhCHIs | 第35-36页 |
2.12 pBI121-FhCHIs转基因进入拟南芥突变体及筛选、验证 | 第36-37页 |
2.13 pBI121-FhCHIs转基因拟南芥的花色苷、黄酮醇的检测 | 第37-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-63页 |
1.香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的克隆及其序列分析 | 第39-47页 |
1.1 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)cDNA全长的克隆 | 第39-43页 |
1.2 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)基因组序列的克隆 | 第43-44页 |
1.3 香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的生物信息学分析 | 第44-47页 |
2.香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的表达模式分析 | 第47-50页 |
2.1 红色、白色香雪兰中查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的基因表达量差异半定量分析 | 第47-48页 |
2.2 红色香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)在花开放各时期的基因表达量半定量分析 | 第48-49页 |
2.3 红色香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)在不同组织中的基因表达量半定量分析 | 第49-50页 |
3.香雪兰查尔酮异构酶(FhCHIs)原核表达蛋白的制备和体外酶活检测 | 第50-56页 |
3.1 成功构建原核表达载体pET28a-FhCHIs | 第50页 |
3.2 原核表达载体pET28a-FhCHIs可溶性重组蛋白的体外诱导结果 | 第50-53页 |
3.3 可溶性重组蛋白pET28a-FhCHIs的纯化 | 第53-55页 |
3.4 FhCHIs体外酶活反应结果 | 第55-56页 |
4.香雪兰查尔酮异构酶基因家族(FhCHIs)的真核异源表达 | 第56-63页 |
4.1 成功构建真核表达载体pBI121-FhCHIs | 第56页 |
4.2 pBI121-FhCHIs转基因进入拟南芥后的筛选、验证和表型恢复情况 | 第56-59页 |
4.3 pBI121-FhCHIs转基因拟南芥的花色苷、黄酮醇的检测结果 | 第59-63页 |
第四章 讨论 | 第63-66页 |
1.FhCHI基因家族的序列和进化分析 | 第63页 |
2.FhCHI基因家族的时空表达特异性 | 第63-64页 |
3.原核表达蛋白包涵体的形成原因及解决方法 | 第64-65页 |
4.FhCHI基因家族的真核异源表达分析 | 第65-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
附录 | 第72-77页 |
致谢 | 第77页 |