摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 双酚A(BPA) | 第13-15页 |
1.1.1 BPA简介 | 第13-14页 |
1.1.2 BPA研究进展 | 第14-15页 |
1.2 脂质代谢的过程 | 第15-17页 |
1.2.1 脂肪酸从头合成 | 第15-16页 |
1.2.2 脂肪酸 β-氧化 | 第16-17页 |
1.2.3 甘油三酯的合成 | 第17页 |
1.3 固醇类调控元件结合蛋白-1 | 第17-19页 |
1.3.1 固醇类调控元件结合蛋白作用机理 | 第17-18页 |
1.3.2 固醇类调控元件结合蛋白-1c研究进展 | 第18-19页 |
1.4 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第19页 |
1.4.1 酶联免疫吸附测定原理 | 第19页 |
1.4.2 酶联免疫吸附测定方法 | 第19页 |
1.5 染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第19-21页 |
1.5.1 染色质免疫共沉淀原理 | 第19-20页 |
1.5.2 染色质免疫共沉淀应用 | 第20-21页 |
1.6 DNA甲基化 | 第21-22页 |
1.6.1 表观遗传学 | 第21页 |
1.6.2 DNA甲基化的调控机制 | 第21页 |
1.6.3 DNA甲基化在鱼类上的研究进展 | 第21-22页 |
1.7 水环境中毒性试验材料 | 第22页 |
1.8 研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 双酚A对稀有鮈鲫脂质代谢的影响 | 第23-34页 |
2.1 试验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 稀有鮈鲫 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第23页 |
2.1.3 主要溶液及配制 | 第23页 |
2.1.4 BPA暴露稀有鮈鲫 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-27页 |
2.2.1 血清和肝脏中甘油三酯含量检测 | 第24-25页 |
2.2.2 RNA的提取及cDNA合成 | 第25页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达 | 第25-26页 |
2.2.4 肝脏中酶活性检测 | 第26-27页 |
2.2.5 数据分析 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-31页 |
2.3.1 BPA暴露试验和样品的形态学测量 | 第27页 |
2.3.2 肝脏总RNA的质量检测 | 第27-28页 |
2.3.3 qRT-PCR引物检测 | 第28-29页 |
2.3.4 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏和血清中甘油三酯含量的影响 | 第29-30页 |
2.3.5 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中酶活性的影响 | 第30-31页 |
2.3.6 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中基因表达的影响 | 第31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 BPA通过影响acaca、fasn和cpt1α 的基因表达干扰脂质代谢的机制研究 | 第34-54页 |
3.1 试验材料 | 第34页 |
3.1.1 稀有鮈鲫 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第34页 |
3.1.3 主要溶液及配制 | 第34页 |
3.1.4 BPA暴露试验 | 第34页 |
3.2 试验方法 | 第34-40页 |
3.2.1 RNA的提取及qRT-PCR | 第34-35页 |
3.2.2 甘油三酯含量检测 | 第35页 |
3.2.3 蛋白的提取及测定 | 第35页 |
3.2.4 蛋白质印记(Western Blot) | 第35页 |
3.2.5 基因 5’侧翼序列的克隆 | 第35-36页 |
3.2.6 SREBP-1 结合位点的预测及CpG位点预测 | 第36-37页 |
3.2.7 染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第37-38页 |
3.2.8 基因组DNA的提取和亚硫酸氢盐修饰 | 第38-39页 |
3.2.9 甲基化检测 | 第39-40页 |
3.2.10 数据分析 | 第40页 |
3.3 结果 | 第40-52页 |
3.3.1 形态学指标的测量结果 | 第40-41页 |
3.3.2 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中甘油三酯含量的影响 | 第41-42页 |
3.3.3 BPA暴露对稀有鮈鲫肝脏中基因表达的影响 | 第42-44页 |
3.3.4 BPA暴露后肝脏中SREBP-1 蛋白表达量变化 | 第44-45页 |
3.3.5 基因克隆及生物信息学分析 | 第45-46页 |
3.3.6 BPA暴露对SREBP-1 蛋白与acaca、fasn和cpt1α 5’侧翼序列上SRE位点相互作用的影响 | 第46-48页 |
3.3.7 BPA暴露对acaca、fasn和cpt1α 5’侧翼序列上甲基化水平的影响 | 第48-52页 |
3.4 讨论 | 第52-53页 |
3.5 小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
本研究得出的主要结论 | 第54页 |
本研究创新点 | 第54页 |
今后研究重点 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 | 第60-71页 |
缩略词 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简介 | 第73页 |