| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 缩略词表 | 第11-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-35页 |
| ·问题的提出 | 第17-18页 |
| ·柑橘溃疡病研究进展 | 第18-27页 |
| ·柑橘溃疡病菌菌系的分类与命名 | 第18-21页 |
| ·柑橘溃疡病的分布 | 第21-22页 |
| ·柑橘溃疡病的发生、危害和传播 | 第22-24页 |
| ·柑橘溃疡病发病的温光条件 | 第22页 |
| ·柑橘溃疡病的危害和传播 | 第22-24页 |
| ·柑橘溃疡病菌的分离和鉴定 | 第24-25页 |
| ·柑橘溃疡病的防治 | 第25页 |
| ·柑橘品种的感病性评价 | 第25-26页 |
| ·植物形态结构与感病性的关系 | 第26-27页 |
| ·GFP在监测细菌病原菌入侵寄主中的应用 | 第27-30页 |
| ·GFP的理化性质和荧光原理 | 第28页 |
| ·GFP在病原菌入侵寄主过程中的示踪作用 | 第28-30页 |
| ·柑橘溃疡病菌致病因子的研究进展 | 第30-33页 |
| ·溃疡病菌致病基因的克隆鉴定 | 第30-31页 |
| ·GntR家族转录因子的结构和调控特征 | 第31-32页 |
| ·GntR家族转录因子的主要功能 | 第32-33页 |
| ·本研究目的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 溃疡病菌的分离及其生物学特征分析 | 第35-51页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料和方法 | 第35-40页 |
| ·病斑的选择及病菌的洗脱分离 | 第35-36页 |
| ·分离菌的培养 | 第36页 |
| ·PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·分离菌株的致病性鉴定 | 第37-38页 |
| ·Xac 16S rRNA检测 | 第38页 |
| ·16 sRNA基因的PCR扩增 | 第38页 |
| ·16 srRNA基因的克隆测序 | 第38页 |
| ·分离菌株生理生化特性的测定 | 第38页 |
| ·分离菌株生长曲线的绘制 | 第38-39页 |
| ·分离菌株不同培养时间致病力分析 | 第39页 |
| ·不同浓度的分离菌株的致病力分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·病原菌的分离 | 第40-41页 |
| ·分离菌株的PCR分析和致病力鉴定 | 第41-42页 |
| ·生理生化指标分析 | 第42-43页 |
| ·16S rRNA分析 | 第43-45页 |
| ·溃疡病菌生长动力学分析 | 第45页 |
| ·病原菌生长期与致病性关系 | 第45-47页 |
| ·不同溃疡病菌的接种浓度对冰糖橙溃疡病发生的影响 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 寄主感病性影响因素的分析 | 第51-68页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料和方法 | 第51-55页 |
| ·柑橘种类品种的感病性评价 | 第51-52页 |
| ·冰糖橙叶片发育阶段与感病性的关系 | 第52-53页 |
| ·气孔器特征与感病性关系 | 第53-54页 |
| ·气孔密度观察 | 第53页 |
| ·气孔形态观察 | 第53页 |
| ·气孔开度观察 | 第53-54页 |
| ·叶片组织结构与感病性关系 | 第54页 |
| ·叶片组织结构观察 | 第54页 |
| ·叶片蜡质含量的测定 | 第54页 |
| ·接种溃疡病菌后寄主叶面的扫描电镜观察 | 第54页 |
| ·环境因素与感病性的关系 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-66页 |
| ·寄主品种的感病性评价 | 第55-56页 |
| ·冰糖橙新叶不同发育阶段的感病性观察 | 第56-58页 |
| ·气孔器特征与感病性的关系 | 第58-60页 |
| ·不同环境条件下气孔的开闭 | 第60-61页 |
| ·叶片组织结构与感病性的关系 | 第61-62页 |
| ·接种后冰糖橙与枸橼的电镜观察 | 第62-64页 |
| ·环境因子对溃疡病发生的影响 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 利用EGFP标记溃疡病菌观察侵染过程 | 第68-91页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料方法 | 第68-75页 |
