| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-23页 |
| ·小鹅瘟(GPV)概述 | 第10-16页 |
| ·病毒分类 | 第10页 |
| ·病毒结构特征 | 第10-11页 |
| ·GPV的分类新地位 | 第11-12页 |
| ·GPV形态、理化特性和抵抗力 | 第12页 |
| ·GPV的血凝特性 | 第12页 |
| ·GPV的血清型 | 第12页 |
| ·GPV的宿主和培养 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13页 |
| ·临床症状 | 第13-14页 |
| ·病理变化 | 第14页 |
| ·防制 | 第14-16页 |
| ·小鹅瘟的免疫及治疗 | 第16页 |
| ·小鹅瘟的疫苗免疫 | 第16页 |
| ·小鹅瘟特异性治疗 | 第16页 |
| ·小鹅瘟实验室诊断技术 | 第16-20页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第16-17页 |
| ·血清学方法 | 第17-19页 |
| ·琼脂扩散试验(APG) | 第17页 |
| ·对流免疫电泳法 | 第17页 |
| ·精子凝集试验 | 第17-18页 |
| ·反向间接血凝试验 | 第18页 |
| ·病毒中和试验(VN) | 第18页 |
| ·免疫荧光诊断法 | 第18-19页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19页 |
| ·分子生物学方法 | 第19-20页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第19页 |
| ·核酸探针法 | 第19-20页 |
| ·单克隆抗体研究进展 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第23页 |
| ·酶和相关试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·溶液系统 | 第23-26页 |
| ·方法 | 第26-39页 |
| ·GPV的增殖与纯化 | 第26页 |
| ·GPV的增殖 | 第26页 |
| ·GPV的纯化 | 第26页 |
| ·GPV的分子鉴定 | 第26-30页 |
| ·GPV总DNA提取 | 第26-27页 |
| ·GPV目的片段的扩增 | 第27页 |
| ·电泳检测 | 第27页 |
| ·目的核苷酸克隆测序 | 第27-30页 |
| ·小鹅瘟单克隆抗体的制备及鉴定 | 第30-39页 |
| ·Balb/c小鼠的免疫 | 第30-31页 |
| ·单抗制备筛选方法的建立 | 第31-34页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的培养 | 第34页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第34页 |
| ·细胞融合及培养 | 第34-35页 |
| ·筛选 | 第35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第36页 |
| ·腹水的制备 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·鹅胚增殖GPV后结果 | 第39页 |
| ·GPV纯化结果 | 第39页 |
| ·目的基因片段VP3扩增、克隆及鉴定 | 第39-40页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·Balb/c小鼠的免疫及SP2/0骨髓瘤细胞的培养结果 | 第41页 |
| ·融合筛选结果 | 第41页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆结果 | 第41页 |
| ·单克隆抗体鉴定结果 | 第41-43页 |
| ·杂交瘤细胞的稳定性 | 第41-42页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第42页 |
| ·腹水的效价 | 第42页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第42页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第42-43页 |
| ·单抗的纯化与鉴定 | 第43页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| ·单抗效价的测定 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·小鼠的免疫 | 第43-44页 |
| ·建立筛选方法 | 第44页 |
| ·细胞融合 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第45-46页 |
| ·腹水的制备 | 第46页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 6 参考文献 | 第47-53页 |