猪嗜血支原体SYBR Green qPCR检测方法的建立及应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| 前言 | 第6-16页 |
| 1 病原学特性 | 第6-9页 |
| ·分类及命名 | 第6-7页 |
| ·形态、染色、繁殖及培养特征 | 第7-8页 |
| ·理化特性 | 第8-9页 |
| 2 猪嗜血支原体的检测方法 | 第9-11页 |
| ·形态学检测 | 第9-10页 |
| ·压片镜检 | 第9页 |
| ·染色镜检 | 第9页 |
| ·电镜检测 | 第9-10页 |
| ·免疫学检测 | 第10页 |
| ·补体结合试验 | 第10页 |
| ·间接血凝抑制试验 | 第10页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第10页 |
| ·分子生物学检测 | 第10-11页 |
| ·DNA杂交试验 | 第10-11页 |
| ·PCR检测 | 第11页 |
| 3 流行病学 | 第11-12页 |
| 4 发病机理 | 第12-14页 |
| ·致红细胞病变 | 第12页 |
| ·冷凝集素的作用 | 第12页 |
| ·对血管和血液理化性质的影响 | 第12-13页 |
| ·免疫抑制 | 第13-14页 |
| 5 临床症状及病理变化 | 第14-15页 |
| ·临床症状 | 第14页 |
| ·病理变化 | 第14-15页 |
| 6 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 材料与方法 | 第16-22页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| ·猪只及病原体 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·试剂与耗材 | 第17页 |
| ·主要试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·QPCR扩增引物的设计及合成 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18页 |
| ·血液基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·目的基因的扩增 | 第19页 |
| ·目的基因的回收 | 第19页 |
| ·目的基因的克隆 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的提取 | 第20页 |
| ·重组质粒的鉴定及浓度测定 | 第20页 |
| ·QPCR方法的建立 | 第20-21页 |
| ·QPCR标准曲线的建立 | 第21页 |
| ·敏感性试验 | 第21页 |
| ·特异性试验 | 第21页 |
| ·重复性试验 | 第21页 |
| ·QPCR与常规PCR的比较 | 第21-22页 |
| 结果 | 第22-28页 |
| 1 常规PCR扩增及特异性试验结果 | 第22页 |
| 2 目的片段测序结果 | 第22-23页 |
| 3 重组质粒的构建 | 第23页 |
| 4 QPCR扩增动力学曲线、标准曲线及溶解曲线 | 第23-25页 |
| 5 QPCR敏感性试验 | 第25-26页 |
| 6 QPCR特异性试验 | 第26-27页 |
| 7 QPCR重复性试验 | 第27页 |
| 8 QPCR与常规PCR的比较 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-31页 |
| 1 M.SUIS检测方法的比较 | 第28-30页 |
| 2 SYBR GREEN QPCR检测 | 第30-31页 |
| 结论 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| Abstract | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39页 |
