摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
目录 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·杆状病毒概述 | 第11-15页 |
·杆状病毒分类 | 第11页 |
·杆状病毒结构 | 第11-12页 |
·杆状病毒生活史 | 第12-13页 |
·杆状病毒的应用 | 第13-15页 |
·杆状病毒杀虫剂研究概况 | 第15-20页 |
·杆状病毒杀虫剂简介 | 第15-17页 |
·苏云金芽胞杆菌 cry 基因简介 | 第17-20页 |
·本研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 Cry2Ab-HearNPV 重组病毒的构建及生物学特征研究 | 第21-40页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·病毒、菌株、载体、细胞及试虫 | 第21页 |
·主要试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
·常用溶液配制 | 第22页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·实验操作方法 | 第23-30页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第23页 |
·酶切反应 | 第23-24页 |
·连接反应 | 第24页 |
·PCR 反应 | 第24-25页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第25页 |
·DNA 胶回收 | 第25页 |
·氯化钙法制备感受态细胞 | 第25页 |
·质粒 DNA 的转化 | 第25-26页 |
·目的基因的转座 | 第26页 |
·从大肠肝菌中提取 HearNPV Bacmid | 第26-27页 |
·重组 Bacmid 的转染 | 第27页 |
·从感染病毒的细胞中提取病毒基因组 | 第27页 |
·病毒滴度的测定 | 第27页 |
·病毒生长曲线测定 | 第27页 |
·病毒 DNA 复制曲线测定 | 第27-28页 |
·病毒的扩繁与纯化 | 第28页 |
·病毒的透射电镜观察 | 第28页 |
·病毒的生物测定 | 第28-29页 |
·phI、phII、cry2Ab 基因的克隆 | 第29页 |
·转移载体 Ha.p-phI-cry2Ab-phII-HTb 的构建 | 第29页 |
·pMON7124 转化 E. coli BW25113(HaBacHz8) | 第29-30页 |
·实验技术路线 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-39页 |
·phI、phII、cry2Ab 基因的克隆 | 第30-31页 |
·转移载体的构建 | 第31-32页 |
·pMON7124 转化 E. coli BW25113(HaBacHz8) | 第32-33页 |
·重组 Bacmid 的构建 | 第33-34页 |
·Cry2Ab-HearNPV 的获得 | 第34-35页 |
·Cry2Ab-HearNPV 形态分析 | 第35-36页 |
·Cry2Ab-HearNPV 的生长曲线 | 第36-38页 |
·Cry2Ab-HearNPV 的 DNA 复制分析 | 第38-39页 |
·Cry2Ab-HearNPV 生物活性分析 | 第39页 |
·小结 | 第39-40页 |
第三章 BtCry1Ab 原核表达产物对 CypoGV 的增效作用研究 | 第40-43页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验操作方法 | 第40-41页 |
·BtCry1Ab 目的蛋白的制备和浓度定量 | 第40页 |
·BtCryAb 对 CypoGV-KS1 增效作用测定 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第四章 结论 | 第43-44页 |
第五章 讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录 | 第50-52页 |
缩略词 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |