摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 猪流行性腹泻病毒PEDV研究进展 | 第11-12页 |
1.1.1 猪流行性腹泻病毒PEDV概述 | 第11-12页 |
1.1.2 PEDV的几种关键蛋白 | 第12页 |
1.2 猪轮状病毒PRV研究进展 | 第12-13页 |
1.2.1 猪轮状病毒PRV概述 | 第12-13页 |
1.2.2 PRV的几种关键蛋白 | 第13页 |
1.3 猪传染性肠胃炎病毒TGEV研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 猪传染性肠胃炎病毒TGEV概述 | 第13-14页 |
1.3.2 TGEV的几种关键蛋白 | 第14-15页 |
1.4 猪腹泻病毒疫苗研究现状 | 第15-16页 |
1.4.1 传统疫苗 | 第15页 |
1.4.2 亚单位疫苗 | 第15页 |
1.4.3 核酸疫苗 | 第15页 |
1.4.4 转基因植物疫苗 | 第15-16页 |
1.4.5 联合疫苗 | 第16页 |
1.5 转基因植物疫苗表达系统 | 第16-17页 |
1.5.1 转基因植物疫苗作用机制 | 第16页 |
1.5.2 植物瞬时表达系统 | 第16页 |
1.5.3 植物稳定表达系统 | 第16-17页 |
1.5.4 玉米胚乳表达系统 | 第17页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第17页 |
1.7 试验技术路线 | 第17-19页 |
第二章 猪流行性腹泻病毒S基因的稳定转化 | 第19-34页 |
2.1 材料与试剂 | 第19-21页 |
2.1.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.2 试验仪器 | 第19-20页 |
2.1.3 试剂配方 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-26页 |
2.2.1 PEDV-S基因以及 14kD Zein启动子的设计与获得 | 第21-23页 |
2.2.2 PEDV-S基因表达载体的构建 | 第23-25页 |
2.2.3 重组质粒转化农杆菌 | 第25页 |
2.2.4 烟草的培养和稳定转化 | 第25-26页 |
2.2.5 玉米幼胚的培养和稳定转化 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-33页 |
2.3.1 PEDV-S基因以及 14kD Zein启动子的设计与获得 | 第26-28页 |
2.3.2 PEDV-S重组表达载体的构建 | 第28-30页 |
2.3.3 重组质粒转化农杆菌的鉴定 | 第30-31页 |
2.3.4 普通烟草的培养和稳定转化 | 第31-32页 |
2.3.5 玉米幼胚的培养和稳定转化 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 猪轮状病毒VP4-7 基因的瞬时表达 | 第34-43页 |
3.1 材料与试剂 | 第34页 |
3.1.1 植物材料和菌种 | 第34页 |
3.1.2 试验仪器和试剂 | 第34页 |
3.2 试验方法 | 第34-38页 |
3.2.1 农杆菌菌液PCR鉴定 | 第34-35页 |
3.2.2 烟草的培养和瞬时转化 | 第35页 |
3.2.3 烟草总蛋白的提取 | 第35页 |
3.2.4 烟草总蛋白的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第35-37页 |
3.2.5 纯化后蛋白的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第37-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
3.3.1 农杆菌菌液PCR鉴定 | 第38页 |
3.3.2 烟草的培养和瞬时转化 | 第38-39页 |
3.3.3 烟草总蛋白的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第39-40页 |
3.3.4 纯化后蛋白的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第40-41页 |
3.4 讨论 | 第41页 |
3.5 小结 | 第41-43页 |
第四章 猪传染性肠胃炎病毒S基因表达载体的构建 | 第43-48页 |
4.1 材料与试剂 | 第43页 |
4.1.1 试验材料 | 第43页 |
4.1.2 试验仪器和试剂 | 第43页 |
4.2 试验方法 | 第43-44页 |
4.2.1 TGEV-S基因的设计 | 第43页 |
4.2.2 TGEV-S基因植物表达载体构建 | 第43-44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-47页 |
4.3.1 TGEV-S基因的设计 | 第44-45页 |
4.3.2 TGEV-S基因植物表达载体构建 | 第45-47页 |
4.4 讨论 | 第47页 |
4.5 小结 | 第47-48页 |
第五章 总结与展望 | 第48-49页 |
5.1 结论 | 第48页 |
5.2 创新点 | 第48页 |
5.3 展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |