摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-28页 |
·实验材料 | 第14-18页 |
·实验细胞株 | 第14页 |
·实验动物 | 第14页 |
·试剂及耗材 | 第14-16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·主要试剂及配置方法 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-27页 |
·细胞传代培养 | 第18页 |
·细胞计数 | 第18页 |
·光敏剂 HMME 摄收实验 | 第18-19页 |
·MTT 法检测 HMME 在肉瘤细胞中最佳孵育时间 | 第19页 |
·MTT 法检测肉瘤细胞存活率 | 第19页 |
·荧光倒置显微镜下观察细胞形态 | 第19-20页 |
·ANNEXINV-FITC/PI 法检测骨肉瘤细胞凋亡 | 第20页 |
·HMME-PDT 对悬浮培养细胞的影响 | 第20页 |
·HOECHST33342 染色法观察细胞凋亡 | 第20-21页 |
·QRT-PCR 检测 HMME-PDT 诱导的相关凋亡基因表达情况 | 第21-22页 |
·蛋白提取及定量 | 第22-23页 |
·WESTERN BLOTTING 检测初筛 CASPASE-3、BCL-X、P53、RELA 蛋白相对表达 | 第23-24页 |
·WESTERN BLOTTING 检测 CASPASE-1、3、6、9 和 PARP 蛋白相对表达 | 第24-25页 |
·HMME-PDT 介导的细胞死亡 | 第25页 |
·动物模型制备 | 第25页 |
·观察 PDT 在动物模型中的抗肿瘤效应 | 第25-27页 |
·统计学方法 | 第27-28页 |
第3章 实验结果 | 第28-41页 |
·HMME 选择性聚集于骨肿瘤细胞 | 第28-29页 |
·HMME 在肉瘤细胞中的最佳孵育时间 | 第29页 |
·HMME-PDT 抑制骨肿瘤细胞存活率 | 第29-30页 |
·镜下细胞形态学变化 | 第30-31页 |
·HMME-PDT 诱导贴壁骨肉瘤细胞凋亡 | 第31-32页 |
·HMME-PDT 诱导悬浮培养骨肉瘤细胞凋亡 | 第32-33页 |
·HOECHST33342 染色法观察到骨肉瘤细胞凋亡 | 第33页 |
·QRT-PCR 检测各凋亡基因 MRNA 表达水平 | 第33-35页 |
·WESTERN BLOTTING 初筛检测 CASPASE-3、BCL-X 、P53、RELA 蛋白相对表达情况 | 第35-36页 |
·Z-VAD-FMK 及 NEC-1 检测 HMME-PDT 介导细胞死亡 | 第36页 |
·WESTERN BLOTTING 检测 CASPASE-1、3、6、9 和 PARP 蛋白相对表达情况 | 第36-37页 |
·HMME-PDT 对鼠骨肉瘤抑制实验 | 第37-38页 |
·HE 染色观察肿瘤组织形态学改变 | 第38-39页 |
·免疫组化检测小鼠肿瘤经 HMME-PDT 处理后 CASPASE-1、3、6、9 和PARP 表达 | 第39-41页 |
第4章 讨论 | 第41-45页 |
·光动力疗法在骨肿瘤基础研究中的进展 | 第41页 |
·HMME-PDT 对好发的骨与软组织肉瘤细胞的杀伤效应 | 第41-42页 |
·HMME-PDT 介导的肉瘤细胞死亡形式 | 第42页 |
·HMME-PDT 介导的肉瘤细胞凋亡机制 | 第42-43页 |
·HMME-PDT 对体内骨肉瘤抑制作用 | 第43-45页 |
第5章 结论及展望 | 第45-46页 |
·结论 | 第45页 |
·展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
综述 | 第50-57页 |
参考文献 | 第55-57页 |