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金黄色葡萄球菌生物被膜和纤维蛋白原结合能力研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 绪论第12-42页
   ·金黄色葡萄球菌概述第12-13页
     ·引言第12-13页
     ·金黄色葡萄球菌一般生理特征第13页
   ·金黄色葡萄球菌的模式株第13-16页
     ·引言第13-14页
     ·NCTC8325家族谱第14-16页
   ·金黄色葡萄球菌健康人群分布第16-22页
     ·引言第16-17页
     ·金黄色葡萄球菌在鼻腔中的分布第17页
     ·金黄色葡萄球菌在鼻腔中寄居的细菌和宿主的关键因子第17-19页
     ·金黄色葡萄球菌在鼻腔中寄居的动物模型第19-22页
   ·金黄色葡萄球菌毒力因子第22-26页
     ·引言第22-23页
     ·金黄色葡萄球菌败血症第23页
     ·金黄色葡萄球菌败血症中的毒性蛋白功能第23-26页
   ·金黄色葡球菌生物被膜第26-32页
     ·引言第26页
     ·生物被膜的形成阶段第26-28页
     ·金黄色葡萄球菌生物被膜主要成分的鉴定方法第28-29页
     ·PIA的合成第29-30页
     ·生物被膜抗药性第30-32页
     ·生物被膜抵抗免疫防御第32页
   ·金黄色葡萄球菌的全局调控因子第32-35页
     ·引言第32页
     ·Agr/RNAⅢ系统第32-35页
   ·金黄色葡萄球菌的耐药性和新抗生素研发第35-42页
     ·前言第35页
     ·金黄色葡萄球菌的耐药性第35-36页
     ·耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)第36-37页
     ·耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA)第37-38页
     ·新抗生素研发的状况和策略第38-42页
第二章 GbaAB影响PIA依耐型的生物被膜形成第42-80页
   ·引言第42-43页
   ·实验材料第43-49页
     ·实验菌株、质粒和引物第43-47页
     ·实验所用试剂第47-48页
     ·培养基第48-49页
     ·主要仪器及材料第49页
   ·实验方法第49-58页
     ·大肠杆菌化转感受态的制备和转化第49-50页
     ·金黄色葡萄球菌感受态制备和转化第50-51页
     ·敲除菌、回补菌和表达菌构建第51-53页
     ·凝胶阻滞实验第53-54页
     ·RNA抽提、cDNA合成、real-time RT-PCR和基因芯片第54-55页
     ·生物被膜的形成第55-56页
     ·在聚苯乙烯材料上的初始粘附分析第56-57页
     ·生长曲线测定第57页
     ·金黄色葡萄球菌生物被膜主要成分的鉴定第57-58页
   ·结果分析第58-64页
     ·GbaA通过直接结合自身的启动子区域来抑制gbaAB的转录第58-60页
     ·GbaA通过抑制gbaB的表达来抑制生物被膜的形成,而gbaB是生物被膜形成过程中的促生物被膜基因第60-62页
     ·GbaAB调节ica操纵子的表达第62-63页
     ·gbaAB操纵子参与葡萄糖诱导的生物被膜形成的调控第63-64页
     ·在流动相中gbaA的失活导致在生物被膜形成能力增强,而gbaB突变导致减弱第64页
   ·结果讨论第64-80页
第三章 Rot和Agr系统主要通过ClfB来调控与纤维蛋白原的结合能力第80-98页
   ·引言第80-82页
   ·实验材料第82-84页
     ·实验菌株和质粒第82-84页
   ·实验方法第84-88页
     ·细菌与固定化的纤维蛋白原结合检测第84页
     ·Rot蛋白的表达和纯化第84-85页
     ·凝胶阻滞实验第85-86页
     ·RNA抽提第86页
     ·cDNA合成和real-time RT-PCR第86-87页
     ·敲除菌、回补菌和表达菌构建第87-88页
   ·实验结果第88-96页
     ·当细菌培养到不同的生长阶段时,Rot和Agr系统对细菌和人纤维蛋白原的结合能力的影响第88-90页
     ·Rot和Agr系统对clfA表达无显著影响第90-91页
     ·Rot是clfB的激活子,且Agr/RNAⅢ通过Rot调节clfB表达第91-93页
     ·Rot和Agr系统对其他纤维蛋白原结合蛋白基因表达的调节作用第93-96页
   ·实验讨论第96-98页
参考文献第98-115页
致谢第115-116页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第116页

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