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TGF-β1、PDGF-B在TLR4信号通路中作用的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略语 (abbreviations)第9-10页
前言第10-13页
1 材料第13-16页
   ·实验动物第13页
   ·主要试剂第13-14页
   ·主要实验仪器第14页
   ·主要溶液的配制第14-16页
2 方法第16-23页
   ·小鼠MECs的制备与提取第16-17页
     ·混合酶消化法培养小鼠MECs第16页
     ·小鼠MECs的总RNA的提取第16-17页
     ·小鼠MECs总RNA反转录为cDNA第17页
   ·实时荧光定量RT-PCR筛选TGF-β1、PDGF-B的siRNA最佳转染条件第17-21页
     ·引物设计及最佳退火温度测定第17-19页
     ·siRNA片段设计及最佳转染条件筛选第19-21页
   ·实时荧光定量RT-PCR检测目的基因转染后LPS介导其下游信号mRNA表达量第21页
   ·ELISA法检测目的基因转染后LPS介导细胞分泌的其下游信号蛋白含量第21-22页
   ·ELISA法检测目的基因转染小鼠MECs后细胞分泌TNF-α、IL-6量第22页
   ·统计学处理第22-23页
3 结果第23-30页
   ·TGF-β1 的siRNA转染条件筛选结果第23-24页
     ·TGF-β1 相关引物最佳退火温度第23页
     ·TGF-β1 的siRNA最佳转染条件第23-24页
   ·PDGF-B的siRNA转染条件筛选结果第24-25页
     ·PDGF-B相关引物最佳退火温度第24页
     ·PDGF-B的siRNA转染最佳条件第24-25页
   ·TGF-β1 转染后对LPS介导其下游信号Smad3的影响第25-26页
     ·对细胞中Smad3 mRNA表达量的影响第25-26页
     ·对细胞Smad3蛋白表达量的影响第26页
   ·TGF-β1 转染后对LPS介导细胞分泌TNF-α、IL-6 量的影响第26-27页
   ·PDGF-B转染后对LPS介导其下游信号PI3K表达量的影响第27-28页
     ·对细胞中PI3K mRNA表达量的影响第27-28页
     ·对细胞分泌的PI3K蛋白量的影响第28页
   ·PDGF-B转染后对LPS介导细胞分泌TNF-α、IL-6 量的影响第28-30页
4 讨论第30-35页
   ·TGF-β1 在小鼠MECs TLR4通路中作用第30-32页
   ·PDGF-B在小鼠MECs TLR4通路中作用第32-35页
5 结论第35-36页
文献综述第36-49页
参考文献第49-62页
附录I第62-63页
附录II第63-64页
致谢第64-65页

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