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肥大细胞对布鲁菌模式识别与应答效应的体外研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
英文缩略词表第15-17页
第1章 综述第17-31页
 1 肥大细胞上 TLRs 的表达和作用第17-19页
 2 肥大细胞和病原菌的相互作用第19-22页
   ·肥大细胞能直接识别病原微生物或其产物第19-20页
   ·活化后的肥大细胞可通过释放生物活性分子调节免疫功能第20-22页
   ·肥大细胞可通过吞噬与非吞噬途径杀死病原菌第22页
   ·肥大细胞抗原提呈作用第22页
 3 肥大细胞在抗感染中的病理作用第22-23页
 4 总结第23-25页
 参考文献第25-31页
第2章 实验研究第31-72页
 实验一 布鲁菌感染对肥大细胞的活化作用第31-46页
  1 前言第31页
  2 材料和仪器第31-34页
   ·细胞株第31页
   ·菌株第31页
   ·主要仪器第31-32页
   ·主要药品及试剂第32-33页
   ·主要试剂配制第33-34页
  3 实验方法第34-35页
   ·S_2菌株、WboA-S_2菌株和大肠杆菌的培养和计数第34页
   ·肥大细胞的培养与传代第34页
   ·肥大细胞感染布鲁菌 S2菌株、WboA-S2菌株和大肠杆菌第34页
   ·上清中 LT、IL-6、IL-1β的检测第34-35页
   ·上清中组胺、类胰蛋白酶、TNF-α、IL-12、IFN-Γ的检测第35页
  4 统计数据处理第35-36页
  5 结果第36-41页
   ·布鲁菌 S_2菌株、WboA-S_2菌株和大肠杆菌感染对肥大细胞释放生物活性介质的影响第36-41页
  6 讨论第41-42页
  7 结论第42-44页
  参考文献第44-46页
 实验二 肥大细胞对布鲁菌的模式识别机制第46-56页
  1 前言第46页
  2 材料和仪器第46-47页
   ·细胞株第46页
   ·菌株第46页
   ·主要仪器第46页
   ·主要药品及试剂第46-47页
   ·主要试剂配制第47页
  3 实验方法第47-49页
   ·RT-PCR 检测肥大细胞 TLR2、4、8、9 mRNA 的表达第47-48页
   ·DEPC 水处理实验器械方法第48页
   ·布鲁菌S_2菌株、WbOA-S_2菌株和大肠杆菌感染对肥大细胞TLR4、8、9 mRNA表达的影响第48-49页
  4 统计数据处理第49页
  5 结果第49-52页
   ·正常肥大细胞 TLR2、4、8、9 mRNA 的表达第49页
   ·布鲁菌 S_2菌株、WboA-S_2菌株和大肠杆菌感染对肥大细胞 TLR4、8、9 mRNA 表达的影响第49-52页
  6 讨论第52-53页
  7 结论第53-54页
  参考文献第54-56页
 实验三 TLR4 基因的沉默对肥大细胞活化的影响第56-72页
  1 前言第56页
  2 材料和仪器第56-57页
   ·细胞株第56页
   ·菌株第56页
   ·主要仪器第56页
   ·主要药品及试剂第56页
   ·主要试剂配制第56-57页
  3 实验方法第57页
   ·TLR4 siRNA 沉默 TLR4 表达条件的优化第57页
   ·流式细胞术检测肥大细胞 TLR4 沉默前后蛋白的表达第57页
  4 统计数据处理第57页
  5 结果第57-69页
   ·确定并优化 TLR4 siRNA 沉默 TLR4 mRNA 和蛋白表达的条件第57-62页
   ·布鲁菌 S_2菌株、WboA-S_2菌株和大肠杆菌感染对沉默 TLR4 后的肥大细胞TLR4 mRNA 表达的影响第62-64页
   ·布鲁菌 S_2菌株、WboA-S_2菌株和大肠杆菌感染对沉默 TLR4 后的肥大细胞释放 IL-6 、 TNF- 、 LT 、组胺的影响第64-69页
  6 讨论第69-70页
  7 结论第70-71页
  参考文献第71-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间取得的科研成果第73页

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