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羊口疮病毒重庆株的分离鉴定及其F1L基因原核表达研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
前言第9-11页
文献综述第11-19页
第一章 羊口疮病毒重庆株(OrfV-CQ株)的分离与鉴定第19-32页
 1 材料第19-20页
   ·病料来源第19页
   ·传代细胞第19页
   ·主要试剂第19-20页
   ·主要仪器第20页
 2 方法第20-24页
   ·羊口疮病毒的分离第20-21页
     ·病料样本的制备第20页
     ·MDBK细胞分离病毒第20-21页
   ·羊口疮病毒的鉴定第21-24页
     ·电镜观察第21页
     ·间接免疫荧光第21页
     ·PCR扩增与测序第21-24页
   ·羊口疮病毒分离株TCID50测定第24页
   ·动物感染试验第24页
 3 结果第24-30页
   ·MDBK细胞分离病毒结果第24-25页
   ·电镜观察结果第25-26页
   ·间接免疫荧光结果第26-27页
   ·PCR扩增结果第27页
   ·PCR产物序列测定结果第27-28页
   ·羊口疮病毒分离株TCID_(50)测定结果第28-29页
   ·动物感染试验结果第29-30页
 4 讨论第30-31页
 5 小结第31-32页
第二章 羊口疮病毒重庆株(OrfV-CQ株)F1L基因的生物信息学分析第32-49页
 1 材料第32-33页
   ·病毒第32页
   ·菌株与载体第32页
   ·主要试剂第32-33页
   ·主要仪器第33页
 2 方法第33-39页
   ·OrfV-CQ株F1L基因克隆鉴定第33-39页
     ·引物设计与合成第33页
     ·OrfV-CQ株F1L基因PCR扩增第33-34页
     ·OrfV-CQ株F1L基因重组质粒构建第34-36页
     ·OrfV-CQ株F1L基因重组质粒鉴定第36-39页
   ·OrfV-CQ株F1L基因生物信息学分析第39页
 3 结果第39-46页
   ·OrfV-CQ株F1L基因PCR扩增结果第39-40页
   ·OrfV-CQ株F1L基因重组质粒鉴定结果第40-41页
   ·OrfV-CQ株F1L基因核苷酸及推导氨基酸序列同源性分析结果第41-44页
     ·OrfV-CQ株F1L基因核苷酸测序及推导氨基酸序列结果第41-42页
     ·OrfV-CQ株F1L基因核苷酸及氨基酸同源性分析结果第42-44页
     ·OrfV-CQ株F1L基因遗传进化树分析结果第44页
   ·OrfV-CQ株F1L基因生物信息学分析结果第44-46页
     ·OrfV-CQ株F1L基因推导的氨基酸二级结构预测结果第44-45页
     ·OrfV-CQ株F1L基因B细胞抗原表位综合分析结果第45页
     ·OrfV-CQ株F1L基因编码蛋白信号肽预测结果第45-46页
 4 讨论第46-48页
 5 小结第48-49页
第三章 羊口疮病毒重庆株 F1L 基因原核表达研究第49-60页
 1 材料第49页
   ·毒株第49页
   ·菌株与载体第49页
   ·主要试剂第49页
   ·主要仪器与设备第49页
 2 方法第49-54页
   ·目的基因获取第49-50页
   ·重组质粒构建第50-52页
   ·重组质粒表达第52-53页
   ·表达蛋白鉴定第53-54页
 3 结果第54-58页
   ·重组质粒p ET-32a-F1L鉴定结果第54-55页
   ·原核表达产物的SDS-PAGE分析结果第55-57页
     ·诱导时间优化结果第55页
     ·IPTG浓度优化结果第55-56页
     ·SDS-PAGE鉴定结果第56-57页
   ·Western blotting鉴定结果第57-58页
 4.讨论第58-59页
 5.小结第59-60页
结论第60-61页
参考文献第61-66页
附录一 攻读硕士期间参与发表的论文第66-67页
附录二 缩略词表第67-68页
附录三 各种培养基、溶液及试剂配制第68-70页
致谢第70-71页

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