| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 主要符号表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-24页 |
| 1 材料 | 第24-27页 |
| ·实验细胞与试剂 | 第24页 |
| ·常用生化试剂 | 第24页 |
| ·常用生化耗材 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·细胞培养所需溶液的配置 | 第24-25页 |
| ·磷酸盐缓冲液(PBS) | 第24-25页 |
| ·完全无菌细胞培养基 | 第25页 |
| ·细胞冻存液 | 第25页 |
| ·MTT溶液 | 第25页 |
| ·0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA消化液 | 第25页 |
| ·Western Blot所需试剂配制方法 | 第25-27页 |
| ·分离胶缓冲液(1.5 mol/L Tris-HCl,pH 8.8) | 第25页 |
| ·浓缩胶缓冲液(1.0 mol/L Tris-HCl,pH 6.8) | 第25页 |
| ·30%丙稀酰胺溶液 | 第25-26页 |
| ·10% 过硫酸铵溶液 | 第26页 |
| ·10% SDS溶液 | 第26页 |
| ·还原型 5×SDS上样缓冲液 | 第26页 |
| ·5×电泳缓冲液 | 第26页 |
| ·10×转膜缓冲液 | 第26页 |
| ·10×TBS缓冲液 | 第26-27页 |
| ·TBST缓冲液 | 第27页 |
| ·封闭液(含 5%脱脂奶粉的TBST缓冲液) | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-32页 |
| ·MTT法检测甲醛对人支气管上皮细胞 16HBE增殖活性 | 第27-28页 |
| ·16HBE细胞复苏 | 第27页 |
| ·16HBE细胞传代 | 第27页 |
| ·16HBE细胞接种 | 第27-28页 |
| ·加药处理 | 第28页 |
| ·检测结果 | 第28页 |
| ·急性甲醛染毒人支气管上皮细胞 16HBE 2、4 小时及待测样品制备 | 第28-29页 |
| ·细胞的复苏和传代 | 第28页 |
| ·16HBE细胞接种 | 第28-29页 |
| ·加药处理 | 第29页 |
| ·ELISA法测细胞上清液Th1/Th2/Th17类细胞因子含量 | 第29-30页 |
| ·Western blot法检测甲醛对细胞信号转导通路蛋白的影响 | 第30-32页 |
| ·接种细胞 | 第30页 |
| ·甲醛处理 | 第30页 |
| ·蛋白收集 | 第30页 |
| ·BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白含量及分装 | 第30-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
| ·湿法转膜 | 第31页 |
| ·抗体孵育及检测 | 第31-32页 |
| ·统计分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-44页 |
| ·甲醛染毒对 16HBE毒性结果 | 第32-33页 |
| ·人支气管上皮细胞急性甲醛染毒 2、4 小时后细胞上清液中Th1类细胞因子变化研究 | 第33-36页 |
| ·不同浓度甲醛染毒2小时Th1类细胞因子检测结果 | 第33页 |
| ·不同浓度甲醛染毒4小时Th1类细胞因子检测结果 | 第33-34页 |
| ·2、4 小时Th1类细胞因子柱状图 | 第34-36页 |
| ·人支气管上皮细胞急性甲醛染毒 2、4 小时后细胞上清液中Th2类细胞因子变化研究 | 第36-39页 |
| ·不同浓度甲醛染毒2小时Th2细胞因子检测结果 | 第36-37页 |
| ·不同浓度甲醛染毒4小时Th2细胞因子检测结果 | 第37-38页 |
| ·2、4 小时Th2类细胞因子柱状图 | 第38-39页 |
| ·人支气管上皮细胞急性甲醛染毒 2、4 小时后细胞上清液中Th17类与TNF-α细胞因子变化研究 | 第39-42页 |
| ·不同浓度甲醛染毒2小时Th17类与TNF-α细胞因子检测结果 | 第39-40页 |
| ·不同浓度甲醛染毒4小时Th17类与TNF-α细胞因子检测结果 | 第40-41页 |
| ·2、4 小时Th17类与TNF-α细胞因子柱状图 | 第41-42页 |
| ·不同浓度甲醛染毒 16HBE对细胞信号转导通路蛋白的影响 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 综述 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读硕士期间已(待)发表论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |