| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-17页 |
| ·RANKL 简介 | 第10-12页 |
| ·OPG/RANKL／RANK 系统 | 第12-13页 |
| ·RANKL 的研究状况及应用前景 | 第13-15页 |
| ·本论文研究工作 | 第15-17页 |
| 第二章 人 RANKL 胞外结构域表达载体的构建及表达 | 第17-35页 |
| ·实验材料和主要仪器 | 第17-18页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·人 RANKL 基因模板的确定 | 第18页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第18页 |
| ·引物设计与合成 | 第18-19页 |
| ·质粒提取 | 第19-20页 |
| ·PCR 扩增与回收、酶连 | 第20-23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·重组载体的确认 | 第23-24页 |
| ·人 RANKL 基因重组表达菌株的构建 | 第24页 |
| ·重组菌株的原核诱导表达 | 第24-27页 |
| ·实验结果 | 第27-32页 |
| ·RANKL 基因目的片段的扩增 | 第27页 |
| ·pET-21b-RANKL 表达载体 PCR 和酶切检测 | 第27-28页 |
| ·重组载体的测序 | 第28-29页 |
| ·重组菌株的原核诱导表达 | 第29页 |
| ·重组菌株原核表达条件的优化 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32-35页 |
| ·表达载体的选择及重组蛋白的表达形式 | 第32-33页 |
| ·RANKL 蛋白的表达及条件优化 | 第33-34页 |
| ·人 RANKL 基因原核表达研究展望 | 第34-35页 |
| 第三章 胱氨酸对人 RANKL 胞外结构域蛋白构象的研究 | 第35-49页 |
| ·引言 | 第35-36页 |
| ·研究的基础 | 第35页 |
| ·研究的意义 | 第35-36页 |
| ·氧化剂的选择 | 第36页 |
| ·仪器设备及实验材料 | 第36-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·实验材料及试剂 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·重组人 RANKL 蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·蛋白质印迹（western blot）鉴定重组人 RANKL 胞外结构域 | 第39-40页 |
| ·蛋白质浓度的计算 | 第40页 |
| ·光谱学检测氧化作用对重组人 RANKL 胞外结构域蛋白结构变化 | 第40-42页 |
| ·实验结果 | 第42-47页 |
| ·RANKL 镍亲和层析纯化 | 第42-43页 |
| ·蛋白质印迹鉴定重组人 RANKL 胞外结构域 | 第43页 |
| ·重组体人 RANKL 胞外结构域蛋白的光谱学检测 | 第43-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录1 攻读学位期间发表论文目录 | 第56页 |
