| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语中英文对照 | 第12-13页 |
| 第一部分 综述 | 第13-35页 |
| 第一章 PRRSV及基因工程育种 | 第13-23页 |
| 1 PRRSV及其受体基因研究 | 第14-16页 |
| ·PRRSV基本特性 | 第14-15页 |
| ·PRRSV的致病机理 | 第15页 |
| ·PRRSV的受体基因 | 第15-16页 |
| 2 猪的基因工程育种概述 | 第16-19页 |
| ·猪基因工程育种历程 | 第17页 |
| ·猪的基因工程育种方法 | 第17-18页 |
| ·PRRSV基因工程抗性育种策略 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-23页 |
| 第二章 锌指核酸酶技术在基因组定点修饰中的应用 | 第23-35页 |
| 1 锌指核酸酶的结构及其作用原理 | 第23-25页 |
| ·锌指核酸酶结构 | 第23-24页 |
| ·锌指核酸酶作用原理 | 第24-25页 |
| 2 锌指核酸酶的设计与效果评价 | 第25-27页 |
| ·特异性的ZFN的设计 | 第25-27页 |
| ·锌指核酸酶的效果评价 | 第27页 |
| 3 锌指核酸酶的应用 | 第27-29页 |
| ·疾病治疗 | 第27-28页 |
| ·模式动物生产 | 第28页 |
| ·动物生物反应器 | 第28-29页 |
| 4 锌指核酸酶技术前景 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-35页 |
| 第二部分 实验部分 | 第35-67页 |
| 第三章 猪胎儿成纤维细胞的分离培养和电穿孔转染研究 | 第35-45页 |
| 摘要 | 第35-36页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-41页 |
| ·猪胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第38-39页 |
| ·猪胎儿成纤维细胞生长曲线 | 第39页 |
| ·转染质粒pEGFP-N1的提取 | 第39页 |
| ·质粒浓度、电压和脉冲时间对转染效率的影响 | 第39-41页 |
| ·温度处理对转染效率的影响 | 第41页 |
| ·电压对细胞死亡率的影响 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 第四章 猪卵母细胞体外发育及核移植系统的优化 | 第45-53页 |
| 摘要 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·卵母细胞的获取与成熟 | 第46页 |
| ·孤雌胚胎的激活与体外培养 | 第46-47页 |
| ·卵裂率及囊胚率的检查 | 第47页 |
| ·试验设计 | 第47-48页 |
| ·体细胞核移植操作程序 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-51页 |
| ·不同激素处理对卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响 | 第49页 |
| ·不同激活方案对孤雌胚胎体外发育的影响 | 第49-50页 |
| ·优化后的卵母细胞体外成熟及激活方案应用于体细胞核移植 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第五章 ZFN技术生产猪Sn基因敲除胚胎的初步探索 | 第53-67页 |
| 摘要 | 第53-54页 |
| 1 材料与方法 | 第54-59页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-64页 |
| ·单细胞培养方法的建立 | 第59-60页 |
| ·基因突变检测方法的建立 | 第60页 |
| ·单胚胎巢式PCR检测方法的建立 | 第60-61页 |
| ·pC559-pIRES2-EGFP等三个共表达载体的基因敲除检测 | 第61页 |
| ·AZN载体的验证 | 第61-62页 |
| ·NI3-26和NI3-565两个通用真核表达载体的效果评价 | 第62-64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| ·单细胞培养方法 | 第64页 |
| ·基因突变检测方法 | 第64页 |
| ·单胚胎PCR检测方法 | 第64页 |
| ·ZFN载体的验证 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 发表文章 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