| ·EGFP质粒和工程菌 | 第68-69页 |
| ·质粒的纯化与鉴定 | 第69-72页 |
| ·质粒提取 | 第69页 |
| ·质粒中基因的酶切鉴定 | 第69-70页 |
| ·egfp基因的克隆测序 | 第70-72页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病菌 | 第72-74页 |
| ·三亲本杂交 | 第72-73页 |
| ·转化子的筛选和PCR鉴定 | 第73页 |
| ·EGFP标记溃疡病菌的致病性鉴定 | 第73页 |
| ·转化溃疡病菌的生长动力学分析及在寄主体内生长 | 第73-74页 |
| ·EGFP标记溃疡病菌示踪侵染寄主的过程 | 第74-75页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病菌观察柑橘品种的感病性 | 第74页 |
| ·溃疡病菌在叶面生长观察 | 第74页 |
| ·柑橘溃疡病菌在叶肉间隙生长观察 | 第74页 |
| ·利用EGFP标记菌观察菌液浓度和叶片创伤对病原侵染力的影响 | 第74-75页 |
| ·结果和分析 | 第75-89页 |
| ·菌种活化及鉴定 | 第75-76页 |
| ·转化子的筛选及其PCR鉴定 | 第76-79页 |
| ·EGFP标记溃疡病菌的生长动力学分析和致病性鉴定 | 第79-81页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病菌观察不同柑橘种类品种的感病性 | 第81-84页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病观察其在柑橘叶面的生长情况 | 第84-86页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病观察其在柑橘叶肉间隙的生长情况 | 第86-88页 |
| ·利用EGFP标记溃疡病菌观察侵染过程 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| 第五章 柑橘溃疡病菌GNTR家族转录因子的生物信息学分析 | 第91-104页 |
| ·引言 | 第91页 |
| ·材料和方法 | 第91-93页 |
| ·GntR家族转录因子基因的查询和分类 | 第91页 |
| ·多序列比对和进化树构建 | 第91-92页 |
| ·二级结构预测 | 第92页 |
| ·同源建模和模型评估 | 第92页 |
| ·结合位点预测 | 第92页 |
| ·Reciprocal BLAST | 第92-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-103页 |
| ·Xac GntR转录调节因子一级结构分析 | 第93-94页 |
| ·Xac GntR转录调节因子二级结构分析 | 第94-97页 |
| ·Xac GntR转录调节因子空间结构预测 | 第97-102页 |
| ·黄单胞杆菌属中的直向同源基因的预测 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| 第六章 GNTR1_(XAC)基因的致病功能鉴定 | 第104-113页 |
| ·引言 | 第104页 |
| ·材料和方法 | 第104-107页 |
| ·质粒、菌株和引物设计 | 第104-106页 |
| ·制备大肠杆菌S17-1化学转化感受态细胞 | 第106-107页 |
| ·大肠杆菌S17-1感受态细胞的化学转化 | 第107页 |
| ·gntR1_(Xac)基因敲除突变菌株的致病性鉴定 | 第107页 |
| ·结果与分析 | 第107-112页 |
| ·gntR1_(Xac)生物信息学分析 | 第107-108页 |
| ·gntR1_(Xac)基因敲除载体的构建 | 第108-109页 |
| ·gntR1Xac基因的无痕敲除 | 第109-110页 |
| ·敲除gntR1_(Xac)基因后的PCR检测 | 第110-111页 |
| ·gntR1_(Xac)基因突变菌株的致病性鉴定 | 第111-112页 |
| ·讨论 | 第112-113页 |
| 全文结论 | 第113-115页 |
| 论文创新点 | 第115-116页 |
| 下一步工作设想 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-128页 |
| 附录 | 第128-131页 |
| 附录A 质粒pMP2463构建图 | 第128-129页 |
| 附录B 提交到GenBank的Xac DL509的16S rRNA序列 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 作者简介 | 第132-133页 |
