| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 RAAV介导CTLA4IG基因转染新生猪胰岛的体外研究 | 第14-31页 |
| 1. 材料与方法 | 第14-22页 |
| ·5种rAAV | 第14页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·试剂、材料及设备 | 第14-15页 |
| ·新生猪胰岛的获得 | 第15页 |
| ·五种GFP-rAAV转染新生猪胰岛比较实验 | 第15页 |
| ·转染新生猪胰岛的形态、功能检测 | 第15-16页 |
| ·rAAV2-CTLA4Ig转染新生猪胰岛的RT-PCR检测 | 第16-18页 |
| ·转染培养6天的新生猪胰岛细胞免疫组化染色 | 第18-19页 |
| ·转染胰岛WESTEN-BLOT检测 | 第19-20页 |
| ·人单个核细胞与转染胰岛共培养后细胞因子检测 | 第20-21页 |
| ·统计方法 | 第21-22页 |
| 2. 结果 | 第22-27页 |
| ·五种rAAV-GFP转染新生猪胰岛效率比较 | 第22页 |
| ·转染后胰岛形态观察 | 第22-23页 |
| ·转染后胰岛活性检测 | 第23页 |
| ·转染后胰岛功能检测 | 第23页 |
| ·转染新生猪胰岛RT-PCR检测结果 | 第23-24页 |
| ·转染新生猪胰岛与未转染胰岛免疫组化染色比较 | 第24页 |
| ·转染新生猪胰岛WESTEN BLOT结果 | 第24-25页 |
| ·单个核细胞与胰岛共孵育后细胞因子浓度检测结果 | 第25-27页 |
| 3. 讨论 | 第27-31页 |
| 第二章 脱离培养箱的新生猪胰岛短期储存研究 | 第31-40页 |
| 1. 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·病毒rAAV2-CTLA4Ig | 第31页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·试剂、材料及设备 | 第31-32页 |
| ·新生猪胰岛细胞的分离和培养 | 第32页 |
| ·自制胰岛细胞保存运输装置 | 第32-33页 |
| ·不同储存时间胰岛形态观察 | 第33页 |
| ·不同储存时间胰岛活性检测 | 第33页 |
| ·不同储存时间储存胰岛功能检测 | 第33页 |
| ·应用流式细胞仪检测胰岛随储运时间延长凋亡情况 | 第33-35页 |
| 2. 结果 | 第35-38页 |
| ·保温箱内温度变化 | 第35页 |
| ·不同储存时间胰岛形态观察 | 第35-36页 |
| ·不同储存时间胰岛活性检测 | 第36-37页 |
| ·不同储存时间储存胰岛功能检测 | 第37页 |
| ·流式细胞仪检测胰岛凋亡情况 | 第37-38页 |
| 3. 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 RAAV2介导转CTLA4IG基因猪胰岛经门静脉肝内移植治疗糖尿病猴研究 | 第40-64页 |
| 1. 材料与方法 | 第40-48页 |
| ·实验试剂与设备 | 第40-41页 |
| ·移植动物(恒河猴) | 第41-42页 |
| ·糖尿病恒河猴移植分组 | 第42页 |
| ·转染CTLA4Ig基因新生猪胰岛的获得及储运 | 第42-44页 |
| ·糖尿病恒河猴胰岛移植 | 第44页 |
| ·移植后免疫抑制剂方案 | 第44-45页 |
| ·糖尿病模型恒河猴胰岛移植前后指标检测 | 第45-47页 |
| ·统计方法 | 第47-48页 |
| 2. 结果 | 第48-58页 |
| ·移植前转染新生猪胰岛检测 | 第48-50页 |
| ·糖尿病恒河猴胰岛移植移植手术方法 | 第50页 |
| ·各组动物移植前后各种指标检测 | 第50-58页 |
| 3. 讨论 | 第58-64页 |
| 第四章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 综述 | 第69-92页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第93页 |
