| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-32页 |
| ·基于工具酶的核酸扩增检测技术 | 第9-15页 |
| ·PCR技术 | 第9-11页 |
| ·PCR衍生技术 | 第11页 |
| ·等温核酸扩增检测技术 | 第11-12页 |
| ·核酸的信号表征 | 第12-15页 |
| ·凝胶电泳 | 第13页 |
| ·SYBR Green I染料 | 第13页 |
| ·Taqman探针 | 第13-14页 |
| ·分子信标 | 第14-15页 |
| ·基于microRNA检测的核酸信号放大技术 | 第15-23页 |
| ·杂交技术用于miRNA检测 | 第16页 |
| ·变温扩增技术用于miRNA检测 | 第16-18页 |
| ·等温扩增技术用于miRNA检测 | 第18-23页 |
| ·基于内切酶的信号放大 | 第19-20页 |
| ·滚环扩增检测技术 | 第20-21页 |
| ·指数扩增技术 | 第21-22页 |
| ·靶标原位检测技术 | 第22-23页 |
| ·基于双链DNA检测的核酸信号放大技术 | 第23-30页 |
| ·PCR技术用于双链DNA检测 | 第24页 |
| ·等温扩增技术用于双链DNA检测 | 第24-30页 |
| ·LAMP扩增技术 | 第24-26页 |
| ·RPA扩增技术 | 第26-27页 |
| ·HDA扩增技术 | 第27-28页 |
| ·HDA扩增技术单链靶标构建技术 | 第28-29页 |
| ·SDA扩增技术 | 第29-30页 |
| ·本论文的研究意义与主要内容 | 第30-32页 |
| 第二章 用于miRNA检测的工具酶等温核酸扩增新方法研究 | 第32-47页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验部分 | 第32-36页 |
| ·仪器与试剂 | 第32-33页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 | 第33-34页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第34-35页 |
| ·荧光信号检测表征 | 第35-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-46页 |
| ·实验原理 | 第36页 |
| ·DNA条件优化 | 第36-38页 |
| ·DNA序列设计 | 第36-37页 |
| ·Probe分子序列优化 | 第37-38页 |
| ·Probe分子的变性和复性 | 第38页 |
| ·方案可行性验证 | 第38-40页 |
| ·实验条件优化 | 第40-43页 |
| ·酶的用量优化 | 第41-42页 |
| ·引物浓度优化 | 第42-43页 |
| ·靶标检测实验 | 第43-46页 |
| ·灵敏度检测 | 第43-44页 |
| ·特异性检测 | 第44-45页 |
| ·复杂样品检测 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三章 用于双链DNA检测的等温核酸扩增新方法研究 | 第47-65页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·实验设计 | 第47-52页 |
| ·实验设计方案一 | 第48-49页 |
| ·实验原理 | 第48页 |
| ·DNA序列设计 | 第48-49页 |
| ·实验设计方案二 | 第49-50页 |
| ·实验原理 | 第49-50页 |
| ·DNA序列设计 | 第50页 |
| ·实验设计方案三 | 第50-52页 |
| ·实验原理 | 第50-51页 |
| ·引物序列设计 | 第51-52页 |
| ·引物序列优化选择 | 第52页 |
| ·实验部分 | 第52-56页 |
| ·仪器与试剂 | 第52-53页 |
| ·DNA提取 | 第53-54页 |
| ·实时荧光检测 | 第54-56页 |
| ·信标分子检测 | 第54-55页 |
| ·SYBR Green I检测原理 | 第55页 |
| ·SYBR Green I 检测体系 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-64页 |
| ·信标分子配比 | 第56-57页 |
| ·实验方案验证 | 第57-58页 |
| ·实验方案一验证 | 第57-58页 |
| ·实验方案二验证 | 第58页 |
| ·实验条件优化 | 第58-61页 |
| ·缓冲溶液优化 | 第58-60页 |
| ·反应温度优化 | 第60页 |
| ·酶用量优化 | 第60-61页 |
| ·灵敏度检测 | 第61-62页 |
| ·背景问题论证 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录:攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第75-76页 |