| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| ·海栖热袍菌简介 | 第12-14页 |
| ·海栖热袍菌的培养 | 第12页 |
| ·海栖热袍菌碳水化合物利用能力及碳代谢中心途径 | 第12-13页 |
| ·海栖热袍菌多糖水解酶系 | 第13-14页 |
| ·木质纤维素的应用现状 | 第14-19页 |
| ·木质纤维素的结构及组成 | 第14-16页 |
| ·生物燃料的分类 | 第16-17页 |
| ·纤维素乙醇的生物炼制 | 第17-18页 |
| ·纤维素乙醇高温发酵 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶及其应用 | 第19-22页 |
| ·纤维素酶的来源与分类 | 第19-20页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第20-21页 |
| ·纤维素酶的水解机制 | 第21-22页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第22页 |
| ·本课题的立题背景及主要研究内容 | 第22-26页 |
| ·立体背景 | 第22-23页 |
| ·主要研究内容 | 第23-26页 |
| 第二章 海栖热袍菌纤维素酶的克隆及表达 | 第26-40页 |
| ·材料和方法 | 第26-35页 |
| ·菌种和质粒 | 第26页 |
| ·培养基和溶液 | 第26-27页 |
| ·主要分子试剂和酶 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·T. maritima MSB8基因组DNA的提取 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·引物设计及合成 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及目的基因回收 | 第31页 |
| ·DNA片段的处理及连接 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32页 |
| ·大肠杆菌重组表达质粒的构建 | 第32-34页 |
| ·重组纤维素酶的诱导表达 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-37页 |
| ·纤维素酶基因的克隆 | 第35页 |
| ·重组质粒pHsh-EGs的构建 | 第35-36页 |
| ·纤维素酶在E. coli JM109中的表达 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 海栖热袍菌纤维素酶的分离纯化及酶学活性研究 | 第40-56页 |
| ·材料和方法 | 第40-45页 |
| ·菌种和质粒 | 第40页 |
| ·培养基和溶液 | 第40-41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·电转化感受态细胞制备和质粒转化 | 第41页 |
| ·重组纤维素酶的纯化 | 第41-42页 |
| ·酶活测定 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第43页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第43-44页 |
| ·重组纤维素酶的酶学性质分析 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-53页 |
| ·重组纤维素酶粗酶液热处理及镍亲和层析纯化 | 第45页 |
| ·重组纤维素酶纯化SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
| ·纤维素酶的活性分析 | 第46-47页 |
| ·重组纤维素酶纯化结果 | 第47页 |
| ·重组纤维素酶的酶学性质 | 第47-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-56页 |
| 第四章 重组Tma-EG5B的分离纯化及酶学活性研究 | 第56-64页 |
| ·材料和方法 | 第56-58页 |
| ·菌种和质粒 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·重组Tma-EG5B的同源性分析 | 第56页 |
| ·电转化感受态细胞制备和质粒转化 | 第56页 |
| ·重组Tma-EG5B的纯化 | 第56-57页 |
| ·酶活测定 | 第57页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第57页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第57页 |
| ·重组Tma-EG5B的酶学性质分析 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-62页 |
| ·重组Tma-EG5B的同源性分析 | 第58-59页 |
| ·重组Tma-EG5B的分离纯化 | 第59页 |
| ·重组Tma-EG5B的酶学性质分析 | 第59-62页 |
| ·重组Tma-EG5B的底物特异性 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第五章 全文总结 | 第64-68页 |
| ·全文总结 | 第64-65页 |
| ·研究展望 | 第65-66页 |
| ·论文创新点 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第78页 |
