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山羊痘病毒感染过程中ova-miR-34a-5p的动态表达及其靶标鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词英文对照表第10-13页
第一章 引言第13-27页
   ·羊痘病毒概述第13-15页
   ·miRNA的分子特征及在动物中的合成第15-18页
   ·miRNA在HIV-1病毒感染过程中的作用第18-21页
   ·miRNA的主要检测方法第21-23页
     ·Northern blotting杂交第21页
     ·miRNA芯片第21页
     ·Q-PCR(real time quantitative PCR)第21-22页
     ·高通量测序第22-23页
   ·靶基因预测方法第23-25页
   ·研究目的与意义第25-27页
第二章 羊痘病毒感染过程中ova-miR-34a-5p的动态表达第27-38页
   ·实验材料第27-28页
     ·主要试剂第27页
     ·主要仪器第27-28页
   ·实验方法第28-32页
     ·羔羊睾丸(LT)细胞培养第28-29页
     ·LT细胞的接毒与收毒第29页
     ·实时定量PCR(Q-PCR)反应第29-32页
   ·实验结果第32-37页
     ·提取的样品总RNA质量检测第32-35页
     ·引物质量及内参基因检测第35-36页
     ·ova-miR-34a-5p在病毒感染过程中表达量变化的验证第36-37页
   ·讨论第37-38页
第三章 mir-34a及其靶标基因的生物信息学分析第38-51页
   ·实验材料第38页
   ·实验方法第38-39页
     ·mir-34a序列的获得第38-39页
     ·系统发生分析第39页
     ·靶基因预测第39页
     ·靶基因功能分析第39页
   ·实验结果与分析第39-49页
     ·mir-34a的序列保守性及在基因组中的定位第39-41页
     ·系统进化树的构建第41-42页
     ·靶基因预测第42-45页
     ·靶基因功能分析第45-49页
   ·讨论第49-51页
第四章 ova-miR-34a-5p的靶基因mycn的初步鉴定第51-66页
   ·实验材料第51-52页
     ·细胞、菌种和试剂第51-52页
     ·主要实验器材第52页
   ·实验方法第52-59页
     ·LT细胞总RNA的提取第52页
     ·mycn 3’UTR序列的克隆第52-54页
     ·双荧光素酶报告基因重组载体的构建第54-58页
     ·双荧光素酶报告基因检测第58-59页
     ·统计学处理第59页
   ·实验结果与分析第59-64页
     ·总RNA提取质量检测第59-60页
     ·mycn 3'UTR序列扩增结果第60-61页
     ·双荧光素酶报告基因重组载体的构建与鉴定第61-62页
     ·双荧光素酶报告基因检测第62-64页
     ·统计学处理第64页
   ·讨论第64-66页
第五章 全文结论第66-67页
参考文献第67-75页
致谢第75-76页
个人简介第76页

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