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基于工具酶信号放大的核酸等温扩增检测新方法研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 综述第9-32页
   ·基于工具酶的核酸扩增检测技术第9-15页
     ·PCR技术第9-11页
       ·PCR衍生技术第11页
     ·等温核酸扩增检测技术第11-12页
     ·核酸的信号表征第12-15页
       ·凝胶电泳第13页
       ·SYBR Green I染料第13页
       ·Taqman探针第13-14页
       ·分子信标第14-15页
   ·基于microRNA检测的核酸信号放大技术第15-23页
     ·杂交技术用于miRNA检测第16页
     ·变温扩增技术用于miRNA检测第16-18页
     ·等温扩增技术用于miRNA检测第18-23页
       ·基于内切酶的信号放大第19-20页
       ·滚环扩增检测技术第20-21页
       ·指数扩增技术第21-22页
       ·靶标原位检测技术第22-23页
   ·基于双链DNA检测的核酸信号放大技术第23-30页
     ·PCR技术用于双链DNA检测第24页
     ·等温扩增技术用于双链DNA检测第24-30页
       ·LAMP扩增技术第24-26页
       ·RPA扩增技术第26-27页
       ·HDA扩增技术第27-28页
       ·HDA扩增技术单链靶标构建技术第28-29页
       ·SDA扩增技术第29-30页
   ·本论文的研究意义与主要内容第30-32页
第二章 用于miRNA检测的工具酶等温核酸扩增新方法研究第32-47页
   ·引言第32页
   ·实验部分第32-36页
     ·仪器与试剂第32-33页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第33-35页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理第33-34页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备第34-35页
     ·荧光信号检测表征第35-36页
   ·结果与讨论第36-46页
     ·实验原理第36页
     ·DNA条件优化第36-38页
       ·DNA序列设计第36-37页
       ·Probe分子序列优化第37-38页
       ·Probe分子的变性和复性第38页
     ·方案可行性验证第38-40页
     ·实验条件优化第40-43页
       ·酶的用量优化第41-42页
       ·引物浓度优化第42-43页
     ·靶标检测实验第43-46页
       ·灵敏度检测第43-44页
       ·特异性检测第44-45页
       ·复杂样品检测第45-46页
   ·小结第46-47页
第三章 用于双链DNA检测的等温核酸扩增新方法研究第47-65页
   ·引言第47页
   ·实验设计第47-52页
     ·实验设计方案一第48-49页
       ·实验原理第48页
       ·DNA序列设计第48-49页
     ·实验设计方案二第49-50页
       ·实验原理第49-50页
       ·DNA序列设计第50页
     ·实验设计方案三第50-52页
       ·实验原理第50-51页
       ·引物序列设计第51-52页
       ·引物序列优化选择第52页
   ·实验部分第52-56页
     ·仪器与试剂第52-53页
     ·DNA提取第53-54页
     ·实时荧光检测第54-56页
       ·信标分子检测第54-55页
       ·SYBR Green I检测原理第55页
       ·SYBR Green I 检测体系第55-56页
   ·结果与讨论第56-64页
     ·信标分子配比第56-57页
     ·实验方案验证第57-58页
       ·实验方案一验证第57-58页
       ·实验方案二验证第58页
     ·实验条件优化第58-61页
       ·缓冲溶液优化第58-60页
       ·反应温度优化第60页
       ·酶用量优化第60-61页
     ·灵敏度检测第61-62页
     ·背景问题论证第62-64页
   ·小结第64-65页
结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
附录:攻读硕士学位期间发表的论文目录第75-76页

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