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黄花蒿HDR基因克隆及功能研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·背景概括第11页
   ·黄花蒿第11-12页
   ·青蒿素第12-16页
     ·青蒿素衍生物第13页
     ·青蒿素的合成,分泌,存储场所—腺毛体第13-16页
   ·青蒿素生物合成代谢途径第16-19页
     ·青蒿素生物合成上游途径第16-18页
     ·青蒿素生物合成下游途径第18-19页
   ·影响黄花蒿中青蒿素含量的因素第19-21页
     ·植物形态对青蒿素含量的影响第19页
     ·产地条件对青蒿素含量的影响第19-20页
     ·气候条件对青蒿素含量的影响第20页
     ·采集部位及采集时间对青蒿素含量的影响第20页
     ·外源激素对青蒿素含量的影响第20-21页
   ·利用基因工程手段提高黄花蒿中青蒿素含量第21-23页
     ·过表达青蒿素生物合成途径上的基因对青蒿素含量的影响第21页
     ·过表达转录因子对青蒿素含量的影响第21页
     ·抑制青蒿素生物合成竞争支路上的基因对青蒿素含量的影响第21-23页
第二章 绪论第23-27页
   ·研究目的和意义第23-24页
   ·研究内容和范围第24-25页
   ·研究的技术路线第25-27页
第三章 材料与方法第27-45页
   ·植物材料第27页
   ·菌株和质粒第27页
   ·仪器和设备第27-28页
   ·试剂盒及试剂第28页
   ·主要自配试剂第28-29页
   ·常规方法介绍第29-34页
     ·DNA、RNA提取第29-30页
     ·黄花蒿cDNA合成第30-31页
     ·目的片段胶回收第31页
     ·连接反应第31-32页
     ·大肠杆菌感受态制备及转化第32页
     ·重组子的鉴定和测序第32-33页
     ·质粒提取第33页
     ·农杆菌感受态制备及转化第33-34页
   ·黄花蒿AaHDR2基因的克隆及生物信息学分析第34-39页
     ·黄花蒿AaHDR2编码区全长克隆第34-37页
     ·生物信息学分析第37页
     ·黄花蒿AaHDR2组织表达分析第37-38页
     ·黄花蒿AaHDR2诱导谱分析第38-39页
   ·AaHDR2在大肠杆菌中的功能验证第39-40页
     ·pQE30-AaHDR2原核表达载体构建第39页
     ·pQE30-AaHDR2在大肠杆菌中的功能验证第39-40页
   ·AaHDR2的亚细胞定位第40-41页
     ·p1300 -AaHDR2-GFP亚细胞定位载体构建第40-41页
     ·p1300-AaHDR2-GFP亚细胞定位第41页
   ·AaHDR2在拟南芥植株中过表达第41-45页
     ·pHB -AaHDR2植物表达载体构建第41-42页
     ·重组质粒pHB -AaHDR2蘸花法转化拟南芥第42页
     ·拟南芥阳性植株的筛选及鉴定第42-43页
     ·转基因拟南芥中叶绿素a、叶绿素b及类胡萝卜素的提取与测定第43-45页
第四章 结果与分析第45-61页
   ·AaHDR2基因的获得第45页
   ·AaHDR2生物信息学分析第45-51页
     ·AaHDR2的序列特征第45-46页
     ·AaHDR2蛋白二级结构预测第46-47页
     ·AaHDR2信号肽和转运肽预测第47-48页
     ·AaHDR2氨基酸序列的多重比对第48-50页
     ·AaHDR2进化树构建第50-51页
   ·AaHDR2基因表达谱分析第51-53页
     ·AaHDR2组织表达谱分析第51-52页
     ·AaHDR2诱导表达谱分析第52-53页
   ·AaHDR2在大肠杆菌中的功能验证第53-55页
   ·AaHDR2亚细胞定位第55-57页
   ·转AaHDR2拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量的测定第57-61页
     ·PCR检测转基因拟南芥阳性苗第57-58页
     ·转基因拟南芥中叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量的测定第58-61页
第五章 结论与展望第61-63页
   ·实验结论与讨论第61-62页
   ·实验展望第62-63页
参考文献第63-71页
附录第71-73页
硕士期间发表论文第73-75页
致谢第75页

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