摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 综述 | 第9-32页 |
·基于工具酶的核酸扩增检测技术 | 第9-15页 |
·PCR技术 | 第9-11页 |
·PCR衍生技术 | 第11页 |
·等温核酸扩增检测技术 | 第11-12页 |
·核酸的信号表征 | 第12-15页 |
·凝胶电泳 | 第13页 |
·SYBR Green I染料 | 第13页 |
·Taqman探针 | 第13-14页 |
·分子信标 | 第14-15页 |
·基于microRNA检测的核酸信号放大技术 | 第15-23页 |
·杂交技术用于miRNA检测 | 第16页 |
·变温扩增技术用于miRNA检测 | 第16-18页 |
·等温扩增技术用于miRNA检测 | 第18-23页 |
·基于内切酶的信号放大 | 第19-20页 |
·滚环扩增检测技术 | 第20-21页 |
·指数扩增技术 | 第21-22页 |
·靶标原位检测技术 | 第22-23页 |
·基于双链DNA检测的核酸信号放大技术 | 第23-30页 |
·PCR技术用于双链DNA检测 | 第24页 |
·等温扩增技术用于双链DNA检测 | 第24-30页 |
·LAMP扩增技术 | 第24-26页 |
·RPA扩增技术 | 第26-27页 |
·HDA扩增技术 | 第27-28页 |
·HDA扩增技术单链靶标构建技术 | 第28-29页 |
·SDA扩增技术 | 第29-30页 |
·本论文的研究意义与主要内容 | 第30-32页 |
第二章 用于miRNA检测的工具酶等温核酸扩增新方法研究 | 第32-47页 |
·引言 | 第32页 |
·实验部分 | 第32-36页 |
·仪器与试剂 | 第32-33页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-35页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理 | 第33-34页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第34-35页 |
·荧光信号检测表征 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-46页 |
·实验原理 | 第36页 |
·DNA条件优化 | 第36-38页 |
·DNA序列设计 | 第36-37页 |
·Probe分子序列优化 | 第37-38页 |
·Probe分子的变性和复性 | 第38页 |
·方案可行性验证 | 第38-40页 |
·实验条件优化 | 第40-43页 |
·酶的用量优化 | 第41-42页 |
·引物浓度优化 | 第42-43页 |
·靶标检测实验 | 第43-46页 |
·灵敏度检测 | 第43-44页 |
·特异性检测 | 第44-45页 |
·复杂样品检测 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第三章 用于双链DNA检测的等温核酸扩增新方法研究 | 第47-65页 |
·引言 | 第47页 |
·实验设计 | 第47-52页 |
·实验设计方案一 | 第48-49页 |
·实验原理 | 第48页 |
·DNA序列设计 | 第48-49页 |
·实验设计方案二 | 第49-50页 |
·实验原理 | 第49-50页 |
·DNA序列设计 | 第50页 |
·实验设计方案三 | 第50-52页 |
·实验原理 | 第50-51页 |
·引物序列设计 | 第51-52页 |
·引物序列优化选择 | 第52页 |
·实验部分 | 第52-56页 |
·仪器与试剂 | 第52-53页 |
·DNA提取 | 第53-54页 |
·实时荧光检测 | 第54-56页 |
·信标分子检测 | 第54-55页 |
·SYBR Green I检测原理 | 第55页 |
·SYBR Green I 检测体系 | 第55-56页 |
·结果与讨论 | 第56-64页 |
·信标分子配比 | 第56-57页 |
·实验方案验证 | 第57-58页 |
·实验方案一验证 | 第57-58页 |
·实验方案二验证 | 第58页 |
·实验条件优化 | 第58-61页 |
·缓冲溶液优化 | 第58-60页 |
·反应温度优化 | 第60页 |
·酶用量优化 | 第60-61页 |
·灵敏度检测 | 第61-62页 |
·背景问题论证 | 第62-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录:攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第75-76页 |