| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 英文缩略词表(Abbreviations) | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·拟南芥的生物学特征 | 第12页 |
| ·形态学描述 | 第12页 |
| ·种植特点 | 第12页 |
| ·拟南芥的遗传学特性 | 第12-14页 |
| ·普通遗传学特性 | 第12-13页 |
| ·分子遗传学特性 | 第13-14页 |
| ·拟南芥在植物抗逆机理中的研究 | 第14-19页 |
| ·植物抗逆机理的研究 | 第14-15页 |
| ·拟南芥在植物ABA信号传导中的应用研究 | 第15-16页 |
| ·响应ABA信号传导转录因子(ABI)的研究 | 第16-19页 |
| ·大肠杆菌表达系统的研究 | 第19-21页 |
| ·T7表达系统 | 第19-20页 |
| ·影响外源蛋白表达的因素 | 第20-21页 |
| ·宿主与载体 | 第20页 |
| ·培养条件 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 拟南芥AtDPBF4基因的分子克隆 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·宿主菌 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第23-25页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·试剂配制 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·拟南芥AtDPBF4基因的克隆 | 第25-28页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·拟南芥总RNA质量检测及浓度测定 | 第26页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第26页 |
| ·PCR法体外扩增拟南芥AtDPBF4基因 | 第26-27页 |
| ·扩增产物的胶回收 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增产物的克隆 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备及连接产物的转化实验 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化实验 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pM-AtDPBF4的鉴定 | 第29-30页 |
| ·测序鉴定及序列分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-34页 |
| ·拟南芥总RNA的提取鉴定 | 第30-31页 |
| ·拟南芥AtDPBF4基因的扩增结果 | 第31页 |
| ·重组pM-AtDPBF4质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·AtDPBF4基因测序及序列分析 | 第32-34页 |
| 第三章 AtDPBF4基因序列结构分析与功能预测 | 第34-43页 |
| ·分析方法 | 第34-37页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第34页 |
| ·ORF(open reading frame)的预测 | 第34页 |
| ·核酸GC含量分布 | 第34页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第34-37页 |
| ·蛋白质物理化学性质分析 | 第34页 |
| ·疏水性预测和分析 | 第34-35页 |
| ·信号肽的预测 | 第35页 |
| ·蛋白质结构的预测 | 第35-37页 |
| ·蛋白序列跨膜区分析 | 第37页 |
| ·蛋白质在细胞内的定位分析 | 第37页 |
| ·系统发育分析 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·ORF(open reading frame)的预测 | 第37页 |
| ·核酸GC含量分布 | 第37-38页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第38-43页 |
| ·蛋白质物理化学性质分析 | 第38-39页 |
| ·信号肽的预测 | 第39-40页 |
| ·蛋白质结构的预测 | 第40-41页 |
| ·蛋白序列跨膜区分析 | 第41-42页 |
| ·蛋白质在细胞内的定位分析 | 第42页 |
| ·系统发育分析 | 第42-43页 |
| 第四章 拟南芥AtDPBF4基因在原核细胞中的表达 | 第43-57页 |
| ·材料与方法 | 第43-50页 |
| ·主要菌种及质粒 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要设备 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·大肠杆菌BL21感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·重组pM-AtDPBF4和pET-32a质粒转化大肠杆菌BL21 | 第45页 |
| ·碱裂解法提取重组质粒pM-AtDPBF4和pET-32a质粒 | 第45页 |
| ·质粒的限制性内切酶酶切反应及目的片段的凝胶回收 | 第45页 |
| ·表达载体pET32a-AtDPBF4的构建 | 第45-46页 |
| ·阳性重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌BL21/pET32a-AtDPBF4生长曲线的测定 | 第47页 |
| ·重组质粒pET32a-AtDPBF4在大肠杆菌BL21中的表达 | 第47-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·阳性转化子的筛选 | 第50-51页 |
| ·重组质粒大小的鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组表达载体pET32a-AtDPBF4的酶切和PCR鉴定 | 第52页 |
| ·大肠杆菌BL21/pET32a-AtDPBF4生长曲线的测定 | 第52页 |
| ·重组表达载体pET32a-AtDPBF4阳性克隆表达鉴定 | 第52-54页 |
| ·重组蛋白的表达与表达形式分析 | 第53页 |
| ·诱导剂浓度对重组蛋白表达的影响 | 第53页 |
| ·诱导培养时间对重组蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
| ·诱导培养温度对重组蛋白表达的影响 | 第54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
