摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-28页 |
前言 | 第28-30页 |
第一部分 高糖及1,25(OH)2D3对雪旺细胞神经生长因子分泌水平的影响 | 第30-44页 |
第一节 材料与方法 | 第30-37页 |
·材料 | 第30-33页 |
·方法 | 第33-37页 |
第二节 实验结果 | 第37-40页 |
·高糖对雪旺细胞神经生长因子分泌水平的影响 | 第37-38页 |
·1,25(OH)_2D_3对雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第38-39页 |
·高糖对1,25(OH)_2D_3作用的雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第39-40页 |
第三节 讨论 | 第40-43页 |
第四节 结论 | 第43-44页 |
第二部分 1,25(OH)_2D_3合成代谢酶基因在雪旺细胞上的表达及高糖对其的影响 | 第44-66页 |
第一节 材料和方法 | 第44-53页 |
·主要试剂,仪器及试剂配制 | 第44-48页 |
·方法 | 第48-53页 |
第二节 实验结果 | 第53-62页 |
·CYP24A1A1,CYP27A1及CYP27B1基因引物信息 | 第53-54页 |
·大鼠雪旺细胞RSC96存在CYP27A1、CYP27B1、CYP24A1基因表达 | 第54-55页 |
·1,25(OH)_2D_3对CYP27A1,CYP27B1,CYP24A1基因表达的影响: | 第55-56页 |
·高糖对CYP27A1,CYP27B1,CYP24A1基因和蛋白表达的影响 | 第56-59页 |
·过氧化氢对雪旺细胞CYP24A1基因及蛋白的影响 | 第59-62页 |
第三节 讨论 | 第62-65页 |
第四节 结论 | 第65-66页 |
第三部分 CYP24A1抑制剂对高糖培养下1,25(OH)_2D_3介导的雪旺细胞神经生长因子分泌能力的影响 | 第66-74页 |
第一节 材料和方法 | 第66-69页 |
·试剂仪器与试剂配制 | 第66-69页 |
·方法 | 第69页 |
第二节 实验结果 | 第69-72页 |
·CYP24A1抑制剂genistein对高糖培养的雪旺细胞的CYP24A1蛋白的影响 | 第69-71页 |
·Genistein对高糖作用下雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第71-72页 |
第三节 讨论 | 第72-73页 |
第四节 结论 | 第73-74页 |
第四部分 慢病毒介导shRNA沉默CYP24A1基因雪旺细胞模型的构建 | 第74-95页 |
第一节 材料和方法 | 第75-87页 |
·细胞,菌株 | 第75页 |
·试剂仪器与试剂配制 | 第75-78页 |
·方法 | 第78-87页 |
第二节 实验结果 | 第87-93页 |
·质粒转染筛选有效载体 | 第87-90页 |
·慢病毒包装 | 第90-91页 |
·CYP24A1基因沉默雪旺细胞模型构建 | 第91-93页 |
第三节 讨论 | 第93-94页 |
第四节 结论 | 第94-95页 |
第五部分 慢病毒介导RNA干扰沉默CYP24A1基因对高糖培养下1,25(OH)_2D_3介导雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第95-105页 |
第一节 材料和方法 | 第95-98页 |
·试剂仪器与试剂配制 | 第95-97页 |
·方法 | 第97-98页 |
第二节 实验结果 | 第98-102页 |
·CYP24A1基因沉默对雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第98-100页 |
·CYP24A1基因沉默对1,25(OH)2D3介导雪旺细胞神经生长因子分泌的影响 | 第100-101页 |
·CYP24A1基因沉默对高糖作用下1,25(OH)_2D_3介导的雪旺细胞神经生长因子分泌水平的影响 | 第101-102页 |
第三节 讨论 | 第102-104页 |
第四节 结论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-115页 |
全文小结 | 第115-116页 |
中英文缩略词表 | 第116-117页 |
攻读学位期间成果 | 第117-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
统计学审稿证明 | 第120页 |