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虾虎鱼和黄颡鱼CPT Ⅰ的克隆、表达、动力学性质及对锌的响应研究

目录第1-8页
摘要第8-12页
Abstract第12-17页
縮略词表第17-18页
第一章 文献综述第18-38页
 1 CPT I的研究进展第18-33页
   ·CPT I基因的分子特征第19-23页
     ·多重的CPT I构型第19-21页
     ·多重CPT I构型产生的原因第21-23页
   ·CPT I基因的蛋白特征第23-26页
     ·CPT I蛋白的膜拓扑结构第23-24页
     ·CPT I的功能域和功能氨基酸第24-26页
   ·CPT I的酶促反应动力学第26-30页
     ·动力学参数的求取第26-27页
     ·酶动力学的影响因素第27-28页
     ·CPT I的酶动力学性质第28-30页
   ·CPT I的调节第30-33页
     ·依赖M-CoA的调节第30-31页
     ·不依赖M-CoA的调节第31-32页
     ·脂肪对CPT I的调节第32-33页
 2 锌对脂代谢调节的研究进展第33-35页
   ·饲料锌对脂代谢的调节第33-35页
   ·水体锌暴露对鱼类脂代谢的影响第35页
 3 本研究的目的和意义第35-38页
第二章 虾虎鱼CPT I cDNA的分子克隆及动力学性质分析第38-60页
 1 前言第38-39页
 2 材料与方法第39-46页
   ·实验材料第39-40页
     ·实验鱼第39页
     ·实验试剂第39-40页
   ·CPT I全长cDNA的克隆第40-44页
     ·引物设计和扩增策略第40-43页
     ·总RNA的提取、cDNA的合成和PCR第43-44页
     ·序列分析第44页
   ·CPTI的动力学性质第44-45页
     ·CoASH的标准曲线第44页
     ·线粒体的分离及其完整性评价第44-45页
     ·反应条件对CPTI酶活的影响第45页
     ·动力学参数的求取第45页
   ·数据统计分析第45-46页
 3 结果与分析第46-56页
   ·CPTI的序列和结构第46-49页
   ·CPTI的进化和一致性分析第49页
   ·CPTI的动力学性质第49-56页
 4 讨论第56-60页
第三章 黄颡鱼CPT I cDNA的分子克隆及表达第60-75页
 1 前言第60页
 2 材料与方法第60-64页
   ·实验材料第60-62页
   ·CPTI全长cDNA的克隆第62-63页
     ·引物设计和扩增策略第62页
     ·总RNA的提取、cDNA的合成和PCR第62页
     ·全长cDNA的扩增第62-63页
     ·序列分析第63页
   ·组织和发育表达第63-64页
   ·数据统计分析第64页
 3 结果与分析第64-72页
   ·CPTI的序列和结构第64-65页
   ·CPTI的进化分析第65-66页
   ·CPTI的组织和发育表达第66-72页
 4 讨论第72-75页
第四章 黄颡鱼CPTI的动力学性质研究第75-81页
 1 前言第75-76页
 2 材料与方法第76-77页
   ·实验材料第76页
     ·实验动物第76页
     ·实验试剂及配制第76页
   ·CoASH的标准曲线的制作第76页
   ·线粒体的分离及其完整性评价第76页
   ·反应条件对CPTI酶活性的影响第76页
   ·动力学参数的求取第76-77页
   ·数据统计分析第77页
 3 结果与分析第77-79页
 4 讨论第79-81页
第五章 水体慢性和急性锌暴露对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响第81-94页
 1 前言第81-82页
 2 材料与方法第82-85页
   ·慢性锌暴露第82-83页
   ·急性锌暴露第83页
   ·取样第83页
   ·脂肪和锌含量的测定第83-84页
   ·组织肉碱含量的测定第84页
   ·组织CPT I酶活的测定第84页
   ·组织CPT I动力学性质的测定第84页
   ·组织CPT I mRNA的表达水平第84-85页
   ·数据统计分析第85页
 3 结果与分析第85-91页
   ·水体锌暴露对生长、脂肪含量和锌的富集的影响第85页
   ·水体锌暴露对CPT I动力学性质的影响第85页
   ·水体锌暴露对肉碱组成的影响第85-86页
   ·锌暴露对CPT I表达的影响第86页
   ·相关性分析第86-91页
 4 讨论第91-94页
第六章 饲料锌缺乏和过量对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响第94-106页
 1 前言第94-95页
 2 材料与方法第95-97页
   ·实验饲料第95页
   ·实验设计第95-96页
   ·取样第96页
   ·脂肪和锌含量的测定第96页
   ·组织肉碱含量的测定第96页
   ·组织CPT I的酶活测定第96页
   ·组织CPT I动力学性质的测定第96页
   ·组织CPT I mRNA的表达水平第96页
   ·数据统计分析第96-97页
 3 结果与分析第97-102页
   ·饲料锌对生长、脂肪含量和锌的富集的影响第97页
   ·饲料锌对CPT I动力学性质的影响第97-98页
   ·饲料锌对肉碱组成的影响第98-99页
   ·饲料锌对CPT I表达的影响第99页
   ·相关性分析第99-102页
 4 讨论第102-106页
全文总结第106-108页
参考文献第108-123页
附录第123-125页
致谢第125-126页

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