| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-19页 |
| ·植物生物反应器的研究进展 | 第9-12页 |
| ·利用植物生产的重组蛋白种类 | 第9-10页 |
| ·植物生物反应器的表达系统 | 第10-12页 |
| ·番茄研究进展 | 第12-13页 |
| ·番茄组织再生的研究进展 | 第12-13页 |
| ·番茄作为生物反应器的研究进展 | 第13页 |
| ·凝乳酶研究进展 | 第13-17页 |
| ·凝乳酶的凝乳机理 | 第14页 |
| ·凝乳酶的来源 | 第14-16页 |
| ·重组凝乳酶的研究进展 | 第16-17页 |
| ·本研究的内容及意义 | 第17-19页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| ·研究意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·分子生物学检测所用引物 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-34页 |
| ·凝乳酶原基因的 PCR 扩增 | 第21页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第21-22页 |
| ·PCR 产物与载体的酶切、连接 | 第22页 |
| ·菌斑 PCR 鉴定 | 第22-23页 |
| ·质粒提取与酶切鉴定 | 第23-24页 |
| ·测序和序列比对 | 第24页 |
| ·菌液保存 | 第24页 |
| ·诱导表达条件摸索 | 第24-25页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第25页 |
| ·目的蛋白的鉴定及保存 | 第25页 |
| ·番茄无菌苗和外植体的获得 | 第25-26页 |
| ·诱导愈伤组织形成和不定芽培养基激素浓度配比 | 第26页 |
| ·不定芽生根培养和培养基激素浓度配比 | 第26页 |
| ·草丁膦浓度的确定 | 第26页 |
| ·农杆菌介导的叶盘法转化番茄 | 第26-28页 |
| ·转基因番茄植株获得 | 第28-29页 |
| ·bar 基因表达蛋白的试纸条检测 | 第29页 |
| ·CYM 基因和 bar 基因的 RT-PCR 检测 | 第29-31页 |
| ·Southern 杂交 | 第31-33页 |
| ·重组牛凝乳酶的提取及活性验证 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-45页 |
| ·凝乳酶原基因的原核表达 | 第34-36页 |
| ·载体构建 | 第34页 |
| ·目的蛋白原核表达及目的蛋白纯化结果 | 第34-36页 |
| ·番茄叶片高频再生体系的建立和优化 | 第36-39页 |
| ·种子前处理和消毒时间对发芽率的影响 | 第36页 |
| ·番茄基因型对再生的影响 | 第36页 |
| ·激素浓度配比对叶片再生的影响 | 第36-38页 |
| ·激素对生根的影响 | 第38-39页 |
| ·番茄转牛前凝乳酶原基因的遗传转化 | 第39-45页 |
| ·草丁膦的抗性筛选浓度确定 | 第39-40页 |
| ·抗性番茄再生植株的获得 | 第40-41页 |
| ·抗性番茄再生植株 PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·转基因番茄植株 bar 基因试纸条检测 | 第42-43页 |
| ·转基因番茄植株 bar 基因和 CYM 基因 RT-PCR 检测 | 第43-44页 |
| ·Southern 杂交结果 | 第44页 |
| ·重组凝乳酶活性鉴定结果 | 第44-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-48页 |
| ·番茄叶片高频再生体系的建立和优化 | 第45-46页 |
| ·种子前处理和消毒时间对发芽率的影响 | 第45页 |
| ·激素浓度配比对叶片再生的影响 | 第45-46页 |
| ·激素对生根的影响 | 第46页 |
| ·番茄转牛前凝乳酶原基因的遗传转化 | 第46-48页 |
| ·草丁磷的抗性筛选浓度对遗传转化的影响 | 第46页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第46页 |
| ·重组凝乳酶的表达 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |