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HMME介导的光动力疗法治疗骨与软组织肉瘤的疗效及机理研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第1章 引言第11-14页
第2章 材料与方法第14-28页
   ·实验材料第14-18页
     ·实验细胞株第14页
     ·实验动物第14页
     ·试剂及耗材第14-16页
     ·主要仪器第16-17页
     ·主要试剂及配置方法第17-18页
   ·实验方法第18-27页
     ·细胞传代培养第18页
     ·细胞计数第18页
     ·光敏剂 HMME 摄收实验第18-19页
     ·MTT 法检测 HMME 在肉瘤细胞中最佳孵育时间第19页
     ·MTT 法检测肉瘤细胞存活率第19页
     ·荧光倒置显微镜下观察细胞形态第19-20页
     ·ANNEXINV-FITC/PI 法检测骨肉瘤细胞凋亡第20页
     ·HMME-PDT 对悬浮培养细胞的影响第20页
     ·HOECHST33342 染色法观察细胞凋亡第20-21页
     ·QRT-PCR 检测 HMME-PDT 诱导的相关凋亡基因表达情况第21-22页
     ·蛋白提取及定量第22-23页
     ·WESTERN BLOTTING 检测初筛 CASPASE-3、BCL-X、P53、RELA 蛋白相对表达第23-24页
     ·WESTERN BLOTTING 检测 CASPASE-1、3、6、9 和 PARP 蛋白相对表达第24-25页
     ·HMME-PDT 介导的细胞死亡第25页
     ·动物模型制备第25页
     ·观察 PDT 在动物模型中的抗肿瘤效应第25-27页
   ·统计学方法第27-28页
第3章 实验结果第28-41页
   ·HMME 选择性聚集于骨肿瘤细胞第28-29页
   ·HMME 在肉瘤细胞中的最佳孵育时间第29页
   ·HMME-PDT 抑制骨肿瘤细胞存活率第29-30页
   ·镜下细胞形态学变化第30-31页
   ·HMME-PDT 诱导贴壁骨肉瘤细胞凋亡第31-32页
   ·HMME-PDT 诱导悬浮培养骨肉瘤细胞凋亡第32-33页
   ·HOECHST33342 染色法观察到骨肉瘤细胞凋亡第33页
   ·QRT-PCR 检测各凋亡基因 MRNA 表达水平第33-35页
   ·WESTERN BLOTTING 初筛检测 CASPASE-3、BCL-X 、P53、RELA 蛋白相对表达情况第35-36页
   ·Z-VAD-FMK 及 NEC-1 检测 HMME-PDT 介导细胞死亡第36页
   ·WESTERN BLOTTING 检测 CASPASE-1、3、6、9 和 PARP 蛋白相对表达情况第36-37页
   ·HMME-PDT 对鼠骨肉瘤抑制实验第37-38页
   ·HE 染色观察肿瘤组织形态学改变第38-39页
   ·免疫组化检测小鼠肿瘤经 HMME-PDT 处理后 CASPASE-1、3、6、9 和PARP 表达第39-41页
第4章 讨论第41-45页
   ·光动力疗法在骨肿瘤基础研究中的进展第41页
   ·HMME-PDT 对好发的骨与软组织肉瘤细胞的杀伤效应第41-42页
   ·HMME-PDT 介导的肉瘤细胞死亡形式第42页
   ·HMME-PDT 介导的肉瘤细胞凋亡机制第42-43页
   ·HMME-PDT 对体内骨肉瘤抑制作用第43-45页
第5章 结论及展望第45-46页
   ·结论第45页
   ·展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-49页
攻读学位期间的研究成果第49-50页
综述第50-57页
 参考文献第55-57页

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