| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-15页 |
| 1 氟在机体内的代谢 | 第9页 |
| 2 氟对机体生理功能的影响 | 第9-12页 |
| ·对骨骼的影响 | 第9-10页 |
| ·对免疫的系统的影响 | 第10页 |
| ·对生殖系统的影响 | 第10页 |
| ·对神经系统的影响 | 第10-11页 |
| ·对消化道的影响 | 第11页 |
| ·对牙齿防龋作用的影响 | 第11-12页 |
| 3 氟与口腔内微生物的关系 | 第12-13页 |
| ·氟对口腔内细菌生长繁殖的抑制作用 | 第12页 |
| ·氟对口腔内微生物糖代谢的影响 | 第12-13页 |
| ·氟对口腔内微生物产酸的影响 | 第13页 |
| 4 氟对其他微生物的影响 | 第13页 |
| 5 绿色荧光蛋GFP在分子生物学上的应用 | 第13-14页 |
| 6 本试验的立题依据及研究目的 | 第14-15页 |
| 第一章 不同浓度氟对大肠杆菌生长繁殖的影响 | 第15-24页 |
| 引言 | 第15页 |
| 1 材料与方法 | 第15-18页 |
| ·试验菌株 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂及配制 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌的分离培养 | 第16页 |
| ·平板活菌计数 | 第16-17页 |
| ·氟对大肠杆菌质粒GFP缺失的影响 | 第17-18页 |
| ·数据处理 | 第18页 |
| 2 结果与分析 | 第18-21页 |
| ·氟对E.coli BL21-pGFP生长的影响 | 第18-20页 |
| ·不同浓度氟化钠对大肠杆菌质粒缺失的影响 | 第20-21页 |
| 3 讨论 | 第21-23页 |
| 4 小结 | 第23-24页 |
| 第二章 氟对GFP基因及蛋白表达的影响 | 第24-40页 |
| 引言 | 第24页 |
| 1 材料与方法 | 第24-31页 |
| ·试验菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·试验分组 | 第25页 |
| ·平板活菌计数及荧光值检测 | 第25页 |
| ·细菌总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·细菌总RNA的质量鉴定 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR检测细菌中GFP基因mRNA表达 | 第26-29页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR反应体系的建立 | 第27-28页 |
| ·Real-Time RT-PCR扩增条件建立 | 第28-29页 |
| ·PCR产物鉴定 | 第29页 |
| ·数据处理与分析 | 第29页 |
| ·大肠杆菌内GFP的蛋白检测 | 第29-31页 |
| ·SDS-PAGE电泳所用试剂及配方 | 第29-30页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第30页 |
| ·细菌总蛋白的提取 | 第30页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE | 第30-31页 |
| ·蛋白胶片分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·不同浓度氟对GFP荧光信号强度的影响 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR对细菌目的基因与内参基因的检测结果 | 第32-34页 |
| ·细菌RNA的完整性、产率和纯度 | 第32-33页 |
| ·荧光定量RT-PCR结果 | 第33-34页 |
| ·样品中16SrRNA和GFP基因扩增动力学曲线分析 | 第33页 |
| ·样品中16SrRNA和GFP基因融解曲线分析结果 | 第33-34页 |
| ·荧光定量PCR扩增产物的鉴定 | 第34页 |
| ·不同浓度氟对GFP mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
| ·不同浓度氟对GFP蛋白表达的检测结果 | 第35-38页 |
| ·对细菌蛋白的SDS-PAGE电泳结果分析 | 第36页 |
| ·GFP蛋白表达的SDS-PAGE分析 | 第36-38页 |
| 3. 讨论 | 第38-39页 |
| 4. 小结 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| Abstract | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
