| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-20页 |
| 1. miRNA的发现 | 第10页 |
| 2. miRNA的形成机制 | 第10-11页 |
| 3. miRNA的功能 | 第11-15页 |
| ·miRNA调控多种生理过程 | 第12-14页 |
| ·miRNA调控多种病理过程 | 第14-15页 |
| 4. miRNA的研究方法 | 第15-16页 |
| ·miRNA的鉴定方法 | 第15-16页 |
| ·miRNA的表达检测方法 | 第16页 |
| 5. miRNA在性腺中的作用 | 第16-19页 |
| ·miRNA在精巢中的研究现状 | 第16-17页 |
| ·miRNA在卵巢中的作用 | 第17-19页 |
| 6.青鳉性腺研究 | 第19页 |
| 7.本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 日本青鳉性腺与脑小RNA文库构建和测序 | 第20-26页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| ·仪器与试剂 | 第20页 |
| ·Small RNA提取 | 第20-21页 |
| ·Solexa测序 | 第21-22页 |
| ·小RNA测序分析 | 第22-23页 |
| 2 结果与讨论 | 第23-26页 |
| ·测序数据统计分析 | 第23-24页 |
| ·序列长度分布 | 第24页 |
| ·已知miRNA和miRNA*的鉴定 | 第24-25页 |
| ·已知mi RNA的系统保守性比较 | 第25-26页 |
| 第三章 miRNA差异表达谱分析及qPCR验证 | 第26-35页 |
| 1 材料与方法 | 第26-30页 |
| ·实验动物及RNA提取 | 第26页 |
| ·定量数据分析 | 第26页 |
| ·miRNAs差异表达分析 | 第26-27页 |
| ·qPCR验证 | 第27-29页 |
| ·差异miRNA靶基因预测 | 第29页 |
| ·靶基因的功能注释 | 第29-30页 |
| 2 结果与讨论 | 第30-35页 |
| ·性腺差异表达miRNA | 第30-31页 |
| ·差异mi RNA的靶基因预测及功能注释 | 第31-32页 |
| ·样本miRNA表达qPCR验证 | 第32-33页 |
| ·潜在miRNA的克隆与鉴定 | 第33-35页 |
| 第四章 miR2025p在青鳉性腺中的表达及功能研究 | 第35-45页 |
| 1. 材料与方法 | 第35-42页 |
| ·青鳉鱼及胚胎 | 第35-36页 |
| ·PCR产物切胶回收 | 第36-37页 |
| ·TA克隆 | 第37页 |
| ·转化 | 第37-38页 |
| ·重组子筛选及测序 | 第38页 |
| ·质粒中量制备 | 第38-39页 |
| ·体外转录合成RNA探针 | 第39-40页 |
| ·miR2025p反义探针 | 第40页 |
| ·RNA双色荧光原位杂交 | 第40-42页 |
| ·AntagomiR合成与注射 | 第42页 |
| ·显微镜观察 | 第42页 |
| 2. 结果与讨论 | 第42-45页 |
| ·miR2025p在青鳉性腺中的表达 | 第42-43页 |
| ·miR2025p抑制对青鳉生殖细胞的影响 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 附录 | 第55-65页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |