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双酚A对稀有鮈鲫脂质代谢的干扰及其调控机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-23页
    1.1 双酚A(BPA)第13-15页
        1.1.1 BPA简介第13-14页
        1.1.2 BPA研究进展第14-15页
    1.2 脂质代谢的过程第15-17页
        1.2.1 脂肪酸从头合成第15-16页
        1.2.2 脂肪酸 β-氧化第16-17页
        1.2.3 甘油三酯的合成第17页
    1.3 固醇类调控元件结合蛋白-1第17-19页
        1.3.1 固醇类调控元件结合蛋白作用机理第17-18页
        1.3.2 固醇类调控元件结合蛋白-1c研究进展第18-19页
    1.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)第19页
        1.4.1 酶联免疫吸附测定原理第19页
        1.4.2 酶联免疫吸附测定方法第19页
    1.5 染色质免疫共沉淀(CHIP)第19-21页
        1.5.1 染色质免疫共沉淀原理第19-20页
        1.5.2 染色质免疫共沉淀应用第20-21页
    1.6 DNA甲基化第21-22页
        1.6.1 表观遗传学第21页
        1.6.2 DNA甲基化的调控机制第21页
        1.6.3 DNA甲基化在鱼类上的研究进展第21-22页
    1.7 水环境中毒性试验材料第22页
    1.8 研究目的与意义第22-23页
第二章 双酚A对稀有鮈鲫脂质代谢的影响第23-34页
    2.1 试验材料第23-24页
        2.1.1 稀有鮈鲫第23页
        2.1.2 主要试剂和仪器第23页
        2.1.3 主要溶液及配制第23页
        2.1.4 BPA暴露稀有鮈鲫第23-24页
    2.2 试验方法第24-27页
        2.2.1 血清和肝脏中甘油三酯含量检测第24-25页
        2.2.2 RNA的提取及cDNA合成第25页
        2.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达第25-26页
        2.2.4 肝脏中酶活性检测第26-27页
        2.2.5 数据分析第27页
    2.3 结果第27-31页
        2.3.1 BPA暴露试验和样品的形态学测量第27页
        2.3.2 肝脏总RNA的质量检测第27-28页
        2.3.3 qRT-PCR引物检测第28-29页
        2.3.4 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏和血清中甘油三酯含量的影响第29-30页
        2.3.5 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中酶活性的影响第30-31页
        2.3.6 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中基因表达的影响第31页
    2.4 讨论第31-33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 BPA通过影响acaca、fasn和cpt1α 的基因表达干扰脂质代谢的机制研究第34-54页
    3.1 试验材料第34页
        3.1.1 稀有鮈鲫第34页
        3.1.2 主要试剂和仪器第34页
        3.1.3 主要溶液及配制第34页
        3.1.4 BPA暴露试验第34页
    3.2 试验方法第34-40页
        3.2.1 RNA的提取及qRT-PCR第34-35页
        3.2.2 甘油三酯含量检测第35页
        3.2.3 蛋白的提取及测定第35页
        3.2.4 蛋白质印记(Western Blot)第35页
        3.2.5 基因 5’侧翼序列的克隆第35-36页
        3.2.6 SREBP-1 结合位点的预测及CpG位点预测第36-37页
        3.2.7 染色质免疫共沉淀(CHIP)第37-38页
        3.2.8 基因组DNA的提取和亚硫酸氢盐修饰第38-39页
        3.2.9 甲基化检测第39-40页
        3.2.10 数据分析第40页
    3.3 结果第40-52页
        3.3.1 形态学指标的测量结果第40-41页
        3.3.2 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中甘油三酯含量的影响第41-42页
        3.3.3 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中基因表达的影响第42-44页
        3.3.4 BPA暴露后肝脏中SREBP-1 蛋白表达量变化第44-45页
        3.3.5 基因克隆及生物信息学分析第45-46页
        3.3.6 BPA暴露对SREBP-1 蛋白与acaca、fasn和cpt1α 5’侧翼序列上SRE位点相互作用的影响第46-48页
        3.3.7 BPA暴露对acaca、fasn和cpt1α 5’侧翼序列上甲基化水平的影响第48-52页
    3.4 讨论第52-53页
    3.5 小结第53-54页
结论第54-55页
    本研究得出的主要结论第54页
    本研究创新点第54页
    今后研究重点第54-55页
参考文献第55-60页
附录第60-71页
缩略词第71-72页
致谢第72-73页
作者简介第73页

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